Preskoči na vsebino
L-WRN
Tkivo
Vezivno tkivo

Dokumenti

L-WRN

Cell line · Številka izdelka 300641

Celična linija L-WRN je mišja fibroblastna celična linija, pridobljena iz L-celic, ki so mišji fibroblasti, prvotno izolirani iz vezivnega tkiva. L-W...

€550.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celična linija L-WRN je mišja fibroblastna celična linija, pridobljena iz celic L, ki so mišji fibroblasti, prvotno izolirani iz vezivnega tkiva. Celice L-WRN so bile oblikovane tako, da stabilno izražajo Wnt3a, R-spondin 3 in Noggin. Ti dejavniki so ključni za rast in vzdrževanje črevesnih organoidov in kultur matičnih celic. Prekomerno izražanje teh beljakovin poveča proliferacijo in diferenciacijo črevesnih matičnih celic, zaradi česar so celice L-WRN dragoceno orodje za preučevanje črevesne biologije in modeliranje bolezni.

Poleg uporabe v organoidni kulturi so celice L-WRN zanesljiv model za raziskovanje signalnih poti Wnt. Signalizacija Wnt je ključna pri uravnavanju usode celic, proliferacije in migracije med razvojem in v odraslih tkivih. S tem, ko celice L-WRN zagotavljajo stalen in nadzorovan vir Wnt3a, R-spondina 3 in Noggina, omogočajo raziskave molekularnih mehanizmov, ki so osnova teh procesov. Raziskovalci lahko te celice uporabijo za raziskovanje vlog teh signalnih molekul v različnih bioloških kontekstih, vključno z rakom, regeneracijo tkiv in razvojno biologijo.

Na splošno je celična linija L-WRN močno orodje v biomedicinskih raziskavah, saj lahko podpira rast kompleksnih tridimenzionalnih kultur in je uporabna pri preučevanju ključnih signalnih poti. Njena vloga pri napredku raziskav črevesnih matičnih celic in njen prispevek k razumevanju signalizacije Wnt poudarjata njen pomen na področju celične in molekularne biologije.

Tkivo
Vezivno tkivo
Uporaba
3D gojenje celic

02Razvrstitev

Organizem
Miška
Seks
Moški
Lastnosti rasti
Pripadnik
Status GSO
GMO-S1
Podrobnosti o statusu GSO
GMO-S1: This murine NIH-3T3-derived cell line (L-WRN) contains expression constructs for Wnt3a, R-spondin-3, and Noggin, including SV40 DNA sequences and dual antibiotic markers (hph and Tn5-neo), enabling secretion of these signaling molecules. The inserts are stably present in NIH-3T3-based cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Fibroblast

04Identifikatorji

Navajanje vira
L-WRN (Cytionova kataloška številka 300641)
Davčna identifikacijska številka NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_DA06

05Izražanje in dovzetnost

Ekspresija beljakovin
Wnt-3A, R-spondin, noggin

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
DMEM, w: 4,5 g/L glukoze, w: 4 mM L-glutamina, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natrijevega piruvata (številka izdelka Cytion 820300a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Pasma / podvrsta
C3H/An
Starost darovalca
100 dni