Pereiti prie turinio
mIMCD-3
Audinys
Inkstas, vidinis medulinis surinkamasis kanalas
Liga
Normalus
Sinonimai
mIMCD3, IMCD-3, IMCD3, mouse Inner Medullary Collecting Duct-3

Dokumentai

mIMCD-3

Cell line · Prekės numeris 305382

The mIMCD-3 cell line is derived from the murine inner medullary collecting duct and is widely used as a model for studying renal epithelial cell biology,...

€550.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų
Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

mIMCD-3 ląstelių linija yra išskirta iš pelių vidinio medulinio surinkimo kanalo ir plačiai naudojama kaip modelis inkstų epitelio ląstelių biologijai, inkstų vystymuisi ir patofiziologijai tirti. Ši nemirtinga ląstelių linija pasižymi surinkimo kanalėliui būdingomis savybėmis, įskaitant gebėjimą formuoti tubulines struktūras 3D kultūrų sistemose bei ekspresuoti glaudžių jungčių baltymus, akvaporinus ir epitelio žymenis. mIMCD-3 ląstelės yra ypač vertingos tiriant jonų transporto mechanizmus, vandens reguliavimą ir ląstelių reakciją į mechaninį stresą, todėl jos yra nepakeičiama priemonė nefrologijos tyrimuose.

mIMCD-3 ląstelės buvo naudojamos policistinės inkstų ligos (PKD) tyrimuose, siekiant suprasti cistų susidarymo molekulinį pagrindą. Visų pirma, ši ląstelių linija buvo genetiškai modifikuota, siekiant ištirti polikistino baltymų (PKD1 ir PKD2) vaidmenį – jie atlieka pagrindinį vaidmenį autosominės dominuojančios polikistinės inkstų ligos (ADPKD) atveju. Pavyzdžiui, mIMCD-3 ląstelės, kuriose trūksta PKD1, mechaninio streso sąlygomis rodo nenormalų kanalėlių išsiplėtimą, imituodamos PKD pacientams būdingą cistogenezę. Be to, eksperimentai su mIMCD-3 ląstelėmis parodė pirminių cilių vaidmenį cAMP signalizacijos ir mechanotransdukcijos tarpininkavime – tai yra kritiniai procesai inkstų epitelio funkcionavimui ir ligos patologijai.

Ši ląstelių linija taip pat naudojama vaistų atradimui ir bandymams, ypač nefrotoksinio poveikio ir inkstams skirtų terapijų kontekste. mIMCD-3 ląstelės suteikia platformą reakcijų į chemoterapinius preparatus, pavyzdžiui, cisplatiną, kuris gali sukelti oksidacinį stresą ir apoptozę inkstų ląstelėse, tyrimams. Be to, dėl savo stiprių augimo savybių ir atkuriamumo kultūrinėse sąlygose mIMCD-3 ląstelės tampa pritaikomu modeliu, leidžiančiu tirti įvairius inkstų biologijos aspektus ir tobulinti inkstų ligų gydymo metodus.

Audinys
Inkstas, vidinis medulinis surinkamasis kanalas
Liga
Normalus
Sinonimai
  • mIMCD3
  • IMCD-3
  • IMCD3
  • mouse Inner Medullary Collecting Duct-3

02Klasifikacija

Organizmas
Pele
Seksas
Nenurodyta
Augimo savybės
Prisijungęs
GMO statusas
GMO-S1
Išsami informacija apie GMO statusą
GMO-S1: This murine inner medullary collecting duct cell line (mIMCD-3) contains an SV40 T-Antigen transgene derived from a transgenic mouse model, supporting immortalization. The construct is stably present in primary kidney-derived cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biologinio saugumo lygis
2

03Charakteristikos

Morfologija
Į epitelį panašus

04Identifikatoriai

Nuoroda
mIMCD-3 (Cytion katalogo numeris 305382)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
10090
Cellosaurus
CVCL_0429

05Išraiška ir jautrumas

Virusai
Transformantas: Simiano virusas 40 (SV40)

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l gliukozės, w: 2,5 mM L-glutamino, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natrio piruvato, w: 1,2 g/l NaHCO3 (Cytion gaminio numeris 820400a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Sėjos tankis
1–3 × 10⁴ ląstelių/cm²
Skysčių atnaujinimas
2-3 kartus per savaitę
Atkūrimas po atšilimo
Atšildžius, išdėliokite ląsteles 2–5 x 104 ląstelių/cm2 tankiu ir leiskite ląstelėms atsigauti po užšaldymo proceso ir prisitvirtinti bent 24 valandas.
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Veislė / porūšis
Tg(SV40E)Bri/7 transgeninis
Donoro amžius
Suaugusiųjų