Mine otse sisu juurde
MH7A
Kude
Liigesekelme
Haigus
Sünoviaalne fibroblast (SV40-ga surematuks muudetud; reumatoidartriidi sünoviootsüüdi mudel)
Metastaaside asukoht
Ei kohaldata (mittetumorigeenne sünoviaalne fibroblastide mudel)

Dokumendid

MH7A

Cell line · Toote number 305036

MH7A is a human synovial fibroblast cell line immortalized by stable SV40 large T antigen expression, established from synovial tissue of a female Japanes...

€800.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta

Kohandamine / Soovitused

Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

MH7A on inimese sünoviaalse fibroblasti rakuliin, mis on muudetud surematuks stabiilse SV40 suure T-antigeeni ekspressiooni abil ning mis on loodud ühe jaapani naispatsiendi sünoviaalse koe põhjal. MH7A kasvab adhesiivse kultuurina, millel on fibroblastilaadne morfoloogia, ning säilitab reumatoidartriidi sünoviaalfibroblastide (RASF) peamised funktsionaalsed omadused, sealhulgas reageerimisvõime proinflammatoorsetele tsütokiinidele (IL-1β, TNF-α), maatriksi metalloproteinaaside (MMP-de) ekspressiooni ning võime tungida kõhremaatriksisse. See on üks laialdasemalt kasutatavaid in vitro mudeleid sünoviotsüütide bioloogia ja reumatoidartriidi patogeneesi uurimiseks.

MH7A-d saab kasutada reumatoidartriidi uurimisel, sünoviotsüütide aktiveerimisel, MMP-de ja TIMP-ide regulatsioonis, tsütokiinide signaalimisel (NF-κB, JAK-STAT, MAPK), reumavastaste ravimite hindamisel (DMARD-id, bioloogilised ravimid, JAK-inhibiitorid) ning liigeste hävimise ko-kultuurimudelites. See rakuliin pakub järjepidevat ja korratavat reumatoidartriidi sünoviotsüütide mudelit, mis vältib patsientidelt saadud esmaste RASF-ide varieeruvust ja piiratud kättesaadavust.

Kude
Liigesekelme
Haigus
Sünoviaalne fibroblast (SV40-ga surematuks muudetud; reumatoidartriidi sünoviootsüüdi mudel)
Metastaaside asukoht
Ei kohaldata (mittetumorigeenne sünoviaalne fibroblastide mudel)
Rakendused
Reumatoidartriidi uurimine; sünoviotsüütide aktiveerimine; MMP/TIMP regulatsioon; NF-κB/JAK-STAT/MAPK signaaliedastus; reumavastaste ravimite hindamine; liigeste hävimist modelleerivad ko-kultuurimudelid; tsütokiinide signaaliedastus

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
GMO-staatus
GMO-S1
GMO-staatuse üksikasjad
GMO-S1: MH7A was immortalized by stable integration of SV40 large T antigen. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
fibroblastilaadne
Rakutüüp
Fibroblastilaadne sünoviotsüüt
Kahekordistumisaeg
umbes 24–36 tundi

04Tunnused

Viide
MH7A (Cytioni katalooginumber 305036)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_0427

05Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase, 5 min, 37 °C
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kasvukeskkond, peske kaltsiumi- ja magneesiumivaba PBS-ga, katke 0,25% trüpsiiniga, inkubeerige 37 °C juures 3–5 minutit, suspendeerige uuesti kasvukeskkonnas, tsentrifuugige 300×g juures 3 minutit, valage supernatant ära, külvake uuesti.
Jagamissuhe
1 : 8 jagunemine
Külvitihedus
1–3 × 10⁴ rakku/cm²
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Taastumine pärast sulamist
Pärast sulatamist asetage rakud plaadile tihedusega 2 kuni 5 x 104 rakku/cm2 ja laske rakkudel külmutamisprotsessist taastuda ja kinnituda vähemalt 24 tunni jooksul.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

07Annetaja

Doonori vanus
Täpsustamata vanus
Etniline kuuluvus
Jaapani