Przejdź do treści
MH7A
Chusteczka
Błona maziowa
Choroba
Fibroblast maziowy (unieśmierteliony wirusem SV40; model synoviocytów w reumatoidalnym zapaleniu stawów)
Miejsce przerzutów
Nie dotyczy (model fibroblastów błony maziowej o właściwościach nie nowotworowych)

Dokumenty

MH7A

Cell line · Numer produktu 305036

MH7A is a human synovial fibroblast cell line immortalized by stable SV40 large T antigen expression, established from synovial tissue of a female Japanes...

€800.00bez podatku i kosztów wysyłki

Dostosowanie / Zalecenia

W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

MH7A to ludzka linia komórkowa fibroblastów błony maziowej, uwieczniona poprzez stabilną ekspresję dużego antygenu T wirusa SV40, wyhodowana z tkanki błony maziowej pacjentki pochodzenia japońskiego. MH7A rośnie w postaci hodowli adhezyjnej o morfologii przypominającej fibroblasty i zachowuje kluczowe cechy funkcjonalne fibroblastów błony maziowej w reumatoidalnym zapaleniu stawów (RASF), w tym reaktywność na cytokiny prozapalne (IL-1β, TNF-α), ekspresję metaloproteinaz macierzy (MMP) oraz zdolność do inwazji macierzy chrzęstnej. Jest to jeden z najczęściej stosowanych modeli in vitro do badania biologii komórek błony maziowej oraz patogenezy RZS.

Linia MH7A ma zastosowanie w badaniach nad reumatoidalnym zapaleniem stawów, aktywacją synoviocytów, regulacją MMP i TIMP, sygnalizacją cytokinową (NF-κB, JAK-STAT, MAPK), oceną leków przeciwreumatycznych (DMARD, leki biologiczne, inhibitory JAK) oraz w modelach współhodowli dotyczących destrukcji stawów. Linia ta zapewnia spójny, powtarzalny model synoviocytów RZS, który pozwala uniknąć zmienności i ograniczonej dostępności pierwotnych komórek RASF pochodzących od pacjentów.

Chusteczka
Błona maziowa
Choroba
Fibroblast maziowy (unieśmierteliony wirusem SV40; model synoviocytów w reumatoidalnym zapaleniu stawów)
Miejsce przerzutów
Nie dotyczy (model fibroblastów błony maziowej o właściwościach nie nowotworowych)
Zastosowania
Badania nad reumatoidalnym zapaleniem stawów; aktywacja komórek błony maziowej; regulacja MMP/TIMP; szlaki sygnałowe NF-κB/JAK-STAT/MAPK; ocena leków przeciwreumatycznych; modele współhodowli z niszczeniem stawów; sygnalizacja cytokinowa

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Kobieta
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Status GMO
GMO-S1
Szczegółowe informacje dotyczące statusu GMO
GMO-S1: MH7A was immortalized by stable integration of SV40 large T antigen. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
podobny do fibroblastów
Typ komórki
Komórka błony maziowej o charakterze podobnym do fibroblastów
Czas podwojenia
ok. 24–36 godzin

04Identyfikatory

Źródło
MH7A (numer katalogowy Cytion 305036)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0427

05Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnej glutaminy, w: 2,0 g/L NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820700a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase, 5 min., 37°C
Hodowla komórek w subkulturze
Usunąć pożywkę, przemyć roztworem PBS bez wapnia i magnezu, zalać 0,25% roztworem trypsyny, inkubować w temperaturze 37°C przez 3–5 minut, ponownie zawiesić w pożywce, odwirować przy 300×g przez 3 minuty, odrzucić supernatant, ponownie wysiać komórki.
Współczynnik podziału
podział 1:8
Gęstość wysiewu
od 1 do 3 × 10⁴ komórek/cm²
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Powrót do stanu sprzed rozmrożenia
Po rozmrożeniu należy umieścić komórki w płytkach w ilości od 2 do 5 x 104 komórek/cm2 i pozostawić je na co najmniej 24 godziny, aby mogły się zregenerować po procesie zamrażania i przylgnąć do podłoża.
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola jakości i kriokonserwacja

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

07Darczyńca

Wiek dawcy
Wiek nieokreślony
Pochodzenie etniczne
Japoński