
- Tissue
- Sinóvia
- Disease
- Fibroblasto sinovial (imortalizado pelo SV40; modelo de sinoviócito da artrite reumatoide)
- Metastatic site
- Não aplicável (modelo de fibroblastos sinoviais não tumorigênicos)
Documents
MH7A
Cell line · Product number 305036
MH7A is a human synovial fibroblast cell line immortalized by stable SV40 large T antigen expression, established from synovial tissue of a female Japanes...
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01General information
- Description
A MH7A é uma linhagem celular de fibroblastos sinoviais humanos imortalizada por meio da expressão estável do antígeno T grande do SV40, estabelecida a partir do tecido sinovial de uma paciente japonesa. A MH7A cresce como uma cultura aderente com morfologia semelhante à dos fibroblastos e mantém características funcionais essenciais dos fibroblastos sinoviais da artrite reumatoide (RASFs), incluindo a capacidade de resposta a citocinas pró-inflamatórias (IL-1β, TNF-α), a expressão de metaloproteinases da matriz (MMPs) e a capacidade de invadir a matriz cartilaginosa. É um dos modelos in vitro mais amplamente utilizados para o estudo da biologia dos sinoviócitos e da patogênese da AR.
A MH7A é aplicável na pesquisa da artrite reumatoide, ativação de sinoviócitos, regulação de MMPs e TIMPs, sinalização de citocinas (NF-κB, JAK-STAT, MAPK), avaliação de medicamentos antirreumáticos (DMARDs, biológicos, inibidores de JAK) e modelos de cocultura de destruição articular. A linhagem oferece um modelo consistente e reproduzível de sinoviócitos da AR que contorna a variabilidade e a disponibilidade limitada de RASFs primários derivados de pacientes.
- Tissue
- Sinóvia
- Disease
- Fibroblasto sinovial (imortalizado pelo SV40; modelo de sinoviócito da artrite reumatoide)
- Metastatic site
- Não aplicável (modelo de fibroblastos sinoviais não tumorigênicos)
- Applications
- Pesquisa sobre artrite reumatoide; ativação de sinoviócitos; regulação de MMP/TIMP; sinalização NF-κB/JAK-STAT/MAPK; avaliação de medicamentos antirreumáticos; modelos de cocultura de destruição articular; sinalização de citocinas
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- GMO status
- GMO-S1
- GMO status details
- GMO-S1: MH7A was immortalized by stable integration of SV40 large T antigen. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- semelhante a um fibroblasto
- Cell type
- Sinoviócito semelhante a um fibroblasto
- Doubling time
- aproximadamente 24 a 36 horas
04Identifiers
- Citation
- MH7A (número de catálogo da Cytion 305036)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0427
05Handling and culture
- Culture medium
- RPMI 1640, com 2,0 mM de glutamina estável e 2,0 g/L de NaHCO₃ (número de artigo da Cytion: 820700a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.
- Supplements
- Adicione 10% de FBS ao meio
- Dissociation reagent
- Accutase, 5 min., 37 °C
- Subculturing
- Remova o meio, lave com PBS sem cálcio e magnésio, cubra com tripsina a 0,25%, incube a 37 °C por 3 a 5 minutos, ressuspenda no meio, centrifugue a 300×g por 3 minutos, descarte o sobrenadante e replante.
- Split ratio
- Divisão de 1 para 8
- Seeding density
- 1 a 3 × 10⁴ células/cm²
- Fluid renewal
- 2 a 3 vezes por semana
- Post-thaw recovery
- Após o descongelamento, semeie as células a uma densidade de 2 a 5 x 10⁴ células/cm² e deixe que elas se recuperem do processo de congelamento e se adiram por pelo menos 24 horas.
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Quality control and cryopreservation
- Freeze medium
- Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% de DMSO para garantir viabilidade adequada após o descongelamento, ou CM-1 (número de catálogo da Cytion 800100), que inclui osmoprotetores e estabilizadores metabólicos otimizados para melhorar a recuperação e reduzir o estresse induzido pela criopreservação.
- Storage conditions
Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.
- Shipping conditions
As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.
07Donor
- Donor age
- Idade não especificada
- Ethnicity
- Japonês
08Legal and safety
- Safety precautions
- Ao planejar o armazenamento de um criotubo em nitrogênio líquido para descongelamento futuro, é obrigatório seguir medidas de segurança rigorosas. É essencial o uso de luvas e roupas de proteção adequadas, além do uso obrigatório de máscara facial ou óculos de proteção durante a transferência de amostras congeladas para dentro ou para fora do tanque de nitrogênio líquido. Isso visa mitigar o risco de ferimentos decorrentes de possíveis explosões dos criotubos durante a remoção, o que pode resultar na projeção de fragmentos pontiagudos.
- Warranty
Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.
Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.
- Material Transfer Agreement required
- Yes