İçeriğe atla
MH7A
Doku
Sinoviyum
Hastalık
Sinoviyal fibroblast (SV40 ile ölümsüzleştirilmiş; romatoid artrit sinoviyositini temsil eder)
Metastaz yeri
Uygulanamaz (tümör oluşturmayan sinovyal fibroblast modeli)

MH7A

Cell line · Ürün numarası 305036

MH7A is a human synovial fibroblast cell line immortalized by stable SV40 large T antigen expression, established from synovial tissue of a female Japanes...

€800.00vergi ve kargo hariç

Kişiselleştirme / Öneriler

Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

MH7A, Japon bir kadın hastanın sinovyal dokusundan elde edilen ve kararlı SV40 büyük T antijeni ekspresyonu yoluyla ölümsüzleştirilmiş bir insan sinovyal fibroblast hücre hattıdır. MH7A, fibroblast benzeri morfolojiye sahip yapışkan bir kültür olarak büyür ve proinflamatuar sitokinlere (IL-1β, TNF-α) yanıt verme, matriks metaloproteinazlarının (MMP'ler) ekspresyonu ve kıkırdak matriksine istila etme yeteneği gibi romatoid artrit sinovyal fibroblastlarının (RASF'ler) temel fonksiyonel özelliklerini korur. Bu hücre hattı, sinoviyosit biyolojisi ve RA patogenezini incelemek için en yaygın olarak kullanılan in vitro modellerden biridir.

MH7A, romatoid artrit araştırmaları, sinoviyosit aktivasyonu, MMP ve TIMP regülasyonu, sitokin sinyalleşmesi (NF-κB, JAK-STAT, MAPK), antiromatizmal ilaç değerlendirmesi (DMARD’lar, biyolojik ajanlar, JAK inhibitörleri) ve eklem tahribatına ilişkin ko-kültür modellerinde kullanılabilir. Bu hücre hattı, birincil hasta kaynaklı RASF’lerin değişkenliğini ve sınırlı bulunabilirliğini ortadan kaldıran, tutarlı ve tekrarlanabilir bir RA sinoviyosit modeli sunar.

Doku
Sinoviyum
Hastalık
Sinoviyal fibroblast (SV40 ile ölümsüzleştirilmiş; romatoid artrit sinoviyositini temsil eder)
Metastaz yeri
Uygulanamaz (tümör oluşturmayan sinovyal fibroblast modeli)
Uygulamalar
Romatoid artrit araştırması; sinoviyosit aktivasyonu; MMP/TIMP düzenlemesi; NF-κB/JAK-STAT/MAPK sinyal iletimi; antiromatizmal ilaç değerlendirmesi; eklem tahribatı ko-kültür modelleri; sitokin sinyal iletimi

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Kadın
Büyüme özellikleri
Bağlı
GDO durumu
GMO-S1
GDO durumuna ilişkin ayrıntılar
GMO-S1: MH7A was immortalized by stable integration of SV40 large T antigen. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
fibroblast benzeri
Hücre türü
Fibroblast benzeri sinoviyosit
İki katına çıkma süresi
yaklaşık 24 ila 36 saat

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
MH7A (Cytion katalog numarası 305036)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_0427

05İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
RPMI 1640, w: 2.0 mM stabil Glutamin, w: 2.0 g/L NaHCO3 (Cytion makale numarası 820700a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase, 5 dakika, 37°C
Alt kültür oluşturma
Besiyerini boşaltın, kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın, %0,25 tripsin ile kaplayın, 37 °C’de 3–5 dakika inkübe edin, besiyerinde yeniden süspansiyon haline getirin, 300×g’de 3 dakika santrifüjleyin, süpernatantı atın, yeniden ekleyin.
Bölünme oranı
1:8 oranında bölünme
Ekim yoğunluğu
1 ila 3 × 10⁴ hücre/cm²
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözülme sonrası toparlanma
Çözüldükten sonra, hücreleri 2 ila 5 x 104 hücre/cm2 yoğunluğunda plakaya yerleştirin ve hücrelerin dondurma işleminden kurtulmasını ve en az 24 saat boyunca yapışmasını bekleyin.
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

07Bağışçı

Bağışçının yaşı
Yaş belirtilmemiş
Etnik köken
Japonca