Ga naar de inhoud
mIMCD-3
Weefsel
Nier, binnenste medullaire verzamelbuis
Ziekte
Normaal
Synoniemen
mIMCD3, IMCD-3, IMCD3, mouse Inner Medullary Collecting Duct-3

Documenten

mIMCD-3

Cell line · Productnummer 305382

The mIMCD-3 cell line is derived from the murine inner medullary collecting duct and is widely used as a model for studying renal epithelial cell biology,...

€550.00excl. btw en verzendkosten
Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De mIMCD-3-cellijn is afkomstig van het binnenste medullaire verzamelkanaal van de muis en wordt op grote schaal gebruikt als model voor onderzoek naar de biologie van nierepitheelcellen, de ontwikkeling van de nier en de pathofysiologie. Deze onsterfelijke cellijn vertoont kenmerken die typisch zijn voor het verzamelkanaal, waaronder het vermogen om buisvormige structuren te vormen in 3D-kweeksystemen en de expressie van tight-junction-eiwitten, aquaporinen en epitheliale markers. mIMCD-3-cellen zijn bijzonder waardevol voor het onderzoeken van mechanismen van ionentransport, waterregulatie en cellulaire reacties op mechanische belasting, waardoor ze een essentieel hulpmiddel vormen in nefrologisch onderzoek.

mIMCD-3-cellen zijn gebruikt in studies naar polycystische nierziekte (PKD) om de moleculaire basis van cystevorming te begrijpen. Deze cellijn is met name genetisch gemodificeerd om de rol te onderzoeken van de polycystine-eiwitten (PKD1 en PKD2), die een sleutelrol spelen bij autosomaal dominante polycystische nierziekte (ADPKD). Zo vertonen mIMCD-3-cellen zonder PKD1 onder mechanische belasting een abnormale verwijding van de tubuli, wat de cystevorming nabootst die bij PKD-patiënten wordt waargenomen. Daarnaast hebben experimenten met mIMCD-3-cellen de rol aangetoond van primaire cilia bij het mediëren van cAMP-signalering en mechanotransductie, cruciale processen in de nierepitheel-functie en de pathologie van de ziekte.

Deze cellijn wordt ook ingezet bij het ontdekken en testen van geneesmiddelen, met name in de context van nefrotoxiciteit en nierspecifieke therapieën. mIMCD-3-cellen bieden een platform voor het bestuderen van reacties op chemotherapeutische middelen zoals cisplatine, die oxidatieve stress en apoptose in niercellen kunnen veroorzaken. Bovendien maken hun robuuste groeikenmerken en reproduceerbaarheid onder kweekomstandigheden mIMCD-3-cellen tot een flexibel model voor het onderzoeken van diverse aspecten van de nierbiologie en voor het bevorderen van therapeutische benaderingen bij nierziekten.

Weefsel
Nier, binnenste medullaire verzamelbuis
Ziekte
Normaal
Synoniemen
  • mIMCD3
  • IMCD-3
  • IMCD3
  • mouse Inner Medullary Collecting Duct-3

02Classificatie

Organisme
Muis
Seks
Niet gespecificeerd
Groei-eigenschappen
Aanhanger
GGO-status
GMO-S1
Details over de GGO-status
GMO-S1: This murine inner medullary collecting duct cell line (mIMCD-3) contains an SV40 T-Antigen transgene derived from a transgenic mouse model, supporting immortalization. The construct is stably present in primary kidney-derived cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioveiligheidsniveau
2

03Kenmerken

Morfologie
Epitheelachtig

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
mIMCD-3 (Cytion-catalogusnummer 305382)
NCBI-belastingnummer
10090
Cellosaurus
CVCL_0429

05Expressie en vatbaarheid

Virussen
Transformant: Simian virus 40 (SV40)

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucose, w: 2,5 mM L-Glutamine, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Natriumpyruvaat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820400a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Zaaidichtheid
1 tot 3 × 10⁴ cellen/cm²
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Herstel na ontdooiing
Na ontdooien, zaai de cellen uit op 2 tot 5 x 104 cellen/cm2 en laat de cellen minstens 24 uur herstellen van het invriesproces en zich hechten.
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Soort / ondersoort
Tg(SV40E)Bri/7 transgeen
Leeftijd van de donor
Volwassen