Tartalomra ugrás
MH7A
Szövet
Ízületi nyálkahártya
Betegség
Színoviális fibroblaszt (SV40-vel halhatatlanná tett; a reumás ízületi gyulladás színoviocitáit modellezi)
Áttétes hely
Nem alkalmazható (nem tumorigenikus szinoviális fibroblaszt-modell)

Dokumentumok

MH7A

Cell line · Termékszám 305036

MH7A is a human synovial fibroblast cell line immortalized by stable SV40 large T antigen expression, established from synovial tissue of a female Japanes...

€800.00adó és szállítási költség nélkül

Személyre szabás / Ajánlások

Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

Az MH7A egy olyan humán szinoviális fibroblaszt sejtvonal, amelyet a stabil SV40 nagy T-antigén expresszióval tették halhatatlanná, és amelyet egy japán női beteg szinoviális szövetéből állítottak elő. Az MH7A adhezív tenyészetként növekszik, fibroblaszt-szerű morfológiával rendelkezik, és megőrzi a reumás ízületi gyulladás szinoviális fibroblasztjainak (RASF-ek) legfontosabb funkcionális jellemzőit, beleértve a proinflammatorikus citokinek (IL-1β, TNF-α), a mátrix-metalloproteinázok (MMP-k) expresszióját, valamint a porc mátrixába való behatolási képességet. Ez az egyik legszélesebb körben használt in vitro modell a szinoviociták biológiájának és a reumás ízületi gyulladás patogenezisének tanulmányozására.

Az MH7A alkalmazható a reumás ízületi gyulladás kutatásában, a szinoviócita-aktiváció, az MMP-k és a TIMP-ek szabályozásának, a citokin-jelátvitel (NF-κB, JAK-STAT, MAPK) vizsgálatában, a reumás gyógyszerek (DMARD-ok, biológiai szerek, JAK-gátlók) értékelésében, valamint az ízületi pusztulás ko-kultúra modelljeiben. A sejtvonal konzisztens, reprodukálható RA-szinoviocita-modellt biztosít, amely kiküszöböli a betegektől származó elsődleges RASF-ek változékonyságát és korlátozott rendelkezésre állását.

Szövet
Ízületi nyálkahártya
Betegség
Színoviális fibroblaszt (SV40-vel halhatatlanná tett; a reumás ízületi gyulladás színoviocitáit modellezi)
Áttétes hely
Nem alkalmazható (nem tumorigenikus szinoviális fibroblaszt-modell)
Alkalmazások
Reumás ízületi gyulladás kutatása; szinoviociták aktiválása; MMP/TIMP szabályozás; NF-κB/JAK-STAT/MAPK jelátvitel; reumás gyógyszerek értékelése; ízületi károsodást modellező ko-kultúra-modellek; citokin-jelátvitel

02Osztályozás

Organizmus
Ember
Szex
Nő
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
GMO-státusz
GMO-S1
A GMO-státuszra vonatkozó részletek
GMO-S1: MH7A was immortalized by stable integration of SV40 large T antigen. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
fibroblaszt-szerű
Sejttípus
Fibroblaszt-szerű szinoviocita
Kettőzési idő
kb. 24–36 óra

04Azonosítók

Hivatkozás
MH7A (Cytion katalógusszám: 305036)
NCBI adóazonosító szám
9606
Cellosaurus
CVCL_0427

05Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabil glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion 820700a cikkszám)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
Diszociációs reagens
Accutase, 5 perc, 37 °C
Átültetés
Távolítsuk el a tápközeget, mossuk le kalcium- és magnéziummentes PBS-sel, öntsünk rá 0,25%-os tripszint, inkubáljuk 37 °C-on 3–5 percig, szuszpendáljuk újra a tápközegben, centrifugáljuk 300×g-vel 3 percig, öntsük ki a felülúszót, majd ültessük át újra.
Osztási arány
1 : 8 arányú felosztás
Ültetési sűrűség
1–3 × 10⁴ sejt/cm²
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Az olvadás utáni helyreállás
Felolvasztás után helyezze a sejteket 2–5 x 104 sejt/cm2 sűrűséggel a lemezre, és hagyja, hogy a sejtek legalább 24 órán át regenerálódjanak a fagyasztási folyamat után, és tapadjanak a lemezhez.
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

07Adományozó

Az adományozó életkora
Meghatározatlan életkor
Etnikai hovatartozás
Japán