L-WRN

La linea cellulare L-WRN è una linea cellulare di fibroblasti murini derivata dalle cellule L, che sono fibroblasti di topo originariamente isolati dal tessuto connettivo. Le cellule L-WRN sono state ingegnerizzate per esprimere stabilmente Wnt3a, R-spondina 3 e Noggin. Questi fattori sono fondamentali per la crescita e il mantenimento degli organoidi intestinali e delle colture di cellule staminali. La sovraespressione di queste proteine aumenta la proliferazione e la differenziazione delle cellule staminali intestinali, rendendo le cellule L-WRN uno strumento prezioso per lo studio della biologia intestinale e la modellazione delle malattie.

Oltre alla loro applicazione nella coltura di organoidi, le cellule L-WRN sono un modello robusto per studiare le vie di segnalazione Wnt. La segnalazione Wnt è fondamentale per regolare il destino, la proliferazione e la migrazione delle cellule durante lo sviluppo e nei tessuti adulti. Fornendo una fonte costante e controllata di Wnt3a, R-spondina 3 e Noggin, le cellule L-WRN facilitano la ricerca sui meccanismi molecolari alla base di questi processi. I ricercatori possono utilizzare queste cellule per analizzare il ruolo di queste molecole di segnalazione in vari contesti biologici, tra cui il cancro, la rigenerazione dei tessuti e la biologia dello sviluppo.

Nel complesso, la linea cellulare L-WRN è uno strumento potente nella ricerca biomedica grazie alla sua capacità di supportare la crescita di colture tridimensionali complesse e alla sua utilità nello studio delle principali vie di segnalazione. Il suo ruolo nel progresso della ricerca sulle cellule staminali intestinali e i suoi contributi alla comprensione della segnalazione Wnt ne evidenziano l'importanza nel campo della biologia cellulare e molecolare.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia