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MH7A
Gewebe
Gelenkinnenhaut
Krankheit
Synovialfibroblast (SV40-immortalisiert; Modell für Synoviozyten bei rheumatoider Arthritis)
Metastasenherd
Nicht zutreffend (nicht-tumorogenes Synovialfibroblastenmodell)

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MH7A

Cell line · Artikelnummer 305036

MH7A is a human synovial fibroblast cell line immortalized by stable SV40 large T antigen expression, established from synovial tissue of a female Japanes...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

MH7A ist eine menschliche Synovialfibroblasten-Zelllinie, die durch stabile Expression des großen SV40-T-Antigens immortalisiert wurde und aus dem Synovialgewebe einer japanischen Patientin gewonnen wurde. MH7A wächst als adhärente Kultur mit fibroblastenähnlicher Morphologie und behält wichtige funktionelle Eigenschaften von Synovialfibroblasten bei rheumatoider Arthritis (RASFs) bei, darunter die Reaktionsfähigkeit auf proinflammatorische Zytokine (IL-1β, TNF-α), die Expression von Matrix-Metalloproteinasen (MMPs) sowie die Fähigkeit, in die Knorpelmatrix einzudringen. Sie ist eines der am häufigsten verwendeten In-vitro-Modelle zur Untersuchung der Synoviozytenbiologie und der RA-Pathogenese.

MH7A eignet sich für die Forschung zur rheumatoiden Arthritis, zur Aktivierung von Synoviozyten, zur Regulation von MMPs und TIMPs, zur Zytokin-Signalübertragung (NF-κB, JAK-STAT, MAPK), zur Bewertung von Antirheumatika (DMARDs, Biologika, JAK-Inhibitoren) sowie für Kokulturmodelle der Gelenkzerstörung. Die Zelllinie bietet ein konsistentes, reproduzierbares RA-Synoviozytenmodell, das die Variabilität und die begrenzte Verfügbarkeit von primären, aus Patienten gewonnenen RASFs umgeht.

Gewebe
Gelenkinnenhaut
Krankheit
Synovialfibroblast (SV40-immortalisiert; Modell für Synoviozyten bei rheumatoider Arthritis)
Metastasenherd
Nicht zutreffend (nicht-tumorogenes Synovialfibroblastenmodell)
Anwendungen
Forschung zur rheumatoiden Arthritis; Aktivierung von Synoviozyten; MMP/TIMP-Regulierung; NF-κB/JAK-STAT/MAPK-Signalweg; Bewertung von Antirheumatika; Kokulturmodelle zur Gelenkzerstörung; Zytokin-Signalweg

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Weiblich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
GVO-Status
GMO-S1
Angaben zum GVO-Status
GMO-S1: MH7A was immortalized by stable integration of SV40 large T antigen. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
fibroblastenähnlich
Zelltyp
Fibroblast-ähnliche Synoviozyten
Verdopplungszeit
ca. 24 bis 36 Stunden

04Bezeichner

Quellenangabe
MH7A (Cytion-Katalognummer 305036)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_0427

05Handhabung und Kultur

Nährmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiles Glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase, 5 Min., 37 °C
Subkultivierung
Medium entfernen, mit PBS ohne Kalzium und Magnesium waschen, mit 0,25 % Trypsin bedecken, 3–5 Minuten bei 37 °C inkubieren, in Medium resuspendieren, 300 × g für 3 Minuten zentrifugieren, Überstand verwerfen, erneut aussäen.
Split-Verhältnis
1 : 8-Aufteilung
Aussaatdichte
1 bis 3 × 10⁴ Zellen/cm²
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Erholung nach dem Auftauen
Nach dem Auftauen die Zellen mit einer Dichte von 2 bis 5 x 104 Zellen/cm² ausplattieren und die Zellen mindestens 24 Stunden lang vom Gefrierprozess erholen lassen und anhaften lassen.
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

07Spender

Alter des Spenders
Alter nicht spezifiziert
Ethnische Zugehörigkeit
Japanisch