Preskoči na vsebino
mIMCD-3
Tkivo
Ledvica, notranji medularni zbiralni kanal
Bolezen
Normalno
Sinonimi
mIMCD3, IMCD-3, IMCD3, mouse Inner Medullary Collecting Duct-3

Dokumenti

mIMCD-3

Cell line · Številka izdelka 305382

The mIMCD-3 cell line is derived from the murine inner medullary collecting duct and is widely used as a model for studying renal epithelial cell biology,...

€550.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celična linija mIMCD-3 izhaja iz notranjega medularnega zbiralnega kanala miši in se pogosto uporablja kot model za preučevanje biologije ledvičnih epitelnih celic, razvoja ledvic in patofiziologije. Ta imortalizirana celična linija kaže značilnosti, tipične za zbiralni kanal, vključno z zmožnostjo tvorjenja tubularnih struktur v 3D-kulturnih sistemih ter izražanjem proteinov tesnih spojev, akvaporinov in epitelijskih markerjev. Celice mIMCD-3 so še posebej dragocene za raziskovanje mehanizmov transporta ionov, regulacije vode in celičnega odziva na mehansko obremenitev, kar jih naredi za nepogrešljivo orodje v nefroloških raziskavah.

Celice mIMCD-3 so bile uporabljene v študijah polikistične bolezni ledvic (PKD) za razumevanje molekularne osnove nastajanja cist. Ta celična linija je bila zlasti genetsko spremenjena za preučevanje vloge polikistinov (PKD1 in PKD2), ki imajo ključno vlogo pri avtosomno dominantni polikistični bolezni ledvic (ADPKD). Na primer, celice mIMCD-3 brez PKD1 pod mehanskim stresom kažejo nenormalno razširitev tubulov, kar posnema nastajanje cist, opazovano pri bolnikih s PKD. Poleg tega so poskusi s celicami mIMCD-3 pokazali vlogo primarnih resničk pri posredovanju signalizacije cAMP in mehanotransdukcije, ki sta ključna procesa v delovanju ledvičnega epitelija in patologiji bolezni.

Ta celična linija se uporablja tudi pri odkrivanju in testiranju zdravil, zlasti v okviru nefrotoksičnosti in terapij, specifičnih za ledvice. Celice mIMCD-3 zagotavljajo platformo za preučevanje odzivov na kemoterapevtska sredstva, kot je cisplatin, ki lahko v ledvičnih celicah povzročijo oksidativni stres in apoptozo. Poleg tega njihove močne rastne lastnosti in reproduktivnost v kultivnih pogojih naredijo celice mIMCD-3 prilagodljiv model za raziskovanje različnih vidikov biologije ledvic ter za napredek terapevtskih pristopov pri ledvičnih boleznih.

Tkivo
Ledvica, notranji medularni zbiralni kanal
Bolezen
Normalno
Sinonimi
  • mIMCD3
  • IMCD-3
  • IMCD3
  • mouse Inner Medullary Collecting Duct-3

02Razvrstitev

Organizem
Miška
Seks
Ni navedeno
Lastnosti rasti
Pripadnik
Status GSO
GMO-S1
Podrobnosti o statusu GSO
GMO-S1: This murine inner medullary collecting duct cell line (mIMCD-3) contains an SV40 T-Antigen transgene derived from a transgenic mouse model, supporting immortalization. The construct is stably present in primary kidney-derived cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Stopnja biološke varnosti
2

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijam podobni

04Identifikatorji

Navajanje vira
mIMCD-3 (kataloška številka Cytion 305382)
Davčna identifikacijska številka NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_0429

05Izražanje in dovzetnost

Virusi
Transformant: Simijanski virus 40 (SV40)

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukoze, w: 2,5 mM L-glutamina, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natrijevega piruvata, w: 1,2 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820400a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Gostota setve
1 do 3 x 10⁴ celic/cm²
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Obnova po odtaljevanju
Po odmrzovanju celice razporedite na ploščo v gostoti 2 do 5 x 104 celic/cm2 in jim pustite, da si opomorejo od zamrzovanja in se prilepijo na ploščo, vsaj 24 ur.
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Pasma / podvrsta
Tg(SV40E)Bri/7 transgeni
Starost darovalca
Odrasli