Pereiti prie turinio
MH7A
Audinys
Sinovija
Liga
Sinovialinis fibroblastas (SV40-imortalizuotas; atkuria reumatoidinio artrito sinoviocitą)
Metastazių vieta
Netaikoma (netumorogeninis sinovialinių fibroblastų modelis)

Dokumentai

MH7A

Cell line · Prekės numeris 305036

MH7A is a human synovial fibroblast cell line immortalized by stable SV40 large T antigen expression, established from synovial tissue of a female Japanes...

€800.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Pritaikymas / Rekomendacijos

Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

MH7A – tai žmogaus sinovialinių fibroblastų ląstelių linija, imortalizuota stabiliai ekspresuojant SV40 didįjį T antigeną, išskirta iš moters iš Japonijos sinovialinio audinio. MH7A auga kaip adhezyvinė kultūra, pasižyminti fibroblastams būdinga morfologija, ir išlaiko pagrindines reumatoidinio artrito sinovinių fibroblastų (RASF) funkcines savybes, įskaitant jautrumą proinflamatoriniams citokinams (IL-1β, TNF-α), matricos metaloproteinazių (MMP) ekspresiją ir gebėjimą įsiskverbti į kremzlės matricą. Tai vienas iš plačiausiai naudojamų in vitro modelių sinoviocitų biologijai ir RA patogenezei tirti.

MH7A tinka reumatoidinio artrito tyrimams, sinoviocitų aktyvacijai, MMP ir TIMP reguliacijai, citokinų signalizavimui (NF-κB, JAK-STAT, MAPK), antireumatinių vaistų vertinimui (DMARD, biologiniai preparatai, JAK inhibitoriai) bei sąnarių destrukcijos bendros kultūros modeliams. Ši linija suteikia nuoseklų, atkartojamą RA sinoviocitų modelį, leidžiantį išvengti pirminių iš pacientų gautų RASF kintamumo ir riboto prieinamumo.

Audinys
Sinovija
Liga
Sinovialinis fibroblastas (SV40-imortalizuotas; atkuria reumatoidinio artrito sinoviocitą)
Metastazių vieta
Netaikoma (netumorogeninis sinovialinių fibroblastų modelis)
Paraiškos
Reumatoidinio artrito tyrimai; sinoviocitų aktyvacija; MMP/TIMP reguliavimas; NF-κB/JAK-STAT/MAPK signalizacija; antireumatinių vaistų vertinimas; sąnarių destrukcijos bendros kultūros modeliai; citokinų signalizacija

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Moteris
Augimo savybės
Prisijungęs
GMO statusas
GMO-S1
Išsami informacija apie GMO statusą
GMO-S1: MH7A was immortalized by stable integration of SV40 large T antigen. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
fibroblastų tipo
Ląstelių tipas
Fibroblastams panašus sinoviocitas
Laikas, per kurį skaičius padvigubėja
maždaug nuo 24 iki 36 valandų

04Identifikatoriai

Nuoroda
MH7A (Cytion katalogo numeris 305036)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_0427

05Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
RPMI 1640, š: 2,0 mM stabilus glutaminas, š: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion gaminio numeris 820700a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS
Disociacijos reagentas
„Accutase“, 5 min., 37 °C
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite terpę, nuplaukite PBS tirpalu be kalcio ir magnio, užpilkite 0,25 % tripsino tirpalu, inkubuokite 37 °C temperatūroje 3–5 minutes, vėl suspenduokite terpėje, centrifuguokite 300×g 3 minutes, išpilkite supernatantą, vėl pasėkite.
Skaidymo santykis
1 : 8 santykis
Sėjos tankis
nuo 1 iki 3 × 10⁴ ląstelių/cm²
Skysčių atnaujinimas
2-3 kartus per savaitę
Atkūrimas po atšilimo
Atšildžius, išdėliokite ląsteles 2–5 x 104 ląstelių/cm2 tankiu ir leiskite ląstelėms atsigauti po užšaldymo proceso ir prisitvirtinti bent 24 valandas.
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

07Donoras

Donoro amžius
Amžius nenurodytas
Etninė priklausomybė
Japonų