Prejsť na obsah
mIMCD-3
Tkanivo
Oblička, vnútorný medulárny zberný kanálik
Choroba
Normálne
Synonymá
mIMCD3, IMCD-3, IMCD3, mouse Inner Medullary Collecting Duct-3

Dokumenty

mIMCD-3

Cell line · Číslo výrobku 305382

The mIMCD-3 cell line is derived from the murine inner medullary collecting duct and is widely used as a model for studying renal epithelial cell biology,...

€550.00bez DPH a poštovného
Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunka mIMCD-3 pochádza z vnútorného medulárneho zberného kanálika myši a široko sa využíva ako model na štúdium biológie renálnych epitelových buniek, vývoja obličiek a patofyziológie. Táto imortalizovaná bunková línia vykazuje charakteristiky typické pre zberný kanálik, vrátane schopnosti vytvárať tubulárne štruktúry v 3D kultivačných systémoch a expresie proteínov tesných spojení, akvaporínov a epiteliálnych markerov. Bunky mIMCD-3 sú obzvlášť cenné pri skúmaní mechanizmov transportu iónov, regulácie vody a bunkovej reakcie na mechanické namáhanie, čo z nich robí nevyhnutný nástroj vo výskume nefrológie.

Bunky mIMCD-3 sa využívajú v štúdiách polycystickej choroby obličiek (PKD) na pochopenie molekulárneho základu tvorby cýst. Táto bunková línia bola konkrétne geneticky modifikovaná s cieľom preskúmať úlohu proteínov polycystínu (PKD1 a PKD2), ktoré zohrávajú kľúčovú úlohu pri autozomálnej dominantnej polycystickej chorobe obličiek (ADPKD). Napríklad bunky mIMCD-3 bez PKD1 vykazujú pri mechanickom namáhaní abnormálnu dilatáciu tubulov, čím napodobňujú cystogenézu pozorovanú u pacientov s PKD. Okrem toho experimenty s bunkami mIMCD-3 preukázali úlohu primárnych riasiniek pri sprostredkovaní cAMP signalizácie a mechanotransdukcie, čo sú kľúčové procesy v funkcii renálneho epitelu a patológii ochorenia.

Táto bunková línia sa tiež využíva pri vývoji a testovaní liekov, najmä v súvislosti s nefrotoxicitou a terapiami zameranými špecificky na obličky. Bunky mIMCD-3 poskytujú platformu na štúdium reakcií na chemoterapeutické látky, ako je cisplatina, ktoré môžu v obličkových bunkách vyvolať oxidačný stres a apoptózu. Okrem toho ich robustné rastové vlastnosti a reprodukovateľnosť v kultivačných podmienkach robia z buniek mIMCD-3 prispôsobivý model na skúmanie rôznych aspektov biológie obličiek a na rozvoj terapeutických prístupov pri ochoreniach obličiek.

Tkanivo
Oblička, vnútorný medulárny zberný kanálik
Choroba
Normálne
Synonymá
  • mIMCD3
  • IMCD-3
  • IMCD3
  • mouse Inner Medullary Collecting Duct-3

02Klasifikácia

Organizmus
Myš
Sex
Nešpecifikované
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Stav GMO
GMO-S1
Podrobnosti o štatúte GMO
GMO-S1: This murine inner medullary collecting duct cell line (mIMCD-3) contains an SV40 T-Antigen transgene derived from a transgenic mouse model, supporting immortalization. The construct is stably present in primary kidney-derived cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Úroveň biologickej bezpečnosti
2

03Charakteristiky

Morfológia
Epitelu podobné

04Identifikátory

Citácia
mIMCD-3 (katalógové číslo Cytion 305382)
Daňové identifikačné číslo NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_0429

05Prejav a náchylnosť

Vírusy
Transformant: Simian virus 40 (SV40)

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukózy, w: 2,5 mM L-glutamínu, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pyruvátu sodného, w: 1,2 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820400a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Hustota výsevu
1 až 3 × 10⁴ buniek/cm²
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Zotavenie po rozmrazení
Po rozmrazení naneste bunky v množstve 2 až 5 x 104 buniek/cm2 a nechajte bunky zotaviť sa z procesu zmrazenia a prilnúť najmenej 24 hodín.
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Plemeno / poddruh
Tg(SV40E)Bri/7 transgénne
Vek darcu
Dospelí