
- Tecido
- Rim, ducto coletor medular interno
- Doença
- Normal
- Sinónimos
- mIMCD3, IMCD-3, IMCD3, mouse Inner Medullary Collecting Duct-3
Documentos
mIMCD-3
Cell line · Número do produto 305382
The mIMCD-3 cell line is derived from the murine inner medullary collecting duct and is widely used as a model for studying renal epithelial cell biology,...
Personalização / Recomendações
- mIMCD-3Cell line€550.00
Recomendado (lote mais recente)
01Informações gerais
- Descrição
A linha celular mIMCD-3 é derivada do ducto coletor medular interno murino e é amplamente utilizada como modelo para o estudo da biologia das células epiteliais renais, do desenvolvimento renal e da fisiopatologia. Esta linha celular imortalizada apresenta características típicas do ducto coletor, incluindo a capacidade de formar estruturas tubulares em sistemas de cultura 3D e a expressão de proteínas de junções apertadas, aquaporinas e marcadores epiteliais. As células mIMCD-3 são particularmente valiosas para explorar os mecanismos de transporte iônico, regulação hídrica e resposta celular ao estresse mecânico, tornando-as uma ferramenta essencial na investigação nefrológica.
As células mIMCD-3 têm sido utilizadas em estudos sobre a doença renal policística (PKD) para compreender a base molecular da formação de quistos. Em particular, esta linha celular foi geneticamente modificada para investigar o papel das proteínas policistinas (PKD1 e PKD2), que desempenham um papel fundamental na doença renal policística autossómica dominante (ADPKD). Por exemplo, as células mIMCD-3 sem PKD1 apresentam dilatação anómala dos túbulos sob stress mecânico, imitando a cistogénese observada em doentes com PKD. Além disso, experiências envolvendo células mIMCD-3 demonstraram o papel dos cílios primários na mediação da sinalização do AMPc e da mecanotransdução, processos críticos na função epitelial renal e na patologia da doença.
Esta linha celular é também utilizada na descoberta e teste de fármacos, particularmente no contexto da nefrotoxicidade e de terapias específicas para os rins. As células mIMCD-3 constituem uma plataforma para o estudo das respostas a agentes quimioterapêuticos como a cisplatina, que podem induzir stress oxidativo e apoptose nas células renais. Além disso, as suas características de crescimento robusto e a sua reprodutibilidade em condições de cultura tornam as células mIMCD-3 um modelo adaptável para investigar diversos aspetos da biologia renal e para o avanço de abordagens terapêuticas nas doenças renais.
- Tecido
- Rim, ducto coletor medular interno
- Doença
- Normal
- Sinónimos
- mIMCD3
- IMCD-3
- IMCD3
- mouse Inner Medullary Collecting Duct-3
02Classificação
- Organismo
- Rato
- Sexo
- Não especificado
- Propriedades de crescimento
- Aderente
- Estatuto em matéria de OGM
- GMO-S1
- Detalhes sobre o estatuto dos OGM
- GMO-S1: This murine inner medullary collecting duct cell line (mIMCD-3) contains an SV40 T-Antigen transgene derived from a transgenic mouse model, supporting immortalization. The construct is stably present in primary kidney-derived cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Nível de biossegurança
- 2
03Características
- Morfologia
- De tipo epitelial
04Identificadores
- Referência
- mIMCD-3 (número de catálogo da Cytion 305382)
- Número de identificação fiscal do NCBI
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_0429
05Expressão e suscetibilidade
- Vírus
- Transformante: Vírus símio 40 (SV40)
06Manuseamento e cultura
- Meio de cultura
- DMEM:Ham's F12 (1:1), com: 3,1 g/L de glucose, com: 2,5 mM de L-Glutamina, com: 15 mM de HEPES, com: 0,5 mM de piruvato de sódio, com: 1,2 g/L de NaHCO3 (número de artigo Cytion 820400a)
- Atmosfera de incubação
37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.
- Suplementos
- Completar o meio com 10% de FBS
- Reagente de dissociação
- Accutase
- Subcultura
- Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
- Densidade de sementeira
- 1 a 3 x 10⁴ células/cm²
- Renovação de fluidos
- 2 a 3 vezes por semana
- Recuperação após o descongelamento
- Após o descongelamento, coloque as células em placas a uma densidade de 2 a 5 x 104 células/cm2 e deixe-as recuperar do processo de congelamento e aderir durante pelo menos 24 horas.
- Descongelamento e cultura
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Controlo de qualidade e criopreservação
- Esterilidade
A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.
Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.
- Meio de congelação
- Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
- Condições de armazenamento
Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.
- Condições de envio
As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.
08Doador
- Raça / subespécie
- Tg(SV40E)Bri/7 transgénico
- Idade do dador
- Adulto
09Aspectos legais e de segurança
- Precauções de segurança
- Quando se planeia armazenar um criovial em nitrogénio líquido para descongelação futura, é obrigatório aderir a medidas de segurança rigorosas. Luvas e vestuário de proteção adequados são essenciais, e a utilização de uma máscara facial ou óculos de segurança é necessária durante a transferência de amostras congeladas para ou do tanque de nitrogénio líquido. Isto destina-se a mitigar o risco de ferimentos provocados por potenciais explosões de crioviais após a remoção, que podem resultar na projeção de fragmentos afiados.
- Garantia
Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto
Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia
- É necessário um Acordo de Transferência de Material
- Sim