
- Gewebe
- Niere, innerer medullärer Sammelkanal
- Krankheit
- Normal
- Synonyme
- mIMCD3, IMCD-3, IMCD3, mouse Inner Medullary Collecting Duct-3
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mIMCD-3
Cell line · Artikelnummer 305382
The mIMCD-3 cell line is derived from the murine inner medullary collecting duct and is widely used as a model for studying renal epithelial cell biology,...
Anpassung / Empfehlungen
- mIMCD-3Cell line€550.00
Empfohlen (frischeste Charge)
01Allgemeine Informationen
- Beschreibung
Die Zelllinie mIMCD-3 stammt aus dem inneren medullären Sammelkanal der Maus und wird häufig als Modell zur Erforschung der Biologie der Nierenepithelzellen, der Nierenentwicklung und der Pathophysiologie eingesetzt. Diese immortalisierte Zelllinie weist für den Sammelkanal typische Merkmale auf, darunter die Fähigkeit, in 3D-Kultursystemen tubuläre Strukturen zu bilden, sowie die Expression von Proteinen der Tight Junctions, Aquaporinen und Epithelmarkern. mIMCD-3-Zellen sind besonders wertvoll für die Erforschung von Mechanismen des Ionentransports, der Wasserregulation und der zellulären Reaktion auf mechanische Belastung, was sie zu einem unverzichtbaren Werkzeug in der nephrologischen Forschung macht.
mIMCD-3-Zellen wurden in Studien zur polyzystischen Nierenerkrankung (PKD) eingesetzt, um die molekularen Grundlagen der Zystenbildung zu verstehen. Insbesondere wurde diese Zelllinie genetisch modifiziert, um die Rolle der Polycystin-Proteine (PKD1 und PKD2) zu untersuchen, die bei der autosomal-dominanten polyzystischen Nierenerkrankung (ADPKD) eine Schlüsselrolle spielen. So zeigen beispielsweise mIMCD-3-Zellen ohne PKD1 unter mechanischer Belastung eine abnormale Tubuluserweiterung, die die bei PKD-Patienten beobachtete Zystenbildung nachahmt. Darüber hinaus haben Experimente mit mIMCD-3-Zellen die Rolle der Primärzilien bei der Vermittlung der cAMP-Signalübertragung und der Mechanotransduktion aufgezeigt – entscheidende Prozesse für die Funktion des Nierenepithels und die Pathologie der Erkrankung.
Diese Zelllinie wird auch in der Wirkstoffforschung und -prüfung eingesetzt, insbesondere im Zusammenhang mit Nephrotoxizität und nierenspezifischen Therapien. mIMCD-3-Zellen bieten eine Plattform zur Untersuchung der Reaktionen auf Chemotherapeutika wie Cisplatin, die in Nierenzellen oxidativen Stress und Apoptose auslösen können. Darüber hinaus machen ihre robusten Wachstumseigenschaften und ihre Reproduzierbarkeit unter Kulturbedingungen mIMCD-3-Zellen zu einem anpassungsfähigen Modell für die Untersuchung verschiedener Aspekte der Nierenbiologie und für die Weiterentwicklung therapeutischer Ansätze bei Nierenerkrankungen.
- Gewebe
- Niere, innerer medullärer Sammelkanal
- Krankheit
- Normal
- Synonyme
- mIMCD3
- IMCD-3
- IMCD3
- mouse Inner Medullary Collecting Duct-3
02Klassifizierung
- Organismus
- Maus
- Sex
- Nicht näher bezeichnet
- Wachstumseigenschaften
- Anhänger
- GVO-Status
- GMO-S1
- Angaben zum GVO-Status
- GMO-S1: This murine inner medullary collecting duct cell line (mIMCD-3) contains an SV40 T-Antigen transgene derived from a transgenic mouse model, supporting immortalization. The construct is stably present in primary kidney-derived cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biologische Sicherheitsstufe
- 2
03Merkmale
- Morphologie
- Epithelähnlich
04Bezeichner
- Quellenangabe
- mIMCD-3 (Cytion-Katalognummer 305382)
- NCBI-Steuer-ID
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_0429
05Expression und Anfälligkeit
- Viren
- Transformant: Simian-Virus 40 (SV40)
06Handhabung und Kultur
- Nährmedium
- DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucose, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820400a)
- Inkubationsatmosphäre
37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.
- Nahrungsergänzungsmittel
- Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
- Dissoziationsreagenz
- Accutase
- Subkultivierung
- Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
- Aussaatdichte
- 1 bis 3 × 10⁴ Zellen/cm²
- Flüssigkeitswechsel
- 2 bis 3 Mal pro Woche
- Erholung nach dem Auftauen
- Nach dem Auftauen die Zellen mit einer Dichte von 2 bis 5 x 104 Zellen/cm² ausplattieren und die Zellen mindestens 24 Stunden lang vom Gefrierprozess erholen lassen und anhaften lassen.
- Auftauen und Kultivierung
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung
- Sterilität
Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.
Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.
- Gefriermedium
- Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
- Lagerbedingungen
Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.
- Versandbedingungen
Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.
08Spender
- Rasse / Unterart
- Tg(SV40E)Bri/7 transgene
- Alter des Spenders
- Erwachsener
09Rechtliches und Sicherheit
- Sicherheitshinweise
- Wenn Sie planen, ein Kryovial in flüssigem Stickstoff zu lagern, um es später aufzutauen, müssen Sie strenge Sicherheitsmaßnahmen einhalten. Geeignete Schutzhandschuhe und -kleidung sind unerlässlich, und beim Transfer der gefrorenen Proben in den oder aus dem Flüssigstickstofftank ist das Tragen einer Gesichtsmaske oder einer Schutzbrille erforderlich. Damit soll die Verletzungsgefahr durch mögliche Explosionen der Kryovials bei der Entnahme, die zum Herausschleudern von scharfen Fragmenten führen können, verringert werden.
- Garantie
Bei Cytion stehen wir hinter der Qualität und Lebensfähigkeit unserer Produkte. Wir garantieren, dass unsere Zellen zu Beginn der Kultur für 60 Tage nach dem Versand aus unseren Einrichtungen lebensfähig sind. Wir versichern, dass alle Materialien mit den im Analysezertifikat und/oder Produktblatt beschriebenen Spezifikationen übereinstimmen
Ausführliche Informationen finden Sie in unserer <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantieerklärung
- Materialübertragungsvereinbarung erforderlich
- Ja