L-WRN

A linha celular L-WRN é uma linha celular de fibroblastos murinos derivada das células L, que são fibroblastos de ratinho originalmente isolados do tecido conjuntivo. As células L-WRN foram concebidas para exprimir de forma estável Wnt3a, R-espondina 3 e Noggin. Estes factores são críticos para o crescimento e manutenção de organóides intestinais e culturas de células estaminais. A sobreexpressão destas proteínas aumenta a proliferação e a diferenciação das células estaminais intestinais, tornando as células L-WRN uma ferramenta valiosa para o estudo da biologia intestinal e da modelação de doenças.

Para além da sua aplicação na cultura de organóides, as células L-WRN constituem um modelo robusto para a investigação das vias de sinalização Wnt. A sinalização Wnt é fundamental na regulação do destino, proliferação e migração das células durante o desenvolvimento e nos tecidos adultos. Ao fornecer uma fonte consistente e controlada de Wnt3a, R-espondina 3 e Noggin, as células L-WRN facilitam a investigação dos mecanismos moleculares subjacentes a estes processos. Os investigadores podem utilizar estas células para dissecar os papéis destas moléculas de sinalização em vários contextos biológicos, incluindo o cancro, a regeneração de tecidos e a biologia do desenvolvimento.

De um modo geral, a linha celular L-WRN é uma ferramenta poderosa na investigação biomédica devido à sua capacidade de suportar o crescimento de culturas tridimensionais complexas e à sua utilidade no estudo das principais vias de sinalização. O seu papel no avanço da investigação sobre células estaminais intestinais e os seus contributos para a nossa compreensão da sinalização Wnt realçam a sua importância no domínio da biologia celular e molecular.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia