Tartalomra ugrás
mIMCD-3
Szövet
Vese, belső medulláris gyűjtőcsatorna
Betegség
Normál
Szinonimák
mIMCD3, IMCD-3, IMCD3, mouse Inner Medullary Collecting Duct-3

Dokumentumok

mIMCD-3

Cell line · Termékszám 305382

The mIMCD-3 cell line is derived from the murine inner medullary collecting duct and is widely used as a model for studying renal epithelial cell biology,...

€550.00adó és szállítási költség nélkül
Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

Az mIMCD-3 sejtvonal az egér belső medulláris gyűjtőcsatornájából származik, és széles körben használják a veseepiteliális sejtek biológiájának, a vese fejlődésének és patofiziológiájának vizsgálatára szolgáló modellként. Ez az immortalizált sejtvonal a gyűjtőcsatornára jellemző tulajdonságokat mutat, ideértve a 3D-s tenyésztési rendszerekben csőszerű struktúrák kialakítására való képességet, valamint a szoros kapcsolódási fehérjék, az aquaporinok és az epiteliális markerek expresszióját. Az mIMCD-3 sejtek különösen értékesek az iontranszport, a vízszabályozás és a mechanikai stresszre adott sejtválasz mechanizmusainak feltárásában, ami a nefrológiai kutatások elengedhetetlen eszközévé teszi őket.

Az mIMCD-3 sejteket a policisztás vesebetegség (PKD) kutatásában is felhasználták a cisztaképződés molekuláris alapjainak megértése érdekében. Különösen ezt a sejtvonalat génmódosították a policisztin fehérjék (PKD1 és PKD2) szerepének vizsgálatára, amelyek kulcsszerepet játszanak az autoszomális domináns policisztás vesebetegségben (ADPKD). Például a PKD1-től mentes mIMCD-3 sejtek mechanikai stressz hatására rendellenes tubulus-tágulást mutatnak, ami utánozza a PKD-betegeknél megfigyelt cisztaképződést. Ezen felül az mIMCD-3 sejteket bevonó kísérletek kimutatták az elsődleges csillók szerepét a cAMP-jelátvitel és a mechanotranszdukció közvetítésében, amelyek kritikus folyamatok a veseepitélium működésében és a betegség patológiájában.

Ezt a sejtvonalat gyógyszerkifejlesztésben és -tesztelésben is alkalmazzák, különösen a nefrotoxicitás és a vese-specifikus terápiák összefüggésében. Az mIMCD-3 sejtek platformot biztosítanak olyan kemoterápiás szerekre, mint a ciszplatin, amelyek oxidatív stresszt és apoptózist válthatnak ki a vese sejtjeiben. Ezen felül a mIMCD-3 sejtek erőteljes növekedési jellemzői és a tenyésztési körülmények között biztosított reprodukálhatóságuk miatt alkalmazkodóképes modellként szolgálnak a vese biológiájának különböző aspektusainak vizsgálatához, valamint a vesebetegségek terápiás megközelítéseinek fejlesztéséhez.

Szövet
Vese, belső medulláris gyűjtőcsatorna
Betegség
Normál
Szinonimák
  • mIMCD3
  • IMCD-3
  • IMCD3
  • mouse Inner Medullary Collecting Duct-3

02Osztályozás

Organizmus
Egér
Szex
Nem meghatározott
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
GMO-státusz
GMO-S1
A GMO-státuszra vonatkozó részletek
GMO-S1: This murine inner medullary collecting duct cell line (mIMCD-3) contains an SV40 T-Antigen transgene derived from a transgenic mouse model, supporting immortalization. The construct is stably present in primary kidney-derived cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biológiai biztonsági szint
2

03Jellemzők

Morfológia
Epithelszerű

04Azonosítók

Hivatkozás
mIMCD-3 (Cytion katalógusszám: 305382)
NCBI adóazonosító szám
10090
Cellosaurus
CVCL_0429

05Kifejeződés és fogékonyság

Vírusok
Transzformáns: Simian virus 40 (SV40)

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glükóz, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM nátrium-piruvát, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion 820400a cikkszám)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Ültetési sűrűség
1–3 × 10⁴ sejt/cm²
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Az olvadás utáni helyreállás
Felolvasztás után helyezze a sejteket 2–5 x 104 sejt/cm2 sűrűséggel a lemezre, és hagyja, hogy a sejtek legalább 24 órán át regenerálódjanak a fagyasztási folyamat után, és tapadjanak a lemezhez.
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Faj / alfaj
Tg(SV40E)Bri/7 transzgenikus
Az adományozó életkora
Felnőtt