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L-WRN
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결합 조직

L-WRN

Cell line · 제품 번호 300641

L-WRN 세포주는 원래 결합 조직에서 분리된 마우스 섬유아세포인 L 세포에서 유래한 마우스 섬유아세포주입니다. L-W...

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01일반 정보

설명

L-WRN 세포주는 원래 결합 조직에서 분리된 마우스 섬유아세포인 L 세포에서 유래한 쥐 섬유아세포 세포주입니다. L-WRN 세포는 Wnt3a, R-spondin 3 및 Noggin을 안정적으로 발현하도록 설계되었습니다. 이러한 인자들은 장 오가노이드와 줄기세포 배양의 성장과 유지에 매우 중요합니다. 이러한 단백질의 과발현은 장 줄기세포의 증식과 분화를 향상시켜 L-WRN 세포를 장 생물학 및 질병 모델링 연구에 유용한 도구로 만듭니다.

오가노이드 배양에 적용하는 것 외에도 L-WRN 세포는 Wnt 신호 경로를 조사하는 강력한 모델 역할을 합니다. Wnt 신호는 발달 과정과 성인 조직에서 세포의 운명, 증식, 이동을 조절하는 데 중추적인 역할을 합니다. L-WRN 세포는 일관되고 제어된 Wnt3a, R-spondin 3 및 Noggin의 공급원을 제공함으로써 이러한 과정의 기초가 되는 분자 메커니즘에 대한 연구를 용이하게 합니다. 연구자들은 이 세포를 사용하여 암, 조직 재생, 발달 생물학 등 다양한 생물학적 맥락에서 이러한 신호 분자의 역할을 분석할 수 있습니다.

전반적으로 L-WRN 세포주는 복잡한 3차원 배양의 성장을 지원하고 주요 신호 경로를 연구하는 데 유용하기 때문에 생물의학 연구에서 강력한 도구로 활용되고 있습니다. 장 줄기세포 연구의 발전과 Wnt 신호 전달에 대한 이해에 기여하는 역할은 세포 및 분자 생물학 분야에서 그 중요성을 강조합니다.

티슈
결합 조직
응용 분야
3D 세포 배양

02분류

생물체
마우스
성
남성
성장 특성
준수자
유전자 변형 여부
GMO-S1
유전자 변형 생물(GMO) 여부 상세 정보
GMO-S1: This murine NIH-3T3-derived cell line (L-WRN) contains expression constructs for Wnt3a, R-spondin-3, and Noggin, including SV40 DNA sequences and dual antibiotic markers (hph and Tn5-neo), enabling secretion of these signaling molecules. The inserts are stably present in NIH-3T3-based cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
생물안전 등급
1

03특징

형태학
섬유아세포

04식별자

인용
L-WRN(사이티온 카탈로그 번호 300641)
NCBI 세금 식별번호
10090
셀로사우루스
CVCL_DA06

05발현 및 감수성

단백질 발현
Wnt-3A, R-스폰딘, 노긴

06취급 및 배양

배지
DMEM, w: 4.5g/L 포도당, w: 4mM L-글루타민, w: 3.7g/L NaHCO3, w: 1.0mM 피루브산 나트륨(사이티온 제품 번호 820300a)
배양 조건

37°C, 5%CO2, 습한 대기.

건강보조식품
10% FBS로 배지를 보충합니다
분리 시약
아큐타제
재배양
부착된 세포에서 오래된 배지를 제거하고 칼슘과 마그네슘이 없는 PBS로 세척합니다. T25 플라스크의 경우 3~5ml, T75 플라스크의 경우 5~10ml의 PBS를 사용합니다. 그런 다음 T25 플라스크의 경우 1~2㎖, T75 플라스크의 경우 2.5㎖를 사용하여 세포를 Accutase로 완전히 덮습니다. 세포를 분리하기 위해 실온에서 8~10분간 배양합니다. 배양 후 세포를 배지 10ml와 부드럽게 혼합하여 재부유시킨 다음 300xg에서 3분간 원심분리합니다. 상층액을 버리고 세포를 신선한 배지에 다시 부유시킨 후 이미 신선한 배지가 들어 있는 새 플라스크에 옮깁니다.
해동 및 배양
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07품질 관리 및 냉동 보존

불임

마이코플라스마 오염은 PCR 기반 분석법과 발광 기반 마이코플라스마 검출법을 모두 사용하여 배제합니다.

박테리아, 곰팡이 또는 효모 오염이 없는지 확인하기 위해 세포 배양은 매일 육안 검사를 거칩니다.

배양액 동결
냉동 보존 배지로는 해동 후 충분한 생존력을 위해 완전 성장 배지(FBS 포함) + 10% DMSO를 사용하거나, 최적화된 삼투 보호제 및 대사 안정제가 포함된 CM-1(Cytion 카탈로그 번호 800100)을 사용하여 회복력을 높이고 냉동으로 인한 스트레스를 줄입니다.
보관 조건

장기 보존을 위해서는 바이알을 약 -150°C에서 -196°C의 증기상 액체 질소에 넣으세요. 80°C에서 보관하는 것은 액체 질소로 옮기기 전 짧은 중간 단계로만 허용됩니다.

배송 조건

냉동 보존 세포주는 운송 중 약 -78°C를 유지할 수 있는 충분한 냉매가 포함된 검증된 단열 포장에 드라이아이스를 넣어 배송됩니다. 수령 즉시 용기를 검사하고 바이알을 지체 없이 적절한 보관 장소로 옮깁니다.

08기부자

품종 / 아종
C3H/An
기증자 연령
100일