Vai al contenuto
MH7A
Tessuto
Sinovia
Malattia
Fibroblasto sinoviale (immortalizzato con SV40; modello di sinoviocita dell'artrite reumatoide)
Sito metastatico
Non applicabile (modello di fibroblasti sinoviali non tumorigenici)

Documenti

MH7A

Cell line · Codice prodotto 305036

MH7A is a human synovial fibroblast cell line immortalized by stable SV40 large T antigen expression, established from synovial tissue of a female Japanes...

€800.00IVA e spese di spedizione escluse

Personalizzazione / Suggerimenti

Disponibile
Lotto
Consigliati (partita più recente)
  • CoA
1

01Informazioni generali

Descrizione

MH7A è una linea cellulare di fibroblasti sinoviali umani immortalizzata mediante l’espressione stabile dell’antigene T grande di SV40, ottenuta dal tessuto sinoviale di una paziente giapponese di sesso femminile. La linea MH7A cresce come coltura aderente con morfologia simile a quella dei fibroblasti e conserva le caratteristiche funzionali chiave dei fibroblasti sinoviali dell’artrite reumatoide (RASF), tra cui la reattività alle citochine pro-infiammatorie (IL-1β, TNF-α), l’espressione delle metalloproteinasi della matrice (MMP) e la capacità di invadere la matrice cartilaginea. È uno dei modelli in vitro più ampiamente utilizzati per lo studio della biologia dei sinoviociti e della patogenesi dell’AR.

La linea MH7A è applicabile nella ricerca sull’artrite reumatoide, nell’attivazione dei sinoviociti, nella regolazione delle MMP e dei TIMP, nella segnalazione delle citochine (NF-κB, JAK-STAT, MAPK), nella valutazione dei farmaci antireumatici (DMARD, biologici, inibitori JAK) e nei modelli di cocultura della distruzione articolare. La linea fornisce un modello di sinoviociti dell’AR coerente e riproducibile che aggira la variabilità e la disponibilità limitata delle cellule sinoviali primarie (RASF) derivate dai pazienti.

Tessuto
Sinovia
Malattia
Fibroblasto sinoviale (immortalizzato con SV40; modello di sinoviocita dell'artrite reumatoide)
Sito metastatico
Non applicabile (modello di fibroblasti sinoviali non tumorigenici)
Applicazioni
Ricerca sull'artrite reumatoide; attivazione dei sinoviociti; regolazione delle MMP/TIMP; vie di segnalazione NF-κB/JAK-STAT/MAPK; valutazione dei farmaci antireumatici; modelli di cocultura per la distruzione articolare; segnalazione delle citochine

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Donna
Proprietà di crescita
Aderente
Presenza di OGM
GMO-S1
Dettagli sullo stato degli OGM
GMO-S1: MH7A was immortalized by stable integration of SV40 large T antigen. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
simile ai fibroblasti
Tipo di cellula
Sinoviocita di tipo fibroblastico
Tempo di raddoppio
circa da 24 a 36 ore

04Identificatori

Riferimento bibliografico
MH7A (codice catalogo Cytion 305036)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0427

05Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
RPMI 1640, w: 2,0 mM di glutammina stabile, w: 2,0 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820700a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase, 5 min., 37 °C
Subcoltura
Rimuovere il terreno di coltura, lavare con PBS privo di calcio e magnesio, coprire con tripsina allo 0,25%, incubare a 37 °C per 3–5 minuti, risospendere nel terreno di coltura, centrifugare a 300×g per 3 minuti, eliminare il surnatante, riseminare.
Rapporto di frazionamento
rapporto 1:8
Densità di semina
da 1 a 3 × 10⁴ cellule/cm²
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Recupero post-scongelamento
Dopo lo scongelamento, piastrare le cellule a una densità compresa tra 2 e 5 x 104 cellule/cm2 e lasciare che le cellule si riprendano dal processo di congelamento e aderiscano per almeno 24 ore.
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controllo di qualità e crioconservazione

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

07Donatore

Età dei donatori
Età non specificata
Etnia
Giapponese