Prejsť na obsah
MH7A
Tkanivo
synoviálna membrána
Choroba
Synoviálny fibroblast (imortalizovaný vírusom SV40; model synoviocytu pri reumatoidnej artritíde)
Miesto metastáz
Neplatí (model synoviálnych fibroblastov bez tumorigenického potenciálu)

Dokumenty

MH7A

Cell line · Číslo výrobku 305036

MH7A is a human synovial fibroblast cell line immortalized by stable SV40 large T antigen expression, established from synovial tissue of a female Japanes...

€800.00bez DPH a poštovného

Prispôsobenie / Odporúčania

Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

MH7A je ľudská bunková línia synoviálnych fibroblastov, ktorá bola imortalizovaná stabilnou expresiou veľkého T-antigénu vírusu SV40 a bola izolovaná zo synoviálnej tkanivovej vzorky japonskej pacientky. MH7A rastie ako adhezívna kultúra s morfológiou podobnou fibroblastom a zachováva kľúčové funkčné charakteristiky synoviálnych fibroblastov pri reumatoidnej artritíde (RASF), vrátane citlivosti na prozápalové cytokíny (IL-1β, TNF-α), expresiu matrixových metaloproteáz (MMP) a schopnosť invadovať chrupavkovú matrix. Je to jeden z najčastejšie používaných in vitro modelov na štúdium biológie synoviocytov a patogenézy RA.

MH7A je využiteľná vo výskume reumatoidnej artritídy, aktivácie synoviocytov, regulácie MMP a TIMP, cytokínovej signalizácie (NF-κB, JAK-STAT, MAPK), hodnotenia antireumatických liekov (DMARD, biologické lieky, inhibítory JAK) a v modeloch kokultúry deštrukcie kĺbov. Táto línia poskytuje konzistentný a reprodukovateľný model synoviocytov pri RA, ktorý obchádza variabilitu a obmedzenú dostupnosť primárnych RASF získaných od pacientov.

Tkanivo
synoviálna membrána
Choroba
Synoviálny fibroblast (imortalizovaný vírusom SV40; model synoviocytu pri reumatoidnej artritíde)
Miesto metastáz
Neplatí (model synoviálnych fibroblastov bez tumorigenického potenciálu)
Aplikácie
Výskum reumatoidnej artritídy; aktivácia synoviocytov; regulácia MMP/TIMP; signálna dráha NF-κB/JAK-STAT/MAPK; hodnotenie antireumatických liekov; modely ko-kultúry znázorňujúce deštrukciu kĺbov; signálna dráha cytokínov

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Žena
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Stav GMO
GMO-S1
Podrobnosti o štatúte GMO
GMO-S1: MH7A was immortalized by stable integration of SV40 large T antigen. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
podobný fibroblastom
Typ bunky
Synoviocyt podobný fibroblastu
Doba zdvojnásobenia
približne 24 až 36 hodín

04Identifikátory

Citácia
MH7A (katalógové číslo Cytion 305036)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0427

05Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilný glutamín, w: 2,0 g/L NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase, 5 min., 37 °C
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte médium, premyte PBS bez vápnika a horčíka, zalejte 0,25 % trypsínom, inkubujte pri 37 °C počas 3–5 minút, resuspendujte v médiu, odstreďte pri 300×g po dobu 3 minút, supernatant zlikvidujte a znovu naočkujte.
Pomer rozdelenia
pomer 1 : 8
Hustota výsevu
1 až 3 × 10⁴ buniek/cm²
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Zotavenie po rozmrazení
Po rozmrazení naneste bunky v množstve 2 až 5 x 104 buniek/cm2 a nechajte bunky zotaviť sa z procesu zmrazenia a prilnúť najmenej 24 hodín.
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervácia

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

07Darca

Vek darcu
Vek nešpecifikovaný
Etnická príslušnosť
Japonský