Gå direkt till innehållet
mIMCD-3
Vävnad
Njure, inre medullär samlingskanal
Sjukdom
Normal
Synonymer
mIMCD3, IMCD-3, IMCD3, mouse Inner Medullary Collecting Duct-3

mIMCD-3

Cell line · Produktnummer 305382

The mIMCD-3 cell line is derived from the murine inner medullary collecting duct and is widely used as a model for studying renal epithelial cell biology,...

€550.00exkl. moms och frakt
Finns i lager
Lot
Rekommenderat (det färskaste partiet)
  • CoA
1

01Allmän information

Beskrivning

Cellinjen mIMCD-3 härstammar från den inre medullära samlingskanalen hos mus och används i stor utsträckning som modell för att studera njurens epitelcellbiologi, njurens utveckling och patofysiologi. Denna odödliggjorda cellinje uppvisar egenskaper som är typiska för samlingskanalen, däribland förmågan att bilda tubulära strukturer i 3D-odlingssystem samt uttryck av proteiner för täta förbindelser, akvaporiner och epitelmarkörer. mIMCD-3-celler är särskilt värdefulla för att utforska mekanismerna bakom jontransport, vattenreglering och cellernas respons på mekanisk påfrestning, vilket gör dem till ett viktigt verktyg inom njurforskningen.

mIMCD-3-celler har använts i studier av polycystisk njursjukdom (PKD) för att förstå den molekylära grunden för cystbildning. I synnerhet har denna cellinje genetiskt modifierats för att undersöka rollen hos polycystinproteinerna (PKD1 och PKD2), vilka spelar en nyckelroll vid autosomal dominant polycystisk njursjukdom (ADPKD). Exempelvis uppvisar mIMCD-3-celler som saknar PKD1 onormal tubulär dilatation under mekanisk påfrestning, vilket efterliknar den cystbildning som observeras hos PKD-patienter. Dessutom har experiment med mIMCD-3-celler visat vilken roll primära cilier spelar för att förmedla cAMP-signalering och mekanotransduktion – kritiska processer för njurens epitelialfunktion och sjukdomspatologi.

Denna cellinje används även vid läkemedelsutveckling och -testning, särskilt i samband med nefrotoxicitet och njurspecifika behandlingar. mIMCD-3-celler utgör en plattform för att studera reaktioner på kemoterapeutiska medel som cisplatin, vilka kan framkalla oxidativ stress och apoptos i njurceller. Dessutom gör deras robusta tillväxtegenskaper och reproducerbarhet under odlingsförhållanden mIMCD-3-cellerna till en anpassningsbar modell för att undersöka olika aspekter av njurbiologi och för att utveckla behandlingsmetoder vid njursjukdomar.

Vävnad
Njure, inre medullär samlingskanal
Sjukdom
Normal
Synonymer
  • mIMCD3
  • IMCD-3
  • IMCD3
  • mouse Inner Medullary Collecting Duct-3

02Klassificering

Organism
Mus
Kön
Ospecificerat
Tillväxtegenskaper
Följsam
GMO-status
GMO-S1
Detaljer om GMO-status
GMO-S1: This murine inner medullary collecting duct cell line (mIMCD-3) contains an SV40 T-Antigen transgene derived from a transgenic mouse model, supporting immortalization. The construct is stably present in primary kidney-derived cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosäkerhetsnivå
2

03Egenskaper

Morfologi
Epitelliknande

04Identifierare

Källa
mIMCD-3 (Cytion-katalognummer 305382)
NCBI-skattenummer
10090
Cellosaurus
CVCL_0429

05Uttryck och mottaglighet

Virus
Transformant: Simian virus 40 (SV40)

06Hantering och odling

Odlingsmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukos, w: 2,5 mM L-glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820400a)
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Komplettera mediet med 10% FBS
Dissociationsmedel
Accutase
Vidareodling
Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med Accutase, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
Såtäthet
1 till 3 × 10⁴ celler/cm²
Vätskeförnyelse
2 till 3 gånger per vecka
Återhämtning efter upptining
Efter upptining, plattlägg cellerna vid 2 till 5 x 104 celler/cm2 och låt cellerna återhämta sig från frysprocessen och fästa i minst 24 timmar.
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

08Donator

Ras / underart
Tg(SV40E)Bri/7 transgena
Donatorns ålder
Vuxen