Pāriet uz saturu
mIMCD-3
Audums
Niere, iekšējais medulārais savākšanas kanāls
Slimība
Parasts
Sinonīmi
mIMCD3, IMCD-3, IMCD3, mouse Inner Medullary Collecting Duct-3

Dokumenti

mIMCD-3

Cell line · Preces numurs 305382

The mIMCD-3 cell line is derived from the murine inner medullary collecting duct and is widely used as a model for studying renal epithelial cell biology,...

€550.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

Šūnu līnija mIMCD-3 ir iegūta no peles iekšējā medulārā savākšanas kanāla un tiek plaši izmantota kā modelis nieru epitēlija šūnu bioloģijas, nieru attīstības un patofizioloģijas pētīšanai. Šī nemirstīgā šūnu līnija uzrāda savākšanas kanāliem raksturīgas īpašības, tostarp spēju veidot cauruļveida struktūras 3D kultivēšanas sistēmās, kā arī ekspresē ciešo savienojumu proteīnus, akvaporīnus un epitēlija marķierus. mIMCD-3 šūnas ir īpaši vērtīgas jonu transporta mehānismu, ūdens regulācijas un šūnu reakcijas uz mehānisku stresu izpētē, tādējādi padarot tās par būtisku instrumentu nefroloģijas pētījumos.

mIMCD-3 šūnas ir izmantotas policistisko nieru slimības (PKD) pētījumos, lai izprastu cistu veidošanās molekulāro pamatu. Jo īpaši šī šūnu līnija ir ģenētiski modificēta, lai pētītu policistīnu proteīnu (PKD1 un PKD2) lomu, kuriem ir galvenā nozīme autosomāli dominējošajā policistiskajā nieru slimībā (ADPKD). Piemēram, mIMCD-3 šūnām, kurām trūkst PKD1, mehāniskas slodzes ietekmē novēro patoloģisku kanāliņu paplašināšanos, kas atgādina PKD pacientiem novēroto cistu veidošanos. Turklāt eksperimenti ar mIMCD-3 šūnām ir pierādījuši primāro ciliju lomu cAMP signālu pārraidē un mehānotransdukcijā — procesos, kas ir izšķiroši nieru epitēlija funkcijā un slimības patoloģijā.

Šo šūnu līniju izmanto arī zāļu atklāšanā un testēšanā, jo īpaši saistībā ar nefrotoksicitāti un nierēm specifiskām terapijām. mIMCD-3 šūnas nodrošina platformu, lai pētītu reakcijas uz ķīmijterapijas līdzekļiem, piemēram, cisplatīnu, kas var izraisīt oksidatīvo stresu un apoptozi nieru šūnās. Turklāt to spēcīgās augšanas īpašības un reproducējamība kultivēšanas apstākļos padara mIMCD-3 šūnas par pielāgojamu modeli, lai pētītu dažādus nieru bioloģijas aspektus un attīstītu terapeitiskas pieejas nieru slimību ārstēšanai.

Audums
Niere, iekšējais medulārais savākšanas kanāls
Slimība
Parasts
Sinonīmi
  • mIMCD3
  • IMCD-3
  • IMCD3
  • mouse Inner Medullary Collecting Duct-3

02Klasifikācija

Organisms
Pele
Sekss
Nav norādīts
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
ĢMO statuss
GMO-S1
Sīkāka informācija par ĢMO statusu
GMO-S1: This murine inner medullary collecting duct cell line (mIMCD-3) contains an SV40 T-Antigen transgene derived from a transgenic mouse model, supporting immortalization. The construct is stably present in primary kidney-derived cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloģiskās drošības līmenis
2

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlijveidīgs

04Identifikatori

Atsauce
mIMCD-3 (Cytion kataloga numurs 305382)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
10090
Cellosaurus
CVCL_0429

05Pazīmes un uzņēmība

Vīrusi
Transformants: Sīmiāna vīruss 40 (SV40)

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glikozes, w: 2,5 mM L-glutamīna, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM nātrija piruvāta, w: 1,2 g/l NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820400a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sēšanas blīvums
1 līdz 3 x 10⁴ šūnas/cm²
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atgūšanās pēc atkusņa
Pēc atkausēšanas izkliedējiet šūnas uz šķīvja ar blīvumu 2 līdz 5 x 104 šūnas/cm2 un ļaujiet šūnām atgūties no sasaldēšanas procesa un pielipt vismaz 24 stundas.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Šķirne / pasuga
Tg(SV40E)Bri/7 transgēnu
Donora vecums
Pieaugušo