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MH7A
Tecido
Sinóvia
Doença
Fibroblasto sinovial (imortalizado com SV40; modelo de sinoviócito da artrite reumatoide)
Local da metástase
Não aplicável (modelo de fibroblastos sinoviais não tumorigénicos)

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MH7A

Cell line · Número do produto 305036

MH7A is a human synovial fibroblast cell line immortalized by stable SV40 large T antigen expression, established from synovial tissue of a female Japanes...

€800.00sem impostos nem portes de envio

Personalização / Recomendações

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1

01Informações gerais

Descrição

A MH7A é uma linha celular de fibroblastos sinoviais humanos imortalizada através da expressão estável do antígeno T grande do SV40, estabelecida a partir de tecido sinovial de uma doente japonesa. A MH7A cresce como uma cultura aderente com morfologia semelhante à dos fibroblastos e mantém características funcionais essenciais dos fibroblastos sinoviais da artrite reumatoide (RASFs), incluindo a capacidade de resposta a citocinas pró-inflamatórias (IL-1β, TNF-α), a expressão de metaloproteinases da matriz (MMPs) e a capacidade de invadir a matriz cartilaginosa. É um dos modelos in vitro mais amplamente utilizados para o estudo da biologia dos sinoviócitos e da patogénese da AR.

A MH7A é aplicável na investigação da artrite reumatoide, na ativação dos sinoviócitos, na regulação das MMP e dos TIMP, na sinalização de citocinas (NF-κB, JAK-STAT, MAPK), na avaliação de medicamentos antirreumáticos (DMARDs, biológicos, inibidores de JAK) e em modelos de cocultura de destruição articular. Esta linha proporciona um modelo de sinoviócitos da AR consistente e reprodutível que contorna a variabilidade e a disponibilidade limitada de RASFs primários derivados de doentes.

Tecido
Sinóvia
Doença
Fibroblasto sinovial (imortalizado com SV40; modelo de sinoviócito da artrite reumatoide)
Local da metástase
Não aplicável (modelo de fibroblastos sinoviais não tumorigénicos)
Aplicações
Investigação sobre a artrite reumatoide; ativação dos sinoviócitos; regulação das MMP/TIMP; vias de sinalização NF-κB/JAK-STAT/MAPK; avaliação de fármacos antirreumáticos; modelos de cocultura de destruição articular; sinalização das citocinas

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Feminino
Propriedades de crescimento
Aderente
Estatuto em matéria de OGM
GMO-S1
Detalhes sobre o estatuto dos OGM
GMO-S1: MH7A was immortalized by stable integration of SV40 large T antigen. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
semelhante a um fibroblasto
Tipo de célula
Sinoviócito semelhante a um fibroblasto
Tempo de duplicação
aprox. 24 a 36 horas

04Identificadores

Referência
MH7A (número de catálogo da Cytion 305036)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0427

05Manuseamento e cultura

Meio de cultura
RPMI 1640, com: 2,0 mM de glutamina estável, com: 2,0 g/L NaHCO3 (número de artigo Cytion 820700a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase, 5 min., 37 °C
Subcultura
Retirar o meio, lavar com PBS sem cálcio nem magnésio, cobrir com tripsina a 0,25%, incubar a 37 °C durante 3 a 5 minutos, ressuspender no meio, centrifugar a 300×g durante 3 minutos, descartar o sobrenadante e semear novamente.
Rácio de divisão
Divisão de 1 para 8
Densidade de sementeira
1 a 3 × 10⁴ células/cm²
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Recuperação após o descongelamento
Após o descongelamento, coloque as células em placas a uma densidade de 2 a 5 x 104 células/cm2 e deixe-as recuperar do processo de congelamento e aderir durante pelo menos 24 horas.
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controlo de qualidade e criopreservação

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

07Doador

Idade do dador
Idade não especificada
Etnia
Japonês