Prejsť na obsah
L-WRN
Tkanivo
Spojivové tkanivo

Dokumenty

L-WRN

Cell line · Číslo výrobku 300641

Buněčná línia L-WRN je myšia fibroblastová buněčná línia odvodená z L-buniek, čo sú myšie fibroblasty pôvodne izolované z spojivového tkaniva. L-W...

€550.00bez DPH a poštovného
Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunková línia L-WRN je línia myších fibroblastov odvodená z buniek L, čo sú myšie fibroblasty pôvodne izolované zo spojivového tkaniva. Bunky L-WRN boli vytvorené tak, aby stabilne exprimovali Wnt3a, R-spondín 3 a Noggin. Tieto faktory sú rozhodujúce pre rast a udržiavanie črevných organoidov a kultúr kmeňových buniek. Nadmerná expresia týchto proteínov zvyšuje proliferáciu a diferenciáciu črevných kmeňových buniek, vďaka čomu sú bunky L-WRN cenným nástrojom na štúdium črevnej biológie a modelovanie chorôb.

Okrem ich použitia v organoidných kultúrach slúžia bunky L-WRN ako robustný model na skúmanie signálnych dráh Wnt. Signalizácia Wnt je kľúčová pri regulácii osudu, proliferácie a migrácie buniek počas vývoja a v dospelých tkanivách. Tým, že bunky L-WRN poskytujú konzistentný a kontrolovaný zdroj Wnt3a, R-spondínu 3 a Nogginu, uľahčujú výskum molekulárnych mechanizmov, ktoré sú základom týchto procesov. Výskumníci môžu tieto bunky použiť na rozbor úloh týchto signálnych molekúl v rôznych biologických kontextoch vrátane rakoviny, regenerácie tkanív a vývojovej biológie.

Celkovo je bunková línia L-WRN výkonným nástrojom v biomedicínskom výskume vďaka svojej schopnosti podporovať rast komplexných trojrozmerných kultúr a jej využiteľnosti pri štúdiu kľúčových signálnych dráh. Jej úloha v rozvoji výskumu črevných kmeňových buniek a jej prínos k nášmu chápaniu signalizácie Wnt zdôrazňujú jej význam v oblasti bunkovej a molekulárnej biológie.

Tkanivo
Spojivové tkanivo
Aplikácie
3D kultivácia buniek

02Klasifikácia

Organizmus
Myš
Sex
Muž
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Stav GMO
GMO-S1
Podrobnosti o štatúte GMO
GMO-S1: This murine NIH-3T3-derived cell line (L-WRN) contains expression constructs for Wnt3a, R-spondin-3, and Noggin, including SV40 DNA sequences and dual antibiotic markers (hph and Tn5-neo), enabling secretion of these signaling molecules. The inserts are stably present in NIH-3T3-based cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Fibroblasty

04Identifikátory

Citácia
L-WRN (katalógové číslo Cytion 300641)
Daňové identifikačné číslo NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_DA06

05Prejav a náchylnosť

Expresia proteínov
Wnt-3A, R-spondín, noggin

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutamínu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Plemeno / poddruh
C3H/An
Vek darcu
100 dní