Přejít na obsah
mIMCD-3
Tkáň
Ledvina, vnitřní medulární sběrný kanálek
Nemoc
Normální
Synonyma
mIMCD3, IMCD-3, IMCD3, mouse Inner Medullary Collecting Duct-3

Dokumenty

mIMCD-3

Cell line · Číslo výrobku 305382

The mIMCD-3 cell line is derived from the murine inner medullary collecting duct and is widely used as a model for studying renal epithelial cell biology,...

€550.00bez DPH a poštovného
Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie mIMCD-3 pochází z vnitřního medulárního sběrného kanálku myši a je široce využívána jako model pro studium biologie renálních epiteliálních buněk, vývoje ledvin a patofyziologie. Tato imortalizovaná buněčná linie vykazuje charakteristické vlastnosti sběrného kanálku, včetně schopnosti tvořit tubulární struktury v 3D kultivačních systémech a exprese proteinů těsných spojů, akvaporinů a epiteliálních markerů. Buňky mIMCD-3 jsou obzvláště cenné pro zkoumání mechanismů transportu iontů, regulace vody a buněčné reakce na mechanické namáhání, což z nich činí nepostradatelný nástroj v nefrologickém výzkumu.

Buňky mIMCD-3 byly využity ve studiích polycystické choroby ledvin (PKD) k pochopení molekulárních základů tvorby cyst. Tato buněčná linie byla zejména geneticky modifikována za účelem zkoumání role polycystinových proteinů (PKD1 a PKD2), které hrají klíčovou roli v autosomálně dominantní polycystické chorobě ledvin (ADPKD). Například buňky mIMCD-3 bez PKD1 vykazují při mechanickém namáhání abnormální dilataci tubulů, což napodobuje cystogenezi pozorovanou u pacientů s PKD. Kromě toho experimenty s buňkami mIMCD-3 prokázaly úlohu primárních řasinek při zprostředkování cAMP signalizace a mechanotransdukce, což jsou kritické procesy pro funkci renálního epitelu a patologii onemocnění.

Tato buněčná linie se rovněž využívá při vývoji a testování léčiv, zejména v souvislosti s nefrotoxicitou a terapiemi zaměřenými specificky na ledviny. Buňky mIMCD-3 poskytují platformu pro studium reakcí na chemoterapeutická činidla, jako je cisplatina, která mohou v renálních buňkách vyvolat oxidační stres a apoptózu. Kromě toho díky svým robustním růstovým vlastnostem a reprodukovatelnosti v kultivačních podmínkách představují buňky mIMCD-3 přizpůsobivý model pro zkoumání různých aspektů biologie ledvin a pro rozvoj terapeutických přístupů k ledvinovým onemocněním.

Tkáň
Ledvina, vnitřní medulární sběrný kanálek
Nemoc
Normální
Synonyma
  • mIMCD3
  • IMCD-3
  • IMCD3
  • mouse Inner Medullary Collecting Duct-3

02Klasifikace

Organismus
Myš
Sex
Nespecifikováno
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Stav GMO
GMO-S1
Podrobnosti o statusu GMO
GMO-S1: This murine inner medullary collecting duct cell line (mIMCD-3) contains an SV40 T-Antigen transgene derived from a transgenic mouse model, supporting immortalization. The construct is stably present in primary kidney-derived cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Úroveň biologické bezpečnosti
2

03Charakteristika

Morfologie
Epitelu podobné

04Identifikátory

Citace
mIMCD-3 (katalogové číslo Cytion 305382)
Daňové identifikační číslo NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_0429

05Exprese a náchylnost

Viry
Transformant: Simian virus 40 (SV40)

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukózy, w: 2,5 mM L-Glutaminu, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pyruvátu sodného, w: 1,2 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820400a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Hustota výsevu
1 až 3 × 10⁴ buněk/cm²
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Zotavení po rozmrazení
Po rozmrazení naneste buňky v množství 2 až 5 x 104 buněk/cm2 a nechte buňky zotavit se z procesu zmrazení a přilnout po dobu nejméně 24 hodin.
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Plemeno / poddruh
Tg(SV40E)Bri/7 transgenní
Věk dárce
Dospělí