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L-WRN
ティッシュ
結合組織

L-WRN

Cell line · 製品番号 300641

L-WRN細胞株は、もともと結合組織から単離されたマウスの線維芽細胞であるL細胞に由来する、マウスの線維芽細胞株である。L-W...

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01概要

説明

L-WRN細胞株は、もともと結合組織から単離されたマウス線維芽細胞であるL細胞に由来するマウス線維芽細胞株である。L-WRN細胞は、Wnt3a、R-スポンジン3、ノギンを安定に発現するように操作されている。これらの因子は腸オルガノイドや幹細胞培養の成長と維持に重要である。これらのタンパク質を過剰発現させると、腸管幹細胞の増殖と分化が促進されるため、L-WRN細胞は腸管生物学や疾患モデル研究のための貴重なツールとなる。

オルガノイド培養への応用に加え、L-WRN細胞はWntシグナル伝達経路を研究するための強固なモデルとして役立っている。Wntシグナル伝達は、発生過程や成体組織における細胞運命、増殖、遊走の制御において極めて重要である。Wnt3a、R-spondin 3、Nogginの一貫した制御された供給源を提供することにより、L-WRN細胞はこれらのプロセスの根底にある分子メカニズムに関する研究を容易にする。研究者はこれらの細胞を用いて、癌、組織再生、発生生物学を含む様々な生物学的背景におけるこれらのシグナル伝達分子の役割を解明することができる。

全体として、L-WRN細胞株は、複雑な三次元培養の成長をサポートする能力と、主要なシグナル伝達経路の研究における有用性から、生物医学研究における強力なツールである。腸管幹細胞研究の進展におけるその役割と、Wntシグナル伝達の理解への貢献は、細胞分子生物学分野におけるその重要性を際立たせている。

ティッシュ
結合組織
用途
3D細胞培養

02分類

生物
マウス
セックス
男性
成長特性
アドヘレント
GMOの有無
GMO-S1
GMOのステータスに関する詳細
GMO-S1: This murine NIH-3T3-derived cell line (L-WRN) contains expression constructs for Wnt3a, R-spondin-3, and Noggin, including SV40 DNA sequences and dual antibiotic markers (hph and Tn5-neo), enabling secretion of these signaling molecules. The inserts are stably present in NIH-3T3-based cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
バイオセーフティレベル
1

03特徴

形態学
線維芽細胞

04識別子

引用
L-WRN (Cytion カタログ番号 300641)
NCBI 納税者番号
10090
セロサウルス
CVCL_DA06

05発現と感受性

タンパク質の発現
Wnt-3A, R-スポンジン, ノギン

06取り扱いと飼育

培地
DMEM、w:4.5g/Lグルコース、w:4mM L-グルタミン、w:3.7g/L NaHCO3、w:1.0mMピルビン酸ナトリウム(Cytion品番820300a)
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に10% FBSを加える
解離試薬
アキュターゼ
継代培養
接着した細胞から古いメデュームを取り除き、カルシウムとマグネシウ ムを除いたPBSで洗浄する。T25フラスコでは3-5ml、T75フラスコでは5-10mlのPBSを使用する。次に、T25フラスコでは1-2ml、T75フラスコでは2.5mlのアキュターゼで細胞を完全に覆う。室温で8-10分間インキュベートし、細胞を剥離させる。インキュベーション後、細胞を10mlの培地と静かに混合して再懸濁し、300xgで3分間遠心する。上清を捨て、細胞を新しいメデュームに懸濁し、新しいメデュームの入った新しいフラスコに移す。
解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地(FBSを含む)+10%DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用している。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

08寄付者

品種/亜種
C3H/An
ドナーの年齢
100日