Gå direkte til indholdet
L-WRN
Væv
Bindevæv

Dokumenter

L-WRN

Cell line · Varenummer 300641

L-WRN-cellelinjen er en fibroblastcellelinje fra mus, der stammer fra L-cellerne, som er fibroblaster fra mus, der oprindeligt blev isoleret fra bindevæv. L-W...

€550.00ekskl. moms og fragt
På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

L-WRN-cellelinjen er en murin fibroblastcellelinje, der stammer fra L-cellerne, som er musefibroblaster, der oprindeligt blev isoleret fra bindevæv. L-WRN-celler er blevet konstrueret til stabilt at udtrykke Wnt3a, R-spondin 3 og Noggin. Disse faktorer er afgørende for vækst og vedligeholdelse af tarmorganoider og stamcellekulturer. Overekspressionen af disse proteiner øger spredningen og differentieringen af tarmstamceller, hvilket gør L-WRN-celler til et værdifuldt værktøj til at studere tarmbiologi og sygdomsmodellering.

Ud over deres anvendelse i organoidkulturer fungerer L-WRN-celler som en robust model til undersøgelse af Wnt-signalveje. Wnt-signalering er afgørende for regulering af celleskæbne, spredning og migration under udvikling og i voksent væv. Ved at tilvejebringe en konsekvent og kontrolleret kilde til Wnt3a, R-spondin 3 og Noggin letter L-WRN-celler forskningen i de molekylære mekanismer, der ligger til grund for disse processer. Forskere kan bruge disse celler til at dissekere disse signalmolekylers roller i forskellige biologiske sammenhænge, herunder kræft, vævsregenerering og udviklingsbiologi.

Samlet set er L-WRN-cellelinjen et stærkt værktøj i biomedicinsk forskning på grund af dens evne til at understøtte væksten af komplekse tredimensionelle kulturer og dens anvendelighed til at studere vigtige signalveje. Dens rolle i udviklingen af tarmstamcelleforskningen og dens bidrag til vores forståelse af Wnt-signalering fremhæver dens betydning inden for celle- og molekylærbiologi.

Væv
Bindevæv
Anvendelser
3D-cellekultur

02Klassificering

Organisme
Mus
Køn
Mand
Vækstegenskaber
Tilhænger
GMO-status
GMO-S1
Oplysninger om GMO-status
GMO-S1: This murine NIH-3T3-derived cell line (L-WRN) contains expression constructs for Wnt3a, R-spondin-3, and Noggin, including SV40 DNA sequences and dual antibiotic markers (hph and Tn5-neo), enabling secretion of these signaling molecules. The inserts are stably present in NIH-3T3-based cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Fibroblast

04Identifikatorer

Kildehenvisning
L-WRN (Cytion katalognummer 300641)
NCBI-skattenummer
10090
Cellosaurus
CVCL_DA06

05Udtryk og modtagelighed

Proteinekspression
Wnt-3A, R-spondin, noggin

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
DMEM, w: 4,5 g/L glukose, w: 4 mM L-glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Race / underart
C3H/An
Donorens alder
100 dage