Gå til innholdet
mIMCD-3
Vev
Nyre, indre medullær samlekanal
Sykdom
Normal
Synonymer
mIMCD3, IMCD-3, IMCD3, mouse Inner Medullary Collecting Duct-3

Dokumenter

mIMCD-3

Cell line · Produktnummer 305382

The mIMCD-3 cell line is derived from the murine inner medullary collecting duct and is widely used as a model for studying renal epithelial cell biology,...

€550.00ekskl. mva. og frakt
På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

Cellelinjen mIMCD-3 stammer fra den indre medullære samlekanalen hos mus og brukes i stor utstrekning som modell for å studere nyreepitelcellers biologi, nyreutvikling og patofysiologi. Denne immortalisert cellelinjen viser egenskaper som er typiske for samlekanalen, inkludert evnen til å danne rørformede strukturer i 3D-kultursystemer og uttrykk for tette forbindelsesproteiner, akvaporiner og epitelmarkører. mIMCD-3-celler er spesielt verdifulle for å utforske mekanismer for ionetransport, vannregulering og cellulær respons på mekanisk stress, noe som gjør dem til et viktig verktøy i nefrologisk forskning.

mIMCD-3-celler har blitt brukt i studier av polycystisk nyresykdom (PKD) for å forstå det molekylære grunnlaget for cyste-dannelse. Spesielt har denne cellelinjen blitt genetisk modifisert for å undersøke rollen til polycystinproteiner (PKD1 og PKD2), som er sentrale aktører i autosomal dominant polycystisk nyresykdom (ADPKD). For eksempel viser mIMCD-3-celler uten PKD1 unormal utvidelse av tubuli under mekanisk belastning, noe som etterligner den cystedannelsen som observeres hos PKD-pasienter. I tillegg har eksperimenter med mIMCD-3-celler påvist den rolle primærcilier spiller i formidlingen av cAMP-signalering og mekanotransduksjon – avgjørende prosesser for nyreepitelets funksjon og sykdomspatologi.

Denne cellelinjen brukes også i legemiddelutvikling og -testing, særlig i sammenheng med nefrotoksisitet og nyrespesifikke behandlinger. mIMCD-3-celler utgjør en plattform for å studere responser på kjemoterapeutiske midler som cisplatin, som kan indusere oksidativt stress og apoptose i nyreceller. Videre gjør deres robuste vekstegenskaper og reproduserbarhet under dyrkingsforhold mIMCD-3-celler til en fleksibel modell for å undersøke ulike aspekter av nyrebiologi og for å fremme terapeutiske tilnærminger ved nyresykdommer.

Vev
Nyre, indre medullær samlekanal
Sykdom
Normal
Synonymer
  • mIMCD3
  • IMCD-3
  • IMCD3
  • mouse Inner Medullary Collecting Duct-3

02Klassifisering

Organisme
Mus
Sex
Uspesifisert
Vekstegenskaper
Tilhenger
GMO-status
GMO-S1
Detaljer om GMO-status
GMO-S1: This murine inner medullary collecting duct cell line (mIMCD-3) contains an SV40 T-Antigen transgene derived from a transgenic mouse model, supporting immortalization. The construct is stably present in primary kidney-derived cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosikkerhetsnivå
2

03Egenskaper

Morfologi
Epitel-lignende

04Identifikatorer

Kildehenvisning
mIMCD-3 (Cytion-katalognummer 305382)
NCBI-skattenummer
10090
Cellosaurus
CVCL_0429

05Uttrykk og mottakelighet

Virus
Transformant: Simian virus 40 (SV40)

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukose, w: 2,5 mM L-glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820400a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Såtetthet
1 til 3 × 10⁴ celler/cm²
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Gjenoppretting etter tining
Etter tining, plasser cellene på 2 til 5 x 104 celler/cm2 og la cellene komme seg etter fryseprosessen og feste seg i minst 24 timer.
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Rase / underart
Tg(SV40E)Bri/7 transgen
Donorens alder
Voksen