
- Tissue
- Riñón, conducto colector medular interno
- Disease
- Normal
- Synonyms
- mIMCD3, IMCD-3, IMCD3, mouse Inner Medullary Collecting Duct-3
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mIMCD-3
Cell line · Product number 305382
The mIMCD-3 cell line is derived from the murine inner medullary collecting duct and is widely used as a model for studying renal epithelial cell biology,...
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01General information
- Description
La línea celular mIMCD-3 se deriva del conducto colector medular interno murino y se utiliza ampliamente como modelo para estudiar la biología de las células epiteliales renales, el desarrollo del riñón y la fisiopatología. Esta línea celular inmortalizada presenta características típicas del conducto colector, entre ellas la capacidad de formar estructuras tubulares en sistemas de cultivo tridimensionales y la expresión de proteínas de uniones estrechas, acuaporinas y marcadores epiteliales. Las células mIMCD-3 son particularmente valiosas para explorar los mecanismos de transporte de iones, la regulación del agua y la respuesta celular al estrés mecánico, lo que las convierte en una herramienta esencial en la investigación nefrológica.
Las células mIMCD-3 se han utilizado en estudios de la enfermedad renal poliquística (PKD) para comprender la base molecular de la formación de quistes. En particular, esta línea celular ha sido modificada genéticamente para investigar el papel de las proteínas policistinas (PKD1 y PKD2), que son elementos clave en la enfermedad renal poliquística autosómica dominante (ADPKD). Por ejemplo, las células mIMCD-3 que carecen de PKD1 presentan una dilatación anómala de los túbulos bajo estrés mecánico, lo que imita la cistogénesis observada en pacientes con PKD. Además, los experimentos con células mIMCD-3 han demostrado el papel de los cilios primarios en la mediación de la señalización del AMPc y la mecanotransducción, procesos críticos en la función epitelial renal y la patología de la enfermedad.
Esta línea celular también se emplea en el descubrimiento y la prueba de fármacos, particularmente en el contexto de la nefrotoxicidad y las terapias específicas para el riñón. Las células mIMCD-3 proporcionan una plataforma para estudiar las respuestas a agentes quimioterapéuticos como el cisplatino, que pueden inducir estrés oxidativo y apoptosis en las células renales. Además, sus sólidas características de crecimiento y su reproducibilidad en condiciones de cultivo hacen de las células mIMCD-3 un modelo adaptable para investigar diversos aspectos de la biología renal y para avanzar en los enfoques terapéuticos de las enfermedades renales.
- Tissue
- Riñón, conducto colector medular interno
- Disease
- Normal
- Synonyms
- mIMCD3
- IMCD-3
- IMCD3
- mouse Inner Medullary Collecting Duct-3
02Classification
- Organism
- Mouse
- Sex
- Unspecified
- Growth properties
- Adherent
- GMO status
- GMO-S1
- GMO status details
- GMO-S1: This murine inner medullary collecting duct cell line (mIMCD-3) contains an SV40 T-Antigen transgene derived from a transgenic mouse model, supporting immortalization. The construct is stably present in primary kidney-derived cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biosafety level
- 2
03Characteristics
- Morphology
- De tipo epitelial
04Identifiers
- Citation
- mIMCD-3 (número de catálogo de Cytion 305382)
- NCBI TaxID
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_0429
05Expression and susceptibility
- Viruses
- Transformante: Virus simio 40 (SV40)
06Handling and culture
- Culture medium
- DMEM:F12 de Ham (1:1), p/v: 3,1 g/L de glucosa, p/v: 2,5 mM de L-glutamina, p/v: 15 mM de HEPES, p: 0,5 mM de piruvato de sodio, p: 1,2 g/L de NaHCO₃ (número de artículo de Cytion 820400a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.
- Supplements
- Añade al medio un 10 % de FBS
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- Retira el medio usado de las células adheridas y lávalas con PBS sin calcio ni magnesio. Para los frascos T25, usa de 3 a 5 ml de PBS, y para los frascos T75, usa de 5 a 10 ml. Luego, cubra las células por completo con Accutase, utilizando de 1 a 2 ml para los frascos T25 y 2,5 ml para los frascos T75. Deje que las células se incuben a temperatura ambiente durante 8 a 10 minutos para desprenderse. Después de la incubación, mezcla suavemente las células con 10 ml de medio para resuspendarlas; luego, centrifuga a 300xg durante 3 minutos. Deseche el sobrenadante, resuspenda las células en medio fresco y transfiéralas a frascos nuevos que ya contengan medio fresco.
- Seeding density
- De 1 a 3 × 10⁴ células/cm²
- Fluid renewal
- De 2 a 3 veces por semana
- Post-thaw recovery
- Después de descongelarlas, siembre las células a una densidad de 2 a 5 x 10⁴ células/cm² y deje que se recuperen del proceso de congelación y se adhieran durante al menos 24 horas.
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.
Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.
- Freeze medium
- Como medio de criopreservación, utilizamos un medio de crecimiento completo (que incluye FBS) + 10 % de DMSO para garantizar una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo de Cytion 800100), que incluye osmoprotectores y estabilizadores metabólicos optimizados para mejorar la recuperación y reducir el estrés inducido por la criopreservación.
- Storage conditions
Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.
- Shipping conditions
Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.
08Donor
- Breed / subspecies
- Transgénico Tg(SV40E)Bri/7
- Donor age
- Adulto
09Legal and safety
- Safety precautions
- Cuando se planea almacenar un criovial en nitrógeno líquido para su descongelación futura, es obligatorio cumplir con estrictas medidas de seguridad. Es esencial contar con guantes y ropa de protección adecuados, y se requiere el uso de una mascarilla o lentes de seguridad durante la transferencia de muestras congeladas hacia o desde el tanque de nitrógeno líquido. Esto tiene como objetivo mitigar el riesgo de lesiones por posibles explosiones de los criotubos al retirarlos, lo que puede provocar la proyección de fragmentos afilados.
- Warranty
En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.
Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.
- Material Transfer Agreement required
- Yes