Перейти до вмісту
L-WRN
Тканина
Сполучна тканина

Документи

L-WRN

Cell line · Номер товару 300641

Клітинна лінія L-WRN — це лінія мишачих фібробластів, отримана з L-клітин, які є мишачими фібробластами, спочатку виділеними зі сполучної тканини. L-W...

€550.00без урахування податків та вартості доставки
Є в наявності
Лот
Рекомендовано (найсвіжіша партія)
  • CoA
1

01Загальна інформація

Опис

Клітинна лінія L-WRN - це клітинні лінії мишачих фібробластів, отримані з L-клітин, які є мишачими фібробластами, спочатку виділеними зі сполучної тканини. Клітини L-WRN були сконструйовані для стабільної експресії Wnt3a, R-спондину 3 та Noggin. Ці фактори є критично важливими для росту і підтримки кишкових органоїдів і культур стовбурових клітин. Надмірна експресія цих білків посилює проліферацію та диференціацію стовбурових клітин кишечника, що робить клітини L-WRN цінним інструментом для вивчення біології кишечника та моделювання захворювань.

Окрім застосування в культурі органоїдів, клітини L-WRN слугують надійною моделлю для дослідження сигнальних шляхів Wnt. Сигналізація Wnt відіграє ключову роль у регулюванні долі, проліферації та міграції клітин під час розвитку та в тканинах дорослої людини. Забезпечуючи постійне та контрольоване джерело Wnt3a, R-спондину 3 та Noggin, клітини L-WRN полегшують дослідження молекулярних механізмів, що лежать в основі цих процесів. Дослідники можуть використовувати ці клітини для вивчення ролі цих сигнальних молекул у різних біологічних контекстах, включаючи рак, регенерацію тканин та біологію розвитку.

Загалом, клітинні лінії L-WRN є потужним інструментом у біомедичних дослідженнях завдяки своїй здатності підтримувати ріст складних тривимірних культур та корисності у вивченні ключових сигнальних шляхів. Її роль у розвитку досліджень стовбурових клітин кишечника та внесок у наше розуміння сигналізації Wnt підкреслюють її важливість у галузі клітинної та молекулярної біології.

Тканина
Сполучна тканина
Застосування
3D-культура клітин

02Класифікація

Організм
Миша
Секс
Чоловік
Характеристики росту
Прихильник
Статус ГМО
GMO-S1
Детальна інформація щодо статусу ГМО
GMO-S1: This murine NIH-3T3-derived cell line (L-WRN) contains expression constructs for Wnt3a, R-spondin-3, and Noggin, including SV40 DNA sequences and dual antibiotic markers (hph and Tn5-neo), enabling secretion of these signaling molecules. The inserts are stably present in NIH-3T3-based cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Рівень біобезпеки
1

03Характеристики

Морфологія
Фібробласт

04Ідентифікатори

Посилання
L-WRN (номер за каталогом Cytion 300641)
Ідентифікаційний номер платника податків NCBI
10090
Целозавр
CVCL_DA06

05Експресія та сприйнятливість

Експресія білків
Wnt-3A, R-спондин, мозок

06Обробка та вирощування

Живильне середовище
ДМЕМ, w: 4,5 г/л Глюкоза, w: 4 мМ L-глутамін, w: 3,7 г/л NaHCO3, w: 1,0 мМ піруват натрію (цит. номер 820300a)
Атмосфера інкубації

37°C, 5% CO2, волога атмосфера.

Добавки
Додайте до середовища 10% FBS
Реагент для дисоціації
Аккутаза
Пересадка в нове середовище
Видаліть старе середовище з прилиплих клітин і промийте їх PBS, в якому бракує кальцію і магнію. Для колб T25 використовуйте 3-5 мл PBS, а для колб T75 - 5-10 мл. Потім повністю покрийте клітини аккутазою, використовуючи 1-2 мл для колб Т25 і 2,5 мл для колб Т75. Залиште клітини інкубуватися при кімнатній температурі протягом 8-10 хвилин, щоб відокремити їх. Після інкубації обережно змішайте клітини з 10 мл середовища, щоб ресуспендувати їх, а потім центрифугуйте при 300xg протягом 3 хвилин. Викиньте надосадову рідину, ресуспендуйте клітини у свіжому середовищі та перенесіть їх у нові колби, які вже містять свіже середовище.
Розморожування та культивування
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контроль якості та кріоконсервація

Стерильність

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Середовище для заморожування
Як середовище кріоконсервування ми використовуємо повне живильне середовище (включаючи FBS) + 10% ДМСО для адекватної життєздатності після відтавання або CM-1 (номер за каталогом Cytion 800100), до складу якого входять оптимізовані осмопротектори та метаболічні стабілізатори для прискорення відновлення та зменшення кріоіндукованого стресу.
Умови зберігання

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Умови доставки

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

08Донор

Порода / підвид
C3H/An
Вік донора
100 днів