Ga naar de inhoud
MH7A
Weefsel
Synoviaalvlies
Ziekte
Synoviale fibroblast (met SV40 onsterfelijk gemaakt; model voor synoviocyten bij reumatoïde artritis)
Plaats van uitzaaiingen
Niet van toepassing (niet-tumorogene synoviale fibroblastmodel)

Documenten

MH7A

Cell line · Productnummer 305036

MH7A is a human synovial fibroblast cell line immortalized by stable SV40 large T antigen expression, established from synovial tissue of a female Japanes...

€800.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

MH7A is een menselijke synoviale fibroblastcellijn die onsterfelijk is gemaakt door stabiele expressie van het SV40-groot-T-antigeen, en die is opgezet uit synoviaal weefsel van een Japanse vrouwelijke patiënt. MH7A groeit als een hechtende kweek met een fibroblastachtige morfologie en behoudt belangrijke functionele kenmerken van synoviale fibroblasten bij reumatoïde artritis (RASF’s), waaronder de respons op pro-inflammatoire cytokines (IL-1β, TNF-α), de expressie van matrixmetalloproteïnasen (MMP’s) en het vermogen om de kraakbeenmatrix binnen te dringen. Het is een van de meest gebruikte in-vitromodellen voor het bestuderen van de biologie van synoviocyten en de pathogenese van RA.

MH7A is toepasbaar in onderzoek naar reumatoïde artritis, de activering van synoviocyten, de regulatie van MMP’s en TIMP’s, cytokinesignalering (NF-κB, JAK-STAT, MAPK), de evaluatie van antireumatische geneesmiddelen (DMARD’s, biologische geneesmiddelen, JAK-remmers) en co-cultuurmodellen van gewrichtsvernietiging. De lijn biedt een consistent, reproduceerbaar model van RA-synoviocyten dat de variabiliteit en beperkte beschikbaarheid van primaire, van patiënten afkomstige RASF’s omzeilt.

Weefsel
Synoviaalvlies
Ziekte
Synoviale fibroblast (met SV40 onsterfelijk gemaakt; model voor synoviocyten bij reumatoïde artritis)
Plaats van uitzaaiingen
Niet van toepassing (niet-tumorogene synoviale fibroblastmodel)
Toepassingen
Onderzoek naar reumatoïde artritis; activering van synoviocyten; regulatie van MMP/TIMP; NF-κB/JAK-STAT/MAPK-signaalwegen; evaluatie van antireumatische geneesmiddelen; co-cultuurmodellen voor gewrichtsvernietiging; cytokinesignalering

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Vrouw
Groei-eigenschappen
Aanhanger
GGO-status
GMO-S1
Details over de GGO-status
GMO-S1: MH7A was immortalized by stable integration of SV40 large T antigen. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
fibroblastachtig
Celtype
Fibroblastachtige synoviocyt
Verdubbelingstijd
ongeveer 24 tot 36 uur

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
MH7A (Cytion-catalogusnummer 305036)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0427

05Behandeling en kweek

Kweekmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiele Glutamine, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase, 5 min., 37 °C
Heruitplanten
Verwijder het medium, was met PBS zonder calcium en magnesium, bedek met 0,25% trypsine, incubeer 3–5 minuten bij 37 °C, resuspendeer in medium, centrifugeer 300×g gedurende 3 minuten, gooi het supernatant weg en zaai opnieuw uit.
Splitsingsverhouding
1 : 8-verdeling
Zaaidichtheid
1 tot 3 × 10⁴ cellen/cm²
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Herstel na ontdooiing
Na ontdooien, zaai de cellen uit op 2 tot 5 x 104 cellen/cm2 en laat de cellen minstens 24 uur herstellen van het invriesproces en zich hechten.
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

07Donateur

Leeftijd van de donor
Leeftijd onbepaald
Etnische afkomst
Japans