
- Weefsel
- Nier, binnenste medullaire verzamelbuis
- Ziekte
- Normaal
- Synoniemen
- mIMCD3, IMCD-3, IMCD3, mouse Inner Medullary Collecting Duct-3
Documenten
mIMCD-3
Cell line · Productnummer 305382
The mIMCD-3 cell line is derived from the murine inner medullary collecting duct and is widely used as a model for studying renal epithelial cell biology,...
Maatwerk / Aanbevelingen
- mIMCD-3Cell line€550.00
Aanbevolen (verste partij)
01Algemene informatie
- Beschrijving
De mIMCD-3-cellijn is afkomstig van het binnenste medullaire verzamelkanaal van de muis en wordt op grote schaal gebruikt als model voor onderzoek naar de biologie van nierepitheelcellen, de ontwikkeling van de nier en de pathofysiologie. Deze onsterfelijke cellijn vertoont kenmerken die typisch zijn voor het verzamelkanaal, waaronder het vermogen om buisvormige structuren te vormen in 3D-kweeksystemen en de expressie van tight-junction-eiwitten, aquaporinen en epitheliale markers. mIMCD-3-cellen zijn bijzonder waardevol voor het onderzoeken van mechanismen van ionentransport, waterregulatie en cellulaire reacties op mechanische belasting, waardoor ze een essentieel hulpmiddel vormen in nefrologisch onderzoek.
mIMCD-3-cellen zijn gebruikt in studies naar polycystische nierziekte (PKD) om de moleculaire basis van cystevorming te begrijpen. Deze cellijn is met name genetisch gemodificeerd om de rol te onderzoeken van de polycystine-eiwitten (PKD1 en PKD2), die een sleutelrol spelen bij autosomaal dominante polycystische nierziekte (ADPKD). Zo vertonen mIMCD-3-cellen zonder PKD1 onder mechanische belasting een abnormale verwijding van de tubuli, wat de cystevorming nabootst die bij PKD-patiënten wordt waargenomen. Daarnaast hebben experimenten met mIMCD-3-cellen de rol aangetoond van primaire cilia bij het mediëren van cAMP-signalering en mechanotransductie, cruciale processen in de nierepitheel-functie en de pathologie van de ziekte.
Deze cellijn wordt ook ingezet bij het ontdekken en testen van geneesmiddelen, met name in de context van nefrotoxiciteit en nierspecifieke therapieën. mIMCD-3-cellen bieden een platform voor het bestuderen van reacties op chemotherapeutische middelen zoals cisplatine, die oxidatieve stress en apoptose in niercellen kunnen veroorzaken. Bovendien maken hun robuuste groeikenmerken en reproduceerbaarheid onder kweekomstandigheden mIMCD-3-cellen tot een flexibel model voor het onderzoeken van diverse aspecten van de nierbiologie en voor het bevorderen van therapeutische benaderingen bij nierziekten.
- Weefsel
- Nier, binnenste medullaire verzamelbuis
- Ziekte
- Normaal
- Synoniemen
- mIMCD3
- IMCD-3
- IMCD3
- mouse Inner Medullary Collecting Duct-3
02Classificatie
- Organisme
- Muis
- Seks
- Niet gespecificeerd
- Groei-eigenschappen
- Aanhanger
- GGO-status
- GMO-S1
- Details over de GGO-status
- GMO-S1: This murine inner medullary collecting duct cell line (mIMCD-3) contains an SV40 T-Antigen transgene derived from a transgenic mouse model, supporting immortalization. The construct is stably present in primary kidney-derived cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Bioveiligheidsniveau
- 2
03Kenmerken
- Morfologie
- Epitheelachtig
04Identificatiegegevens
- Bronvermelding
- mIMCD-3 (Cytion-catalogusnummer 305382)
- NCBI-belastingnummer
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_0429
05Expressie en vatbaarheid
- Virussen
- Transformant: Simian virus 40 (SV40)
06Behandeling en kweek
- Kweekmedium
- DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucose, w: 2,5 mM L-Glutamine, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Natriumpyruvaat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820400a)
- Incubatieomgeving
37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.
- Supplementen
- Vul het medium aan met 10% FBS
- Dissociatiereagens
- Accutase
- Heruitplanten
- Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
- Zaaidichtheid
- 1 tot 3 × 10⁴ cellen/cm²
- Vloeistofverversing
- 2 tot 3 keer per week
- Herstel na ontdooiing
- Na ontdooien, zaai de cellen uit op 2 tot 5 x 104 cellen/cm2 en laat de cellen minstens 24 uur herstellen van het invriesproces en zich hechten.
- Ontdooien en kweken
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie
- Onvruchtbaarheid
Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.
Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.
- Kweekmedium invriezen
- Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
- Opslagvoorwaarden
Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.
- Verzendvoorwaarden
Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.
08Donateur
- Soort / ondersoort
- Tg(SV40E)Bri/7 transgeen
- Leeftijd van de donor
- Volwassen
09Juridische en veiligheidsaspecten
- Veiligheidsmaatregelen
- Wanneer men van plan is om een cryovial in vloeibare stikstof op te slaan om later te ontdooien, is het verplicht om strenge veiligheidsmaatregelen in acht te nemen. Passende beschermende handschoenen en kleding zijn essentieel en het gebruik van een gezichtsmasker of veiligheidsbril is vereist tijdens het overbrengen van bevroren monsters naar of uit de tank met vloeibare stikstof. Dit is om het risico op letsel door mogelijke cryoviale explosies bij het verwijderen te beperken, wat kan resulteren in de projectie van scherpe fragmenten.
- Garantie
Bij Cytion staan we achter de kwaliteit en levensvatbaarheid van onze producten. We garanderen dat onze cellen levensvatbaar zijn bij het begin van de kweek gedurende 60 dagen na verzending vanuit onze faciliteiten. We verzekeren dat alle materialen voldoen aan de specificaties beschreven in het analysecertificaat en/of productblad
Raadpleeg voor volledige informatie onze <a href=""/Wie-zijn-wij/Garantie/"" hreflang=""x-default"">Garantieverklaring
- Er is een overeenkomst inzake materiaaloverdracht vereist
- Ja