Pereiti prie turinio
L-WRN
Audinys
Jungiamasis audinys

Dokumentai

L-WRN

Cell line · Prekės numeris 300641

L-WRN ląstelių linija yra pelių fibroblastų ląstelių linija, gauta iš L ląstelių, kurios yra pelių fibroblastai, iš pradžių izoliuoti iš jungiamojo audinio. L-W...

€550.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų
Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

L-WRN ląstelių linija - tai pelių fibroblastų ląstelių linija, gauta iš L ląstelių, kurios yra pelių fibroblastai, iš pradžių išskirti iš jungiamojo audinio. L-WRN ląstelės buvo sukurtos taip, kad stabiliai ekspresuotų Wnt3a, R-spondiną 3 ir Nogginą. Šie veiksniai yra labai svarbūs žarnyno organoidų ir kamieninių ląstelių kultūrų augimui ir palaikymui. Šių baltymų perteklinė ekspresija skatina žarnyno kamieninių ląstelių proliferaciją ir diferenciaciją, todėl L-WRN ląstelės yra vertingas įrankis žarnyno biologijai tirti ir ligoms modeliuoti.

L-WRN ląstelės ne tik naudojamos organoidų kultūroje, bet ir yra patikimas modelis Wnt signalų keliams tirti. Wnt signalai yra labai svarbūs reguliuojant ląstelių likimą, proliferaciją ir migraciją vystymosi ir suaugusių audinių metu. L-WRN ląstelės yra pastovus ir kontroliuojamas Wnt3a, R-spondino 3 ir Noggino šaltinis, todėl L-WRN ląstelės palengvina šių procesų molekulinių mechanizmų tyrimus. Mokslininkai gali naudoti šias ląsteles, kad ištirtų šių signalinių molekulių vaidmenį įvairiose biologinėse srityse, įskaitant vėžį, audinių regeneraciją ir vystymosi biologiją.

Apskritai L-WRN ląstelių linija yra galinga biomedicininių tyrimų priemonė dėl jos gebėjimo auginti sudėtingas trimates kultūras ir naudingumo tiriant pagrindinius signalinius kelius. Jos vaidmuo plėtojant žarnyno kamieninių ląstelių tyrimus ir jos indėlis į Wnt signalizacijos supratimą pabrėžia jos svarbą ląstelių ir molekulinės biologijos srityje.

Audinys
Jungiamasis audinys
Paraiškos
3D ląstelių kultūra

02Klasifikacija

Organizmas
Pele
Seksas
Vyras
Augimo savybės
Prisijungęs
GMO statusas
GMO-S1
Išsami informacija apie GMO statusą
GMO-S1: This murine NIH-3T3-derived cell line (L-WRN) contains expression constructs for Wnt3a, R-spondin-3, and Noggin, including SV40 DNA sequences and dual antibiotic markers (hph and Tn5-neo), enabling secretion of these signaling molecules. The inserts are stably present in NIH-3T3-based cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Fibroblastai

04Identifikatoriai

Nuoroda
L-WRN (Cytion katalogo numeris 300641)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
10090
Cellosaurus
CVCL_DA06

05Išraiška ir jautrumas

Baltojų baltymų ekspresija
Wnt-3A, R-spondinas, nogginas

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
DMEM, š: 4,5 g/l gliukozės, š: 4 mM L-glutamino, š: 3,7 g/l NaHCO3, š: 1,0 mM natrio piruvato (Cytion gaminio numeris 820300a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Veislė / porūšis
C3H/An
Donoro amžius
100 dienų