L-WRN
Cell line · Termékszám 300641
Az L-WRN sejtvonal egy egér fibroblaszt-sejtvonal, amely az L-sejtekből származik; ezek eredetileg kötőszövetből izolált egér fibroblasztok. L-W...
Személyre szabás / Ajánlások
- L-WRNCell line€550.00
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
01Általános információk
- Leírás
Az L-WRN sejtvonal egy egér fibroblaszt sejtvonal, amely az L sejtekből származik, amelyek eredetileg kötőszövetből izolált egér fibroblasztok. Az L-WRN sejteket úgy alakították ki, hogy stabilan expresszálják a Wnt3a, az R-spondin 3 és a Noggin sejteket. Ezek a faktorok kritikusak a bélorganoidok és őssejtkultúrák növekedéséhez és fenntartásához. E fehérjék túlterjedése fokozza a bél őssejtek proliferációját és differenciálódását, így az L-WRN sejtek értékes eszközzé válnak a bélbiológia és a betegségek modellezésének tanulmányozásához.
Az organoidkultúrában való alkalmazásuk mellett az L-WRN sejtek robusztus modellként szolgálnak a Wnt jelátviteli útvonalak vizsgálatához. A Wnt jelátvitel kulcsfontosságú a sejtsors, a proliferáció és a migráció szabályozásában a fejlődés során és a felnőtt szövetekben. A Wnt3a, az R-spondin 3 és a Noggin konzisztens és ellenőrzött forrását biztosítva az L-WRN sejtek megkönnyítik az e folyamatok hátterében álló molekuláris mechanizmusok kutatását. A kutatók ezeket a sejteket felhasználhatják e jelátviteli molekulák szerepének feltárására különböző biológiai összefüggésekben, beleértve a rákot, a szöveti regenerációt és a fejlődésbiológiát.
Összességében az L-WRN sejtvonal hatékony eszköz az orvosbiológiai kutatásban, mivel képes komplex háromdimenziós kultúrák növekedését támogatni, és a kulcsfontosságú jelátviteli útvonalak tanulmányozására alkalmas. A bélrendszeri őssejtek kutatásában betöltött szerepe és a Wnt-szignálok megértéséhez való hozzájárulása kiemeli jelentőségét a sejt- és molekuláris biológia területén.
- Szövet
- Kötőszövet
- Alkalmazások
- 3D sejtkultúra
02Osztályozás
- Organizmus
- Egér
- Szex
- Férfi
- Növekedési tulajdonságok
- Hűséges
- GMO-státusz
- GMO-S1
- A GMO-státuszra vonatkozó részletek
- GMO-S1: This murine NIH-3T3-derived cell line (L-WRN) contains expression constructs for Wnt3a, R-spondin-3, and Noggin, including SV40 DNA sequences and dual antibiotic markers (hph and Tn5-neo), enabling secretion of these signaling molecules. The inserts are stably present in NIH-3T3-based cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biológiai biztonsági szint
- 1
03Jellemzők
- Morfológia
- Fibroblasztok
04Azonosítók
- Hivatkozás
- L-WRN (Cytion katalógusszám: 300641)
- NCBI adóazonosító szám
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_DA06
05Kifejeződés és fogékonyság
- Fehérjeexpresszió
- Wnt-3A, R-spondin, noggin
06Kezelés és tenyésztés
- Táptalaj
- DMEM, w: 4,5 g/L glükóz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM nátrium-piruvát (Cytion cikkszám 820300a)
- Inkubációs környezet
37°C, 5%CO2, párásított légkör.
- Kiegészítők
- A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
- Diszociációs reagens
- Accutase
- Átültetés
- Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
- Felolvasztás és tenyésztés
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás
- Meddőség
A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.
A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.
- Fagyasztóközeg
- Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
- Tárolási feltételek
Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.
- Szállítási feltételek
A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.
08Adományozó
- Faj / alfaj
- C3H/An
- Az adományozó életkora
- 100 nap
09Jogi és biztonsági információk
- Biztonsági óvintézkedések
- Ha egy kriovialitást folyékony nitrogénben tervezünk tárolni a későbbi kiolvasztás céljából, akkor kötelező betartani a szigorú biztonsági intézkedéseket. A megfelelő védőkesztyű és védőruházat elengedhetetlen, és a fagyasztott minták folyékony nitrogéntartályba vagy a folyékony nitrogéntartályból történő átvitele során arcmaszk vagy védőszemüveg használata szükséges. Ez azért van, hogy csökkentsék a kriovialis anyagok eltávolításakor bekövetkező esetleges robbanásból eredő sérülésveszélyt, amely éles szilánkok kilövellését eredményezheti.
- Garancia
A Cytionnál kiállunk termékeink minősége és életképessége mellett. Garantáljuk, hogy sejtjeink a tenyésztés megkezdésekor életképesek lesznek, a létesítményünkből történő kiszállítás után 60 napig. Biztosítjuk, hogy minden anyag megfelel az analitikai tanúsítványban és/vagy a terméklapon leírt specifikációknak
A teljes részleteket lásd <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Garancia nyilatkozatunkban
- Anyagátadási megállapodás szükséges
- Igen
