Siirry sisältöön
MH7A
Kudos
Niveltulehduskalvo
Sairaus
Nivelsynoviaalinen fibroblasti (SV40:llä ikuistettu; mallintaa nivelreuman synoviosyyttejä)
Metastaasikohde
Ei sovelleta (ei-kasvainta aiheuttava nivelkalvon fibroblastimalli)

Asiakirjat

MH7A

Cell line · Tuotenumero 305036

MH7A is a human synovial fibroblast cell line immortalized by stable SV40 large T antigen expression, established from synovial tissue of a female Japanes...

€800.00ilman veroja ja toimituskuluja

Räätälöinti / Suositukset

Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

MH7A on ihmisen nivelkalvon fibroblastisolulinja, joka on ikuistettu stabiilin SV40-viruksen suuren T-antigeenin ilmentymisen avulla ja joka on peräisin japanilaisen naispotilaan nivelkalvokudoksesta. MH7A kasvaa adheesiivisena viljelmänä, jolla on fibroblastien kaltainen morfologia, ja säilyttää nivelreuman synoviaalisten fibroblastien (RASF) keskeiset toiminnalliset ominaisuudet, mukaan lukien herkkyyden proinflammatorisille sytokiineille (IL-1β, TNF-α), matriisimetalloproteinaasien (MMP:t) ilmentyminen sekä kyky tunkeutua rustomatriisiin. Se on yksi laajimmin käytetyistä in vitro -malleista nivelkalvosolujen biologian ja nivelreuman patogeneesin tutkimuksessa.

MH7A-linjaa voidaan soveltaa nivelreuman tutkimuksessa, synoviosyyttien aktivaatiossa, MMP- ja TIMP-säätelyssä, sytokiinisignaloinnissa (NF-κB, JAK-STAT, MAPK), reumalääkkeiden arvioinnissa (DMARD-lääkkeet, biologiset lääkkeet, JAK-estäjät) sekä nivelten tuhoutumista koskevissa yhteisviljelymalleissa. Kanta tarjoaa yhdenmukaisen, toistettavan nivelreuman synoviosyyttimallin, joka kiertää potilaista peräisin olevien primaaristen RASF-solujen vaihtelevuuden ja rajoitetun saatavuuden.

Kudos
Niveltulehduskalvo
Sairaus
Nivelsynoviaalinen fibroblasti (SV40:llä ikuistettu; mallintaa nivelreuman synoviosyyttejä)
Metastaasikohde
Ei sovelleta (ei-kasvainta aiheuttava nivelkalvon fibroblastimalli)
Sovellukset
Nivelreuman tutkimus; synoviosyyttien aktivaatio; MMP/TIMP-säätely; NF-κB/JAK-STAT/MAPK-signalointi; reumalääkkeiden arviointi; nivelten tuhoutumista kuvaavat yhteisviljelymallit; sytokiinisignalointi

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Nainen
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
GMO-status
GMO-S1
GMO-statuksen tiedot
GMO-S1: MH7A was immortalized by stable integration of SV40 large T antigen. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
fibroblastien kaltaiset
Solutyyppi
Fibroblastien kaltaiset synoviosyytit
Kaksinkertaistumisaika
noin 24–36 tuntia

04Tunnisteet

Lähdeviite
MH7A (Cytionin tuotenumero 305036)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_0427

05Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820700a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase, 5 min., 37 °C
Soluviljely
Poista kasvualusta, pese PBS-liuoksella, josta on poistettu kalsium ja magnesium, peitä 0,25-prosenttisella trypsiiniliuoksella, inkuboi 37 °C:ssa 3–5 minuuttia, suspendoi uudelleen kasvualustaan, sentrifugoi 300×g:ssa 3 minuuttia, heitä supernatantti pois ja istuta solut uudelleen.
Jakosuhde
1 : 8-jako
Kylvötiheys
1–3 × 10⁴ solua/cm²
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulamisen jälkeinen palautuminen
Sulattamisen jälkeen levitä solut 2–5 x 104 solua/cm2 ja anna solujen toipua pakastusprosessista ja kiinnittyä vähintään 24 tunnin ajan.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

07Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
Ikä määrittelemätön
Etnisyys
Japanilainen