L-WRN
Cell line · Číslo výrobku 300641
Buněčná linie L-WRN je myší fibroblastová buněčná linie odvozená z L-buněk, což jsou myší fibroblasty původně izolované z pojivové tkáně. L-W...
Přizpůsobení / Doporučení
- L-WRNCell line€550.00
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
01Obecné informace
- Popis
Buněčná linie L-WRN je myší fibroblastová buněčná linie odvozená z buněk L, což jsou myší fibroblasty původně izolované z pojivové tkáně. Buňky L-WRN byly upraveny tak, aby stabilně exprimovaly Wnt3a, R-spondin 3 a Noggin. Tyto faktory jsou rozhodující pro růst a udržování střevních organoidů a kultur kmenových buněk. Nadměrná exprese těchto proteinů zvyšuje proliferaci a diferenciaci střevních kmenových buněk, což z buněk L-WRN činí cenný nástroj pro studium střevní biologie a modelování nemocí.
Kromě použití v organoidních kulturách slouží buňky L-WRN jako robustní model pro zkoumání signálních drah Wnt. Signalizace Wnt je klíčová pro regulaci osudu, proliferace a migrace buněk během vývoje a v dospělých tkáních. Tím, že buňky L-WRN poskytují konzistentní a kontrolovaný zdroj Wnt3a, R-spondinu 3 a Nogginu, usnadňují výzkum molekulárních mechanismů, které jsou základem těchto procesů. Výzkumníci mohou tyto buňky využít k rozboru rolí těchto signálních molekul v různých biologických kontextech, včetně rakoviny, regenerace tkání a vývojové biologie.
Celkově je buněčná linie L-WRN mocným nástrojem v biomedicínském výzkumu díky své schopnosti podporovat růst komplexních trojrozměrných kultur a díky své užitečnosti při studiu klíčových signálních drah. Její úloha v rozvoji výzkumu střevních kmenových buněk a její přínos k pochopení signalizace Wnt podtrhují její význam v oblasti buněčné a molekulární biologie.
- Tkáň
- Pojivová tkáň
- Aplikace
- 3D buněčná kultura
02Klasifikace
- Organismus
- Myš
- Sex
- Muž
- Růstové vlastnosti
- Přívrženec
- Stav GMO
- GMO-S1
- Podrobnosti o statusu GMO
- GMO-S1: This murine NIH-3T3-derived cell line (L-WRN) contains expression constructs for Wnt3a, R-spondin-3, and Noggin, including SV40 DNA sequences and dual antibiotic markers (hph and Tn5-neo), enabling secretion of these signaling molecules. The inserts are stably present in NIH-3T3-based cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Úroveň biologické bezpečnosti
- 1
03Charakteristika
- Morfologie
- Fibroblasty
04Identifikátory
- Citace
- L-WRN (katalogové číslo Cytion 300641)
- Daňové identifikační číslo NCBI
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_DA06
05Exprese a náchylnost
- Exprese proteinů
- Wnt-3A, R-spondin, noggin
06Manipulace a chov
- Pěstovací médium
- DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutaminu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
- Inkubační atmosféra
37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.
- Doplňky stravy
- Doplňte médium o 10% FBS
- Disociační činidlo
- Accutase
- Subkultivace
- Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
- Rozmrazování a kultivace
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kontrola kvality a kryokonzervace
- Sterilita
Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.
Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.
- Mrazicí médium
- Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
- Podmínky skladování
Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.
- Dopravní podmínky
Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.
08Dárce
- Plemeno / poddruh
- C3H/An
- Věk dárce
- 100 dní
09Právní informace a bezpečnostní pokyny
- Bezpečnostní opatření
- Při plánování uložení kryovialu v kapalném dusíku pro budoucí rozmrazení je nutné dodržovat přísná bezpečnostní opatření. Nezbytné jsou vhodné ochranné rukavice a oděv a při přenášení zmrazených vzorků do nádrže s kapalným dusíkem nebo z ní je nutné používat obličejovou masku nebo ochranné brýle. To proto, aby se snížilo riziko zranění v důsledku možných výbuchů kryovialů při jejich vyjímání, které mohou mít za následek vystřelování ostrých úlomků.
- Záruka
Ve společnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopností našich produktů. Zaručujeme, že naše buňky budou životaschopné na začátku kultivace po dobu 60 dnů po odeslání z našich zařízení. Zaručujeme, že všechny materiály odpovídají specifikacím popsaným v certifikátu analýzy a/nebo v produktovém listu
Úplné informace naleznete v našem <a href=""/Kdo-jsme/Záruka/"" hreflang=""x-default"">Záručním prohlášení
- Je nutná smlouva o převodu materiálu
- Ano
