mIMCD-3

A linhagem celular mIMCD-3 é derivada do ducto coletor medular interno murino e é amplamente utilizada como modelo para o estudo da biologia das células epiteliais renais, do desenvolvimento renal e da fisiopatologia. Essa linha celular imortalizada apresenta características típicas do ducto coletor, incluindo a capacidade de formar estruturas tubulares em sistemas de cultura 3D e a expressão de proteínas de junções apertadas, aquaporinas e marcadores epiteliais. As células mIMCD-3 são particularmente valiosas para a exploração de mecanismos de transporte iônico, regulação hídrica e resposta celular ao estresse mecânico, tornando-as uma ferramenta essencial na pesquisa nefrológica.

As células mIMCD-3 têm sido utilizadas em estudos sobre a doença renal policística (PKD) para compreender a base molecular da formação de cistos. Em particular, essa linhagem celular foi geneticamente modificada para investigar o papel das proteínas policistinas (PKD1 e PKD2), que são atores-chave na doença renal policística autossômica dominante (ADPKD). Por exemplo, as células mIMCD-3 sem PKD1 apresentam dilatação tubular anormal sob estresse mecânico, imitando a cistogênese observada em pacientes com PKD. Além disso, experimentos envolvendo células mIMCD-3 demonstraram o papel dos cílios primários na mediação da sinalização do AMPc e da mecanotransdução, processos críticos na função epitelial renal e na patologia da doença.

Essa linhagem celular também é empregada na descoberta e no teste de medicamentos, particularmente no contexto da nefrotoxicidade e de terapias específicas para os rins. As células mIMCD-3 fornecem uma plataforma para o estudo das respostas a agentes quimioterápicos como a cisplatina, que podem induzir estresse oxidativo e apoptose nas células renais. Além disso, suas características de crescimento robusto e reprodutibilidade em condições de cultura tornam as células mIMCD-3 um modelo versátil para investigar diversos aspectos da biologia renal e para o avanço de abordagens terapêuticas em doenças renais.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.