Gå direkt till innehållet
L-WRN
Vävnad
Bindväv

L-WRN

Cell line · Produktnummer 300641

Cellinjen L-WRN är en fibroblastcellinje från mus som härstammar från L-cellerna, vilka är musfibroblaster som ursprungligen isolerades från bindväv. L-W...

€550.00exkl. moms och frakt
Finns i lager
Lot
Rekommenderat (det färskaste partiet)
  • CoA
1

01Allmän information

Beskrivning

L-WRN-cellinjen är en murin fibroblastcellinje som härrör från L-cellerna, vilka är musfibroblaster som ursprungligen isolerades från bindväv. L-WRN-cellerna har konstruerats för att stabilt uttrycka Wnt3a, R-spondin 3 och Noggin. Dessa faktorer är avgörande för tillväxt och underhåll av organoider och stamcellskulturer i tarmen. Överuttrycket av dessa proteiner ökar proliferationen och differentieringen av tarmens stamceller, vilket gör L-WRN-cellerna till ett värdefullt verktyg för studier av tarmens biologi och sjukdomsmodellering.

Förutom att L-WRN-celler kan användas i organoidkulturer är de en robust modell för att undersöka Wnt-signalvägar. Wnt-signalering är avgörande för att reglera cellöde, proliferation och migration under utveckling och i vuxna vävnader. Genom att tillhandahålla en konsekvent och kontrollerad källa till Wnt3a, R-spondin 3 och Noggin underlättar L-WRN-celler forskning om de molekylära mekanismer som ligger bakom dessa processer. Forskare kan använda dessa celler för att dissekera dessa signalmolekylers roller i olika biologiska sammanhang, inklusive cancer, vävnadsregenerering och utvecklingsbiologi.

Sammantaget är cellinjen L-WRN ett kraftfullt verktyg inom biomedicinsk forskning tack vare dess förmåga att stödja tillväxten av komplexa tredimensionella kulturer och dess användbarhet för att studera viktiga signalvägar. Dess roll i främjandet av tarmstamcellsforskningen och dess bidrag till vår förståelse av Wnt-signalering belyser dess betydelse inom cell- och molekylärbiologi.

Vävnad
Bindväv
Ansökningar
3D-cellkultur

02Klassificering

Organism
Mus
Kön
Man
Tillväxtegenskaper
Följsam
GMO-status
GMO-S1
Detaljer om GMO-status
GMO-S1: This murine NIH-3T3-derived cell line (L-WRN) contains expression constructs for Wnt3a, R-spondin-3, and Noggin, including SV40 DNA sequences and dual antibiotic markers (hph and Tn5-neo), enabling secretion of these signaling molecules. The inserts are stably present in NIH-3T3-based cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosäkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Fibroblast

04Identifierare

Källa
L-WRN (Cytion katalognummer 300641)
NCBI-skattenummer
10090
Cellosaurus
CVCL_DA06

05Uttryck och mottaglighet

Proteinexpression
Wnt-3A, R-spondin, noggin

06Hantering och odling

Odlingsmedium
DMEM, w: 4,5 g/L glukos, w: 4 mM L-glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Komplettera mediet med 10% FBS
Dissociationsmedel
Accutase
Vidareodling
Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med Accutase, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

08Donator

Ras / underart
C3H/An
Donatorns ålder
100 dagar