
- Kudos
- Munuainen, sisäisen ytimen keräyskanava
- Sairaus
- Normaali
- Synonyymit
- mIMCD3, IMCD-3, IMCD3, mouse Inner Medullary Collecting Duct-3
Asiakirjat
mIMCD-3
Cell line · Tuotenumero 305382
The mIMCD-3 cell line is derived from the murine inner medullary collecting duct and is widely used as a model for studying renal epithelial cell biology,...
Räätälöinti / Suositukset
- mIMCD-3Cell line€550.00
Suositeltava (tuorein erä)
01Yleistä tietoa
- Kuvaus
mIMCD-3-solulinja on peräisin hiiren munuaisen ydinosan sisäisestä keräyskanavasta, ja sitä käytetään laajalti mallina munuaisten epiteelisolujen biologian, munuaisten kehityksen ja patofysiologian tutkimuksessa. Tämä ikuistettu solulinja osoittaa keräyskanavalle tyypillisiä ominaisuuksia, mukaan lukien kyvyn muodostaa putkimaisia rakenteita 3D-viljelyjärjestelmissä sekä tiiviiden liitoskohtien proteiinien, akvaporinien ja epiteelimarkkerien ilmentymisen. mIMCD-3-solut ovat erityisen arvokkaita ionikuljetuksen, veden säätelyn ja solujen reaktion mekaaniseen rasitukseen liittyvien mekanismien tutkimisessa, mikä tekee niistä välttämättömän työkalun nefrologian tutkimuksessa.
mIMCD-3-soluja on käytetty polykystisen munuaissairauden (PKD) tutkimuksissa kystien muodostumisen molekyylitason mekanismien selvittämiseksi. Erityisesti tätä solulinjaa on geneettisesti muunnettu autosoomaalisen dominantin polykystisen munuaissairauden (ADPKD) avaintekijöinä toimivien polykystiiniproteiinien (PKD1 ja PKD2) roolin tutkimiseksi. Esimerkiksi PKD1-proteiinista puuttuvissa mIMCD-3-soluissa esiintyy epänormaalia tubulusten laajenemista mekaanisen rasituksen alaisena, mikä jäljittelee PKD-potilailla havaittua kystogeneesiä. Lisäksi mIMCD-3-soluilla tehdyt kokeet ovat osoittaneet primaaristen silioiden roolin cAMP-signaloinnin ja mekanotransduktion välittäjinä, jotka ovat kriittisiä prosesseja munuaisten epiteelisolujen toiminnassa ja taudin patologiassa.
Tätä solulinjaa käytetään myös lääkekehityksessä ja -testauksessa, erityisesti nefrotoksisuuden ja munuaiskohtaisten hoitojen yhteydessä. mIMCD-3-solut tarjoavat alustan, jolla voidaan tutkia vasteita kemoterapeuttisiin aineisiin, kuten sisplatiiniin, joka voi aiheuttaa oksidatiivista stressiä ja apoptoosia munuaissoluissa. Lisäksi niiden vahvat kasvun ominaisuudet ja toistettavuus viljelyolosuhteissa tekevät mIMCD-3-soluista joustavan mallin munuaisten biologian eri näkökohtien tutkimiseen ja munuaissairauksien hoitomenetelmien kehittämiseen.
- Kudos
- Munuainen, sisäisen ytimen keräyskanava
- Sairaus
- Normaali
- Synonyymit
- mIMCD3
- IMCD-3
- IMCD3
- mouse Inner Medullary Collecting Duct-3
02Luokittelu
- Organismi
- Hiiri
- Sukupuoli
- Määrittelemätön
- Kasvuominaisuudet
- Kiinnittynyt
- GMO-status
- GMO-S1
- GMO-statuksen tiedot
- GMO-S1: This murine inner medullary collecting duct cell line (mIMCD-3) contains an SV40 T-Antigen transgene derived from a transgenic mouse model, supporting immortalization. The construct is stably present in primary kidney-derived cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Bioturvallisuustaso
- 2
03Ominaisuudet
- Morfologia
- Epiteelin kaltainen
04Tunnisteet
- Lähdeviite
- mIMCD-3 (Cytionin tuotenumero 305382)
- NCBI-verotunnus
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_0429
05Ilmentyminen ja alttius
- Virukset
- Transformantti: Simian virus 40 (SV40)
06Käsittely ja viljely
- Viljelyalusta
- DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukoosia, w: 2,5 mM L-glutamiinia, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvaattia, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820400a)
- Inkubaatioilma
37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.
- Ravintolisät
- Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
- Dissosiaatioreagenssi
- Accutase
- Soluviljely
- Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
- Kylvötiheys
- 1–3 × 10⁴ solua/cm²
- Nesteen uusiminen
- 2-3 kertaa viikossa
- Sulamisen jälkeinen palautuminen
- Sulattamisen jälkeen levitä solut 2–5 x 104 solua/cm2 ja anna solujen toipua pakastusprosessista ja kiinnittyä vähintään 24 tunnin ajan.
- Sulatus ja viljely
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Laadunvalvonta ja kryosäilytys
- Hedelmättömyys
Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.
Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.
- Jäädytysaine
- Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
- Säilytysolosuhteet
Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.
- Toimitusehdot
Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.
08Lahjoittaja
- Rotua / alalajia
- Tg(SV40E)Bri/7 siirtogeeninen
- Luovuttajan ikä
- Aikuiset
09Oikeudelliset ja turvallisuusasiat
- Turvallisuusohjeet
- Kun suunnitellaan kryoputken säilyttämistä nestemäisessä typessä sulatusta varten, on noudatettava tiukkoja turvatoimenpiteitä. Asianmukaiset suojakäsineet ja -vaatteet ovat välttämättömiä, ja kasvonaamarin tai suojalasien käyttö on välttämätöntä siirrettäessä jäädytettyjä näytteitä nestetyppisäiliöön tai siitä pois. Tällä pyritään pienentämään loukkaantumisriskiä, joka aiheutuu kryoputkien mahdollisista räjähdyksistä, jotka voivat aiheuttaa terävien sirpaleiden sinkoutumisen.
- Takuu
Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia
Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa
- Aineiden siirtoa koskeva sopimus vaaditaan
- Kyllä