L-WRN
Cell line · Номер на продукта 300641
Клетъчната линия L-WRN е миши фибробластна клетъчна линия, получена от L-клетките – миши фибробласти, първоначално изолирани от съединителната тъкан. L-W...
Персонализиране / Препоръки
- L-WRNCell line€550.00
Препоръчани (най-новата партида)
01Обща информация
- Описание
Клетъчната линия L-WRN е миша фибробластна клетъчна линия, получена от клетките L, които са миши фибробласти, първоначално изолирани от съединителна тъкан. Клетките L-WRN са разработени така, че да експресират стабилно Wnt3a, R-spondin 3 и Noggin. Тези фактори са от решаващо значение за растежа и поддържането на чревни органоиди и култури от стволови клетки. Свръхекспресията на тези протеини засилва пролиферацията и диференциацията на чревните стволови клетки, което превръща L-WRN клетките в ценен инструмент за изучаване на чревната биология и моделиране на заболявания.
В допълнение към приложението им в органоидната култура, L-WRN клетките служат като надежден модел за изследване на сигналните пътища на Wnt. Wnt сигнализацията е от ключово значение за регулирането на съдбата на клетките, пролиферацията и миграцията по време на развитието и в тъканите на възрастните. Като осигуряват постоянен и контролиран източник на Wnt3a, R-spondin 3 и Noggin, L-WRN клетките улесняват изследванията на молекулярните механизми, лежащи в основата на тези процеси. Изследователите могат да използват тези клетки, за да изследват ролята на тези сигнални молекули в различни биологични контексти, включително рак, регенерация на тъканите и биология на развитието.
Като цяло клетъчната линия L-WRN е мощен инструмент в биомедицинските изследвания поради способността ѝ да поддържа растежа на сложни триизмерни култури и полезността ѝ за изучаване на ключови сигнални пътища. Ролята ѝ в напредъка на изследванията на чревните стволови клетки и приносът ѝ към разбирането ни за Wnt сигнализацията подчертават значението ѝ в областта на клетъчната и молекулярната биология.
- Тъкан
- Съединителна тъкан
- Приложения
- 3D клетъчна култура
02Класификация
- Организъм
- Мишка
- Секс
- Мъж
- Свойства, свързани с растежа
- Привърженик
- Статус на ГМО
- GMO-S1
- Подробности относно статуса на ГМО
- GMO-S1: This murine NIH-3T3-derived cell line (L-WRN) contains expression constructs for Wnt3a, R-spondin-3, and Noggin, including SV40 DNA sequences and dual antibiotic markers (hph and Tn5-neo), enabling secretion of these signaling molecules. The inserts are stably present in NIH-3T3-based cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Ниво на биологична безопасност
- 1
03Характеристики
- Морфология
- Фибробласти
04Идентификатори
- Източник
- L-WRN (каталожен номер 300641 на Cytion)
- Данъчен идентификационен номер в NCBI
- 10090
- Целозавър
- CVCL_DA06
05Проява и предразположеност
- Експресия на протеини
- Wnt-3A, R-спондин, noggin
06Обработка и отглеждане
- Хранителна среда
- DMEM, w: 4,5 g/L глюкоза, w: 4 mM L-глутамин, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM натриев пируват (номер на изделието на Cytion 820300a)
- Атмосфера за инкубация
37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.
- Добавки
- Допълнете средата с 10% FBS
- Реагент за дисоциация
- Accutase
- Пресаждане
- Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
- Размразяване и култивиране
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Контрол на качеството и криоконсервация
- Стерилност
Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.
За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.
- Среда за замразяване
- Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
- Условия за съхранение
За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.
- Условия за доставка
Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.
08Дарител
- Порода / подвид
- C3H/An
- Възраст на донора
- 100 дни
09Правни въпроси и безопасност
- Мерки за безопасност
- Когато планирате да съхранявате криопрепарат в течен азот за бъдещо размразяване, е задължително да спазвате строги мерки за безопасност. Подходящите защитни ръкавици и облекло са от съществено значение, а по време на прехвърлянето на замразени проби към или от резервоара с течен азот е необходимо да се използва маска за лице или предпазни очила. Това се прави, за да се намали рискът от нараняване от потенциални експлозии на криовиолите при изваждането им, които могат да доведат до изхвърляне на остри фрагменти.
- Гаранция
Ние в Cytion заставаме зад качеството и жизнеспособността на нашите продукти. Гарантираме, че нашите клетки ще бъдат жизнеспособни в началото на култивирането в продължение на 60 дни след изпращането им от нашите съоръжения. Гарантираме, че всички материали отговарят на спецификациите, описани в сертификата за анализ и/или продуктовата листа
За пълни подробности, моля, направете справка с нашата <a href=""/Кои сме ние/Гаранция/"" hreflang=""x-default"">Гаранционна декларация
- Необходимо е споразумение за прехвърляне на материали
- Да
