Pāriet uz saturu
MH7A
Audums
Sinovija
Slimība
Sinoviālais fibroblasts (SV40 imortalizēts; modelē reimatoīdo artrīta sinoviocītu)
Metastāžu vieta
Neattiecas (netumorogēns sinoviālo fibroblastu modelis)

Dokumenti

MH7A

Cell line · Preces numurs 305036

MH7A is a human synovial fibroblast cell line immortalized by stable SV40 large T antigen expression, established from synovial tissue of a female Japanes...

€800.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

MH7A ir cilvēka sinoviālo fibroblastu šūnu līnija, kas imortalizēta ar stabilu SV40 lielā T antigēna ekspresiju un izveidota no kādas japāņu sievietes pacienta sinoviālā auda. MH7A aug kā adhezīva kultūra ar fibroblastveidīgu morfoloģiju un saglabā reimatoīdā artrīta sinoviālo fibroblastu (RASF) galvenās funkcionālās īpašības, tostarp reaģētspēju uz proinflamatoriskajiem citokīniem (IL-1β, TNF-α), matriksa metaloproteāžu (MMP) ekspresiju un spēju iekļūt skrimšļa matriksā. Tā ir viena no visplašāk izmantotajām in vitro modelēm sinoviocītu bioloģijas un reimatoīdā artrīta patogēnēzes pētīšanai.

MH7A ir piemērota reimatoīdā artrīta pētījumiem, sinoviocītu aktivācijai, MMP un TIMP regulācijai, citokīnu signālceļiem (NF-κB, JAK-STAT, MAPK), pretiekaisuma zāļu novērtēšanai (DMARD, bioloģiskie preparāti, JAK inhibitori) un locītavu destrukcijas kopkultūras modeļiem. Šī līnija nodrošina konsekventu, reproducējamu RA sinoviocītu modeli, kas ļauj apiet primāro, no pacientiem iegūto RASF variabilitāti un ierobežoto pieejamību.

Audums
Sinovija
Slimība
Sinoviālais fibroblasts (SV40 imortalizēts; modelē reimatoīdo artrīta sinoviocītu)
Metastāžu vieta
Neattiecas (netumorogēns sinoviālo fibroblastu modelis)
Pieteikumi
Reimatoīdā artrīta pētījumi; sinoviocītu aktivācija; MMP/TIMP regulācija; NF-κB/JAK-STAT/MAPK signālceļi; pretiekaisuma zāļu novērtēšana; locītavu destrukcijas kopkultūras modeļi; citokīnu signālceļi

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
ĢMO statuss
GMO-S1
Sīkāka informācija par ĢMO statusu
GMO-S1: MH7A was immortalized by stable integration of SV40 large T antigen. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
fibroblastu līdzīgs
Šūnu tips
Fibroblastu tipa sinoviocīts
Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
aptuveni 24 līdz 36 stundas

04Identifikatori

Atsauce
MH7A (Cytion kataloga numurs 305036)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_0427

05Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase, 5 min., 37 °C
Pārstādīšana
Noņemiet barotni, nomazgājiet ar PBS bez kalcija un magnija, pārlejiet ar 0,25 % tripsīnu, inkubējiet 37 °C temperatūrā 3–5 minūtes, atkārtoti suspendējiet barotnē, centrifugējiet 300×g 3 minūtes, izlejiet supernatantu, atkārtoti izsējiet.
Sadalījuma attiecība
1 : 8 sadalījums
Sēšanas blīvums
1 līdz 3 × 10⁴ šūnas/cm²
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atgūšanās pēc atkusņa
Pēc atkausēšanas izkliedējiet šūnas uz šķīvja ar blīvumu 2 līdz 5 x 104 šūnas/cm2 un ļaujiet šūnām atgūties no sasaldēšanas procesa un pielipt vismaz 24 stundas.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

07Ziedotājs

Donora vecums
Vecums nav precizēts
Etniskā piederība
Japāņu