
- Tissue
- כליה, תעלת איסוף מדולרית פנימית
- Disease
- רגיל
- Synonyms
- mIMCD3, IMCD-3, IMCD3, mouse Inner Medullary Collecting Duct-3
Documents
mIMCD-3
Cell line · Product number 305382
The mIMCD-3 cell line is derived from the murine inner medullary collecting duct and is widely used as a model for studying renal epithelial cell biology,...
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
קו התאים mIMCD-3 נגזר מהצינור האוסף הפנימי של מח העצם בעכבר, והוא נמצא בשימוש נרחב כמודל לחקר הביולוגיה של תאי האפיתל הכלייתיים, התפתחות הכליה והפתופיזיולוגיה שלה. קו תאים בלתי-מתים זה מפגין מאפיינים האופייניים לצינור האיסוף, לרבות היכולת ליצור מבנים צינוריים במערכות תרבית תלת-ממדיות וביטוי של חלבוני חיבור הדוק, אקוופורינים וסמנים אפיתליאליים. תאי mIMCD-3 חשובים במיוחד לחקר מנגנוני הובלת יונים, ויסות המים ותגובת התאים ללחץ מכני, מה שהופך אותם לכלי חיוני במחקר הנפרולוגי.
תאי mIMCD-3 שימשו במחקרים על מחלת הכליות הפוליציסטית (PKD) כדי להבין את הבסיס המולקולרי של היווצרות הציסטות. בפרט, קו תאים זה עבר שינוי גנטי כדי לחקור את תפקידן של חלבוני הפוליציסטין (PKD1 ו-PKD2), המהווים גורמים מרכזיים במחלת הכליות הפוליציסטית האוטוזומית הדומיננטית (ADPKD). לדוגמה, תאי mIMCD-3 חסרי PKD1 מפגינים התרחבות חריגה של הצינורות תחת לחץ מכני, המדמה את תהליך היווצרות הציסטות הנצפה בחולי PKD. בנוסף, ניסויים בתאי mIMCD-3 הדגימו את תפקידן של הריסים הראשוניים בתיווך איתות cAMP והעברת אותות מכניים – תהליכים קריטיים בתפקוד האפיתל הכלייתי ובפתולוגיה של המחלה.
קו תאים זה משמש גם לגילוי ולבדיקת תרופות, במיוחד בהקשר של נפרוטוקסיות וטיפולים ספציפיים לכליות. תאי mIMCD-3 מספקים פלטפורמה לחקר התגובות לחומרים כימותרפיים כמו ציספלטין, העלולים לגרום ללחץ חמצוני ואפופטוזיס בתאי הכליה. יתרה מכך, מאפייני הצמיחה החזקים שלהם והיכולת לשחזר אותם בתנאי תרבית הופכים את תאי mIMCD-3 למודל גמיש לחקר היבטים מגוונים בביולוגיה של הכליות ולקידום גישות טיפוליות במחלות כליות.
- Tissue
- כליה, תעלת איסוף מדולרית פנימית
- Disease
- רגיל
- Synonyms
- mIMCD3
- IMCD-3
- IMCD3
- mouse Inner Medullary Collecting Duct-3
02Classification
- Organism
- Mouse
- Sex
- Unspecified
- Growth properties
- Adherent
- GMO status
- GMO-S1
- GMO status details
- GMO-S1: This murine inner medullary collecting duct cell line (mIMCD-3) contains an SV40 T-Antigen transgene derived from a transgenic mouse model, supporting immortalization. The construct is stably present in primary kidney-derived cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biosafety level
- 2
03Characteristics
- Morphology
- דמוי אפיתל
04Identifiers
- Citation
- mIMCD-3 (מספר קטלוגי של Cytion: 305382)
- NCBI TaxID
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_0429
05Expression and susceptibility
- Viruses
- טרנספורמנט: נגיף סימיאן 40 (SV40)
06Handling and culture
- Culture medium
- DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 g/L גלוקוז, w: 2.5 mM L-גלוטמין, w: 15 mM HEPES, w: 0.5 mM נתרן פירובט, w: 1.2 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי Cytion 820400a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
- הוסף לתווך 10% FBS
- Dissociation reagent
- אקוטאז
- Subculturing
- הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
- Seeding density
- 1 עד 3 × 10⁴ תאים לסמ"ר
- Fluid renewal
- 2 עד 3 פעמים בשבוע
- Post-thaw recovery
- לאחר ההפשרה, צלחו את התאים ב-2 עד 5 x 104 תאים/סמ"ר והניחו לתאים להתאושש מתהליך ההקפאה ולהידבק למשך 24 שעות לפחות.
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.
כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
08Donor
- Breed / subspecies
- Tg(SV40E)Bri/7 טרנסגני
- Donor age
- מבוגר
09Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Material Transfer Agreement required
- Yes