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mIMCD-3
Tissue
Rein, canal collecteur médullaire interne
Disease
Normal
Synonyms
mIMCD3, IMCD-3, IMCD3, mouse Inner Medullary Collecting Duct-3

Documents

mIMCD-3

Cell line · Product number 305382

The mIMCD-3 cell line is derived from the murine inner medullary collecting duct and is widely used as a model for studying renal epithelial cell biology,...

US$540.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

La lignée cellulaire mIMCD-3 est dérivée du canal collecteur médullaire interne murin et est largement utilisée comme modèle pour l’étude de la biologie des cellules épithéliales rénales, du développement rénal et de la physiopathologie. Cette lignée cellulaire immortalisée présente les caractéristiques typiques du canal collecteur, notamment la capacité de former des structures tubulaires dans des systèmes de culture en 3D ainsi que l’expression de protéines des jonctions serrées, d’aquaporines et de marqueurs épithéliaux. Les cellules mIMCD-3 sont particulièrement utiles pour explorer les mécanismes du transport ionique, de la régulation hydrique et de la réponse cellulaire au stress mécanique, ce qui en fait un outil essentiel dans la recherche en néphrologie.

Les cellules mIMCD-3 ont été utilisées dans des études sur la polykystose rénale (PKD) afin de comprendre les mécanismes moléculaires à l’origine de la formation des kystes. Plus précisément, cette lignée cellulaire a été génétiquement modifiée afin d’étudier le rôle des protéines polycystines (PKD1 et PKD2), qui jouent un rôle clé dans la polykystose rénale autosomique dominante (PKDAD). Par exemple, les cellules mIMCD-3 dépourvues de PKD1 présentent une dilatation anormale des tubules sous contrainte mécanique, reproduisant ainsi la cystogenèse observée chez les patients atteints de PKD. De plus, des expériences menées sur les cellules mIMCD-3 ont démontré le rôle des cils primaires dans la médiation de la signalisation de l’AMPc et de la mécanotransduction, processus essentiels à la fonction épithéliale rénale et à la pathologie de la maladie.

Cette lignée cellulaire est également utilisée dans la découverte et l’évaluation de médicaments, notamment dans le contexte de la néphrotoxicité et des traitements spécifiques au rein. Les cellules mIMCD-3 constituent une plateforme permettant d’étudier les réponses à des agents chimiothérapeutiques comme le cisplatine, qui peuvent induire un stress oxydatif et l’apoptose dans les cellules rénales. De plus, leurs caractéristiques de croissance robustes et leur reproductibilité en culture font des cellules mIMCD-3 un modèle polyvalent pour l’étude de divers aspects de la biologie rénale et pour faire progresser les approches thérapeutiques dans le domaine des maladies rénales.

Tissue
Rein, canal collecteur médullaire interne
Disease
Normal
Synonyms
  • mIMCD3
  • IMCD-3
  • IMCD3
  • mouse Inner Medullary Collecting Duct-3

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Unspecified
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This murine inner medullary collecting duct cell line (mIMCD-3) contains an SV40 T-Antigen transgene derived from a transgenic mouse model, supporting immortalization. The construct is stably present in primary kidney-derived cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
2

03Characteristics

Morphology
De type épithélial

04Identifiers

Citation
mIMCD-3 (numéro de catalogue Cytion 305382)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_0429

05Expression and susceptibility

Viruses
Transformant : virus simien 40 (SV40)

06Handling and culture

Culture medium
DMEM : F12 de Ham (1:1), p/v : 3,1 g/L de glucose, p/v : 2,5 mM de L-glutamine, p/v : 15 mM d’HEPES, 0,5 mM de pyruvate de sodium, 1,2 g/L de NaHCO₃ (référence Cytion 820400a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée.

Supplements
Ajouter 10 % de FBS au milieu de culture
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Retirez l’ancien milieu des cellules adhérentes et lavez-les avec du PBS sans calcium ni magnésium. Pour les flacons T25, utilisez 3 à 5 ml de PBS, et pour les flacons T75, utilisez 5 à 10 ml. Ensuite, recouvrez complètement les cellules d’Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laissez les cellules incuber à température ambiante pendant 8 à 10 minutes afin de les détacher. Après l’incubation, mélangez délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifugez à 300 x g pendant 3 minutes. Éliminez le surnageant, remettez les cellules en suspension dans du milieu frais, puis transférez-les dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Seeding density
de 1 à 3 × 10⁴ cellules/cm²
Fluid renewal
2 à 3 fois par semaine
Post-thaw recovery
Après décongélation, ensemencer les cellules à une densité de 2 à 5 × 10⁴ cellules/cm² et laisser les cellules se remettre du processus de congélation et adhérer pendant au moins 24 heures.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Freeze medium
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (contenant du sérum fœtal bovin) + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation, ou du CM-1 (référence Cytion 800100), qui contient des osmoprotecteurs et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryoconservation.
Storage conditions

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Shipping conditions

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donor

Breed / subspecies
Transgénique Tg(SV40E)Bri/7
Donor age
Adulte