L-WRN
Cell line · رقم المنتج 300641
سلسلة الخلايا L-WRN هي سلسلة خلايا ليفية فئرانية مشتقة من الخلايا L، وهي خلايا ليفية فئرانية تم عزلها في الأصل من النسيج الضام. L-W...
التخصيص / التوصيات
- L-WRNCell line€550.00
موصى بها (أحدث دفعة)
01معلومات عامة
- الوصف
الخط الخلوي L-WRN هو خط خلايا أرومة ليفية للفئران مشتق من خلايا L، وهي أرومات ليفية للفأر تم عزلها في الأصل من النسيج الضام. تمت هندسة خلايا L-WRN للتعبير بثبات عن Wnt3a وR-spondin 3 وNoggin. هذه العوامل ضرورية لنمو الخلايا العضوية المعوية ومزارع الخلايا الجذعية والحفاظ عليها. يعزز الإفراط في التعبير عن هذه البروتينات من تكاثر الخلايا الجذعية المعوية وتمايزها، مما يجعل خلايا L-WRN أداة قيّمة لدراسة بيولوجيا الأمعاء ونمذجة الأمراض.
وبالإضافة إلى تطبيقها في الاستزراع العضوي، تُستخدم خلايا L-WRN كنموذج قوي لدراسة مسارات إشارات Wnt. تلعب إشارات Wnt دورًا محوريًا في تنظيم مصير الخلايا وتكاثرها وهجرتها أثناء النمو وفي الأنسجة البالغة. من خلال توفير مصدر متسق ومضبوط لإشارات Wnt3a وR-spondin 3 وNoggin، تسهل خلايا L-WRN البحث في الآليات الجزيئية الكامنة وراء هذه العمليات. يمكن للباحثين استخدام هذه الخلايا لتشريح أدوار جزيئات الإشارات هذه في سياقات بيولوجية مختلفة، بما في ذلك السرطان وتجديد الأنسجة والبيولوجيا التنموية.
وبشكل عام، يعد خط الخلايا L-WRN أداة قوية في الأبحاث الطبية الحيوية نظرًا لقدرته على دعم نمو مزارع معقدة ثلاثية الأبعاد وفائدته في دراسة مسارات الإشارات الرئيسية. يبرز دورها في تطوير أبحاث الخلايا الجذعية المعوية ومساهماتها في فهمنا لإشارات Wnt أهميتها في مجال البيولوجيا الخلوية والجزيئية.
- الأنسجة
- النسيج الضام
- التطبيقات
- زراعة الخلايا ثلاثية الأبعاد
02التصنيف
- كائن حي
- الماوس
- الجنس
- ذكر
- خصائص النمو
- الملتزم
- حالة الكائنات المعدلة وراثيًا
- GMO-S1
- تفاصيل حالة الكائنات المعدلة وراثيًا
- GMO-S1: This murine NIH-3T3-derived cell line (L-WRN) contains expression constructs for Wnt3a, R-spondin-3, and Noggin, including SV40 DNA sequences and dual antibiotic markers (hph and Tn5-neo), enabling secretion of these signaling molecules. The inserts are stably present in NIH-3T3-based cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- مستوى السلامة البيولوجية
- 1
03الخصائص
- المورفولوجيا
- الأرومة الليفية
04المعرّفات
- المرجع
- L-WRN (الرقم الكتالوجي لسيتيون 300641)
- رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
- 10090
- سيلوصور
- CVCL_DA06
05التعبير والقابلية للإصابة
- التعبير البروتيني
- Wnt-3A, R-spondin, noggin
06التعامل مع النباتات وزراعتها
- وسط الاستزراع
- DMEM، ث: 4.5 جم/لتر جلوكوز، ث: 4 مليمتر جلوتامين، ث: 3.7 جم/لتر NaHCO3، ث: 1.0 مليمتر بيروفات الصوديوم (رقم المادة 820300a من سايتيون)
- بيئة الحضانة
37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.
- المكملات الغذائية
- قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
- كاشف التفكك
- أكوتاس
- إعادة الاستنبات
- قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
- إذابة الثلج والزراعة
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد
- العقم
يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.
ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.
- وسط التجميد
- كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
- شروط التخزين
للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.
- شروط الشحن
تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.
08المانح
- السلالة / النوع الفرعي
- ج 3 هـ/ع
- عمر المتبرع
- 100 يوم
09الشؤون القانونية والسلامة
- احتياطات السلامة
- عند التخطيط لتخزين القارورة المبردة في النيتروجين السائل لإذابتها في المستقبل، من الضروري الالتزام بتدابير السلامة الصارمة. من الضروري ارتداء قفازات وملابس واقية مناسبة، كما يلزم استخدام قناع الوجه أو نظارات السلامة أثناء نقل العينات المجمدة من خزان النيتروجين السائل أو إليه. وذلك للتخفيف من خطر الإصابة من الانفجارات المحتملة للنيتروجين المبرد عند الإزالة، والتي يمكن أن تؤدي إلى قذف شظايا حادة.
- الضمان
في Cytion، نلتزم في Cytion بجودة منتجاتنا وحيويتها. نحن نضمن أن تكون خلايانا قابلة للحياة في بداية الاستزراع لمدة 60 يومًا بعد الشحن من منشآتنا. نؤكد أن جميع المواد مطابقة للمواصفات الموضحة في شهادة التحليل و/أو ورقة المنتج
للحصول على التفاصيل الكاملة، يُرجى الرجوع إلى <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">بيان الضمان
- يلزم إبرام اتفاقية نقل المواد
- نعم
