Μετάβαση στο περιεχόμενο
L-WRN
Ιστός
Συνδετικός ιστός

Έγγραφα

L-WRN

Cell line · Αριθμός προϊόντος 300641

Η κυτταρική σειρά L-WRN είναι μια σειρά ινοβλαστών ποντικού που προέρχεται από τα κύτταρα L, τα οποία είναι ινοβλάστες ποντικού που απομονώθηκαν αρχικά από συνδετικό ιστό. L-W...

€550.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής
Σε απόθεμα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
  • CoA
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή

Η κυτταρική σειρά L-WRN είναι μια κυτταρική σειρά ινοβλαστών ποντικού που προέρχεται από τα κύτταρα L, τα οποία είναι ινοβλάστες ποντικού που απομονώθηκαν αρχικά από συνδετικό ιστό. Τα κύτταρα L-WRN έχουν τροποποιηθεί ώστε να εκφράζουν σταθερά τα Wnt3a, R-spondin 3 και Noggin. Αυτοί οι παράγοντες είναι κρίσιμοι για την ανάπτυξη και τη διατήρηση εντερικών οργανοειδών και καλλιεργειών βλαστικών κυττάρων. Η υπερέκφραση αυτών των πρωτεϊνών ενισχύει τον πολλαπλασιασμό και τη διαφοροποίηση των εντερικών βλαστικών κυττάρων, καθιστώντας τα κύτταρα L-WRN ένα πολύτιμο εργαλείο για τη μελέτη της εντερικής βιολογίας και τη μοντελοποίηση ασθενειών.

Εκτός από την εφαρμογή τους στην καλλιέργεια οργανοειδών, τα κύτταρα L-WRN χρησιμεύουν ως ισχυρό μοντέλο για τη διερεύνηση των σηματοδοτικών μονοπατιών Wnt. Η σηματοδότηση Wnt είναι καθοριστικής σημασίας για τη ρύθμιση της κυτταρικής μοίρας, του πολλαπλασιασμού και της μετανάστευσης κατά τη διάρκεια της ανάπτυξης και στους ενήλικους ιστούς. Παρέχοντας μια συνεπή και ελεγχόμενη πηγή Wnt3a, R-spondin 3 και Noggin, τα κύτταρα L-WRN διευκολύνουν την έρευνα των μοριακών μηχανισμών που διέπουν αυτές τις διαδικασίες. Οι ερευνητές μπορούν να χρησιμοποιήσουν αυτά τα κύτταρα για να αναλύσουν τους ρόλους αυτών των σηματοδοτικών μορίων σε διάφορα βιολογικά πλαίσια, συμπεριλαμβανομένου του καρκίνου, της αναγέννησης ιστών και της αναπτυξιακής βιολογίας.

Συνολικά, η κυτταρική σειρά L-WRN είναι ένα ισχυρό εργαλείο στη βιοϊατρική έρευνα λόγω της ικανότητάς της να υποστηρίζει την ανάπτυξη πολύπλοκων τρισδιάστατων καλλιεργειών και της χρησιμότητάς της στη μελέτη βασικών σηματοδοτικών μονοπατιών. Ο ρόλος της στην προώθηση της έρευνας των εντερικών βλαστικών κυττάρων και η συμβολή της στην κατανόηση της σηματοδότησης Wnt αναδεικνύουν τη σημασία της στον τομέα της κυτταρικής και μοριακής βιολογίας.

Ιστός
Συνδετικός ιστός
Εφαρμογές
3D καλλιέργεια κυττάρων

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Ποντίκι
Σεξ
Άνδρας
Ιδιότητες ανάπτυξης
Πιστός
Κατάσταση όσον αφορά τους ΓΤΟ
GMO-S1
Λεπτομέρειες σχετικά με την κατάσταση των ΓΤΟ
GMO-S1: This murine NIH-3T3-derived cell line (L-WRN) contains expression constructs for Wnt3a, R-spondin-3, and Noggin, including SV40 DNA sequences and dual antibiotic markers (hph and Tn5-neo), enabling secretion of these signaling molecules. The inserts are stably present in NIH-3T3-based cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Χαρακτηριστικά

Μορφολογία
Ινοβλάστες

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
L-WRN (αριθμός καταλόγου Cytion 300641)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
10090
Κελλοσαύρος
CVCL_DA06

05Έκφραση και ευαισθησία

Έκφραση πρωτεϊνών
Wnt-3A, R-spondin, noggin

06Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
DMEM, w: 4,5 g/L γλυκόζη, w: 4 mM L-γλουταμίνη, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM πυρουβικό νάτριο (αριθμός άρθρου Cytion 820300a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 10% FBS
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Accutase
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Αφαιρέστε το παλιό μέσο από τα προσκολλημένα κύτταρα και πλύντε τα με PBS που δεν περιέχει ασβέστιο και μαγνήσιο. Για φιάλες T25, χρησιμοποιήστε 3-5 ml PBS και για φιάλες T75, χρησιμοποιήστε 5-10 ml. Στη συνέχεια, καλύψτε πλήρως τα κύτταρα με Accutase, χρησιμοποιώντας 1-2 ml για φιάλες T25 και 2,5 ml για φιάλες T75. Αφήστε τα κύτταρα να επωαστούν σε θερμοκρασία δωματίου για 8-10 λεπτά για να αποκολληθούν. Μετά την επώαση, αναμείξτε απαλά τα κύτταρα με 10 ml μέσου για να ανασυσταθούν και, στη συνέχεια, φυγοκεντρίστε στα 300xg για 3 λεπτά. Απορρίψτε το υπερκείμενο υγρό, ανασυστάστε τα κύτταρα σε φρέσκο μέσο και μεταφέρετέ τα σε νέες φιάλες που περιέχουν ήδη φρέσκο μέσο.
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

08Δωρητής

Φυλή / υποείδος
C3H/An
Ηλικία δωρητή
100 ημέρες