Langsung ke isi
L-WRN
Tisu
Jaringan ikat

Dokumen

L-WRN

Cell line · Nomor produk 300641

Baris sel L-WRN adalah baris sel fibroblast tikus yang berasal dari sel-sel L, yaitu sel fibroblast tikus yang semula diisolasi dari jaringan ikat. L-W...

€550.00belum termasuk pajak dan ongkos kirim

Penyesuaian / Rekomendasi

Tersedia
Lot
Direkomendasikan (stok terbaru)
  • CoA
1

01Informasi umum

Deskripsi

Garis sel L-WRN adalah garis sel fibroblas murin yang berasal dari sel L, yang merupakan fibroblas tikus yang awalnya diisolasi dari jaringan ikat. Sel L-WRN telah direkayasa untuk mengekspresikan Wnt3a, R-spondin 3, dan Noggin secara stabil. Faktor-faktor ini sangat penting untuk pertumbuhan dan pemeliharaan organoid usus dan kultur sel punca. Ekspresi berlebih dari protein-protein ini meningkatkan proliferasi dan diferensiasi sel punca usus, menjadikan sel L-WRN sebagai alat yang berharga untuk mempelajari biologi usus dan pemodelan penyakit.

Selain aplikasinya dalam kultur organoid, sel L-WRN berfungsi sebagai model yang kuat untuk menyelidiki jalur pensinyalan Wnt. Pensinyalan Wnt sangat penting dalam mengatur nasib sel, proliferasi, dan migrasi selama perkembangan dan dalam jaringan dewasa. Dengan menyediakan sumber Wnt3a, R-spondin 3, dan Noggin yang konsisten dan terkontrol, sel L-WRN memfasilitasi penelitian tentang mekanisme molekuler yang mendasari proses-proses ini. Para peneliti dapat menggunakan sel-sel ini untuk membedah peran molekul-molekul pensinyalan ini dalam berbagai konteks biologis, termasuk kanker, regenerasi jaringan, dan biologi perkembangan.

Secara keseluruhan, garis sel L-WRN adalah alat yang ampuh dalam penelitian biomedis karena kemampuannya untuk mendukung pertumbuhan kultur tiga dimensi yang kompleks dan kegunaannya dalam mempelajari jalur pensinyalan utama. Perannya dalam kemajuan penelitian sel punca usus dan kontribusinya terhadap pemahaman kita tentang pensinyalan Wnt menyoroti pentingnya dalam bidang biologi seluler dan molekuler.

Tisu
Jaringan ikat
Aplikasi
kultur sel 3D

02Klasifikasi

Organisme
Tikus
Seks
Laki-laki
Sifat-sifat pertumbuhan
Pengikut
Status GMO
GMO-S1
Rincian status GMO
GMO-S1: This murine NIH-3T3-derived cell line (L-WRN) contains expression constructs for Wnt3a, R-spondin-3, and Noggin, including SV40 DNA sequences and dual antibiotic markers (hph and Tn5-neo), enabling secretion of these signaling molecules. The inserts are stably present in NIH-3T3-based cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Tingkat keamanan hayati
1

03Karakteristik

Morfologi
Fibroblast

04Pengidentifikasi

Referensi
L-WRN (nomor katalog Cytion 300641)
Nomor Identifikasi Pajak NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_DA06

05Ekspresi dan kerentanan

Ekspresi protein
Wnt-3A, R-spondin, noggin

06Penanganan dan budidaya

Media kultur
DMEM, w: 4,5 g/L Glukosa, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natrium piruvat (Nomor artikel Cytion 820300a)
Suasana inkubasi

37°C, 5%CO2, atmosfer yang dilembabkan.

Suplemen
Tambahkan media dengan 10% FBS
Reagen disosiasi
Accutase
Perbanyakan sel
Buang media lama dari sel yang melekat dan cuci dengan PBS yang tidak mengandung kalsium dan magnesium. Untuk labu T25, gunakan 3-5 ml PBS, dan untuk labu T75, gunakan 5-10 ml. Kemudian, tutupi sel sepenuhnya dengan Accutase, menggunakan 1-2 ml untuk labu T25 dan 2,5 ml untuk labu T75. Biarkan sel diinkubasi pada suhu kamar selama 8-10 menit untuk melepaskannya. Setelah inkubasi, campurkan sel secara perlahan dengan 10 ml medium untuk meresuspensi sel, kemudian sentrifugasi pada 300xg selama 3 menit. Buang supernatan, resuspensi sel dalam medium segar, dan pindahkan ke dalam labu baru yang sudah berisi medium segar.
Pencairan dan pembiakan

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Pengendalian mutu dan kriopreservasi

Kemandulan

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Media pembekuan
Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan media pertumbuhan lengkap (termasuk FBS) + 10% DMSO untuk viabilitas pasca-pencairan yang memadai, atau CM-1 (nomor katalog Cytion 800100), yang mencakup osmoprotektan yang dioptimalkan dan penstabil metabolisme untuk meningkatkan pemulihan dan mengurangi stres yang diinduksi kriopreservasi.
Kondisi penyimpanan

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Ketentuan pengiriman

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

08Donatur

Jenis / subspesies
C3H / An
Usia donor
100 hari