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mIMCD-3
Pañuelo de papel
Riñón, conducto colector medular interno
Enfermedad
Normal
Sinónimos
mIMCD3, IMCD-3, IMCD3, mouse Inner Medullary Collecting Duct-3

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mIMCD-3

Cell line · Número de producto 305382

The mIMCD-3 cell line is derived from the murine inner medullary collecting duct and is widely used as a model for studying renal epithelial cell biology,...

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01Información general

Descripción

La línea celular mIMCD-3 se deriva del conducto colector medular interno murino y se utiliza ampliamente como modelo para estudiar la biología de las células epiteliales renales, el desarrollo renal y la fisiopatología. Esta línea celular inmortalizada presenta características típicas del conducto colector, entre ellas la capacidad de formar estructuras tubulares en sistemas de cultivo tridimensionales y la expresión de proteínas de uniones estrechas, acuaporinas y marcadores epiteliales. Las células mIMCD-3 resultan especialmente valiosas para explorar los mecanismos de transporte iónico, la regulación hídrica y la respuesta celular al estrés mecánico, lo que las convierte en una herramienta esencial en la investigación nefrológica.

Las células mIMCD-3 se han utilizado en estudios sobre la enfermedad renal poliquística (PKD) para comprender la base molecular de la formación de quistes. En concreto, esta línea celular ha sido modificada genéticamente para investigar el papel de las proteínas policistinas (PKD1 y PKD2), que desempeñan un papel clave en la enfermedad renal poliquística autosómica dominante (ADPKD). Por ejemplo, las células mIMCD-3 que carecen de PKD1 presentan una dilatación anómala de los túbulos bajo estrés mecánico, lo que imita la cistogénesis observada en pacientes con PKD. Además, los experimentos con células mIMCD-3 han demostrado el papel de los cilios primarios en la mediación de la señalización del AMPc y la mecanotransducción, procesos críticos para la función epitelial renal y la patología de la enfermedad.

Esta línea celular también se emplea en el descubrimiento y ensayo de fármacos, especialmente en el contexto de la nefrotoxicidad y las terapias específicas para el riñón. Las células mIMCD-3 proporcionan una plataforma para estudiar las respuestas a agentes quimioterapéuticos como el cisplatino, que puede inducir estrés oxidativo y apoptosis en las células renales. Además, sus sólidas características de crecimiento y su reproducibilidad en condiciones de cultivo convierten a las células mIMCD-3 en un modelo adaptable para investigar diversos aspectos de la biología renal y para impulsar nuevos enfoques terapéuticos en las enfermedades renales.

Pañuelo de papel
Riñón, conducto colector medular interno
Enfermedad
Normal
Sinónimos
  • mIMCD3
  • IMCD-3
  • IMCD3
  • mouse Inner Medullary Collecting Duct-3

02Clasificación

Organismo
Ratón
Sexo
Sin especificar
Propiedades de crecimiento
Adherente
Situación respecto a los OMG
GMO-S1
Detalles sobre la presencia de OMG
GMO-S1: This murine inner medullary collecting duct cell line (mIMCD-3) contains an SV40 T-Antigen transgene derived from a transgenic mouse model, supporting immortalization. The construct is stably present in primary kidney-derived cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Nivel de bioseguridad
2

03Características

Morfología
De tipo epitelial

04Identificadores

Referencia
mIMCD-3 (número de catálogo de Cytion 305382)
N.º de identificación fiscal del NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_0429

05Expresión y susceptibilidad

Virus
Transformante: Virus simia 40 (SV40)

06Manejo y cultivo

Medio de cultivo
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L de glucosa, w: 2,5 mM de L-glutamina, w: 15 mM de HEPES, w: 0,5 mM de piruvato sódico, w: 1,2 g/L de NaHCO3 (número de artículo de Cytion 820400a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Complementar el medio con un 10% de FBS
Reactivo de disociación
Accutase
Subcultivo
Retire el medio antiguo de las células adheridas y lávelas con PBS que carezca de calcio y magnesio. Para matraces T25, utilice 3-5 ml de PBS, y para matraces T75, utilice 5-10 ml. A continuación, cubra completamente las células con Accutase, utilizando 1-2 ml para matraces T25 y 2,5 ml para matraces T75. Deje incubar las células a temperatura ambiente durante 8-10 minutos para desprenderlas. Tras la incubación, mezclar suavemente las células con 10 ml de medio para resuspenderlas y, a continuación, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Desechar el sobrenadante, resuspender las células en medio fresco y transferirlas a nuevos matraces que ya contengan medio fresco.
Densidad de siembra
De 1 a 3 × 10⁴ células/cm²
Renovación de fluidos
de 2 a 3 veces por semana
Recuperación tras la descongelación
Después de descongelar, siembre las células a una densidad de 2 a 5 x 104 células/cm2 y deje que las células se recuperen del proceso de congelación y se adhieran durante al menos 24 horas.
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

08Donante

Raza / subespecie
Tg(SV40E)Bri/7 transgénico
Edad del donante
Adultos