Siirry sisältöön
mIMCD-3
Kudos
Munuainen, sisäisen ytimen keräyskanava
Sairaus
Normaali
Synonyymit
mIMCD3, IMCD-3, IMCD3, mouse Inner Medullary Collecting Duct-3

Asiakirjat

mIMCD-3

Cell line · Tuotenumero 305382

The mIMCD-3 cell line is derived from the murine inner medullary collecting duct and is widely used as a model for studying renal epithelial cell biology,...

€550.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

mIMCD-3-solulinja on peräisin hiiren munuaisen ydinosan sisäisestä keräyskanavasta, ja sitä käytetään laajalti mallina munuaisten epiteelisolujen biologian, munuaisten kehityksen ja patofysiologian tutkimuksessa. Tämä ikuistettu solulinja osoittaa keräyskanavalle tyypillisiä ominaisuuksia, mukaan lukien kyvyn muodostaa putkimaisia rakenteita 3D-viljelyjärjestelmissä sekä tiiviiden liitoskohtien proteiinien, akvaporinien ja epiteelimarkkerien ilmentymisen. mIMCD-3-solut ovat erityisen arvokkaita ionikuljetuksen, veden säätelyn ja solujen reaktion mekaaniseen rasitukseen liittyvien mekanismien tutkimisessa, mikä tekee niistä välttämättömän työkalun nefrologian tutkimuksessa.

mIMCD-3-soluja on käytetty polykystisen munuaissairauden (PKD) tutkimuksissa kystien muodostumisen molekyylitason mekanismien selvittämiseksi. Erityisesti tätä solulinjaa on geneettisesti muunnettu autosoomaalisen dominantin polykystisen munuaissairauden (ADPKD) avaintekijöinä toimivien polykystiiniproteiinien (PKD1 ja PKD2) roolin tutkimiseksi. Esimerkiksi PKD1-proteiinista puuttuvissa mIMCD-3-soluissa esiintyy epänormaalia tubulusten laajenemista mekaanisen rasituksen alaisena, mikä jäljittelee PKD-potilailla havaittua kystogeneesiä. Lisäksi mIMCD-3-soluilla tehdyt kokeet ovat osoittaneet primaaristen silioiden roolin cAMP-signaloinnin ja mekanotransduktion välittäjinä, jotka ovat kriittisiä prosesseja munuaisten epiteelisolujen toiminnassa ja taudin patologiassa.

Tätä solulinjaa käytetään myös lääkekehityksessä ja -testauksessa, erityisesti nefrotoksisuuden ja munuaiskohtaisten hoitojen yhteydessä. mIMCD-3-solut tarjoavat alustan, jolla voidaan tutkia vasteita kemoterapeuttisiin aineisiin, kuten sisplatiiniin, joka voi aiheuttaa oksidatiivista stressiä ja apoptoosia munuaissoluissa. Lisäksi niiden vahvat kasvun ominaisuudet ja toistettavuus viljelyolosuhteissa tekevät mIMCD-3-soluista joustavan mallin munuaisten biologian eri näkökohtien tutkimiseen ja munuaissairauksien hoitomenetelmien kehittämiseen.

Kudos
Munuainen, sisäisen ytimen keräyskanava
Sairaus
Normaali
Synonyymit
  • mIMCD3
  • IMCD-3
  • IMCD3
  • mouse Inner Medullary Collecting Duct-3

02Luokittelu

Organismi
Hiiri
Sukupuoli
Määrittelemätön
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
GMO-status
GMO-S1
GMO-statuksen tiedot
GMO-S1: This murine inner medullary collecting duct cell line (mIMCD-3) contains an SV40 T-Antigen transgene derived from a transgenic mouse model, supporting immortalization. The construct is stably present in primary kidney-derived cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioturvallisuustaso
2

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteelin kaltainen

04Tunnisteet

Lähdeviite
mIMCD-3 (Cytionin tuotenumero 305382)
NCBI-verotunnus
10090
Cellosaurus
CVCL_0429

05Ilmentyminen ja alttius

Virukset
Transformantti: Simian virus 40 (SV40)

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukoosia, w: 2,5 mM L-glutamiinia, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvaattia, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820400a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Kylvötiheys
1–3 × 10⁴ solua/cm²
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulamisen jälkeinen palautuminen
Sulattamisen jälkeen levitä solut 2–5 x 104 solua/cm2 ja anna solujen toipua pakastusprosessista ja kiinnittyä vähintään 24 tunnin ajan.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Rotua / alalajia
Tg(SV40E)Bri/7 siirtogeeninen
Luovuttajan ikä
Aikuiset