
- Tessuto
- Rene, dotto collettore medullare interno
- Malattia
- Normale
- Sinonimi
- mIMCD3, IMCD-3, IMCD3, mouse Inner Medullary Collecting Duct-3
Documenti
mIMCD-3
Cell line · Codice prodotto 305382
The mIMCD-3 cell line is derived from the murine inner medullary collecting duct and is widely used as a model for studying renal epithelial cell biology,...
Personalizzazione / Suggerimenti
- mIMCD-3Cell line€550.00
Consigliati (partita più recente)
01Informazioni generali
- Descrizione
La linea cellulare mIMCD-3 deriva dal dotto collettore medullare interno murino ed è ampiamente utilizzata come modello per lo studio della biologia delle cellule epiteliali renali, dello sviluppo renale e della fisiopatologia. Questa linea cellulare immortalizzata presenta caratteristiche tipiche del dotto collettore, tra cui la capacità di formare strutture tubulari in sistemi di coltura 3D e l’espressione di proteine delle giunzioni strette, acquaporine e marcatori epiteliali. Le cellule mIMCD-3 sono particolarmente preziose per l’esplorazione dei meccanismi di trasporto ionico, della regolazione idrica e della risposta cellulare allo stress meccanico, il che le rende uno strumento essenziale nella ricerca nefrologica.
Le cellule mIMCD-3 sono state utilizzate in studi sulla malattia renale policistica (PKD) per comprendere le basi molecolari della formazione delle cisti. In particolare, questa linea cellulare è stata geneticamente modificata per studiare il ruolo delle proteine policistine (PKD1 e PKD2), che svolgono un ruolo chiave nella malattia renale policistica autosomica dominante (ADPKD). Ad esempio, le cellule mIMCD-3 prive di PKD1 mostrano una dilatazione tubulare anomala sotto stress meccanico, riproducendo la cistogenesi osservata nei pazienti affetti da PKD. Inoltre, esperimenti condotti sulle cellule mIMCD-3 hanno dimostrato il ruolo delle ciglia primarie nella mediazione della segnalazione dell’AMPc e della meccano-trasduzione, processi fondamentali per la funzione epiteliale renale e la patologia della malattia.
Questa linea cellulare viene impiegata anche nella scoperta e nella sperimentazione di farmaci, in particolare nel contesto della nefrotossicità e delle terapie specifiche per il rene. Le cellule mIMCD-3 forniscono una piattaforma per lo studio delle risposte ad agenti chemioterapici come il cisplatino, che può indurre stress ossidativo e apoptosi nelle cellule renali. Inoltre, le loro solide caratteristiche di crescita e la riproducibilità in condizioni di coltura rendono le cellule mIMCD-3 un modello versatile per lo studio di diversi aspetti della biologia renale e per il progresso degli approcci terapeutici nelle malattie renali.
- Tessuto
- Rene, dotto collettore medullare interno
- Malattia
- Normale
- Sinonimi
- mIMCD3
- IMCD-3
- IMCD3
- mouse Inner Medullary Collecting Duct-3
02Classificazione
- Organismo
- Mouse
- Sesso
- Non specificato
- Proprietà di crescita
- Aderente
- Presenza di OGM
- GMO-S1
- Dettagli sullo stato degli OGM
- GMO-S1: This murine inner medullary collecting duct cell line (mIMCD-3) contains an SV40 T-Antigen transgene derived from a transgenic mouse model, supporting immortalization. The construct is stably present in primary kidney-derived cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Livello di biosicurezza
- 2
03Caratteristiche
- Morfologia
- Simile all'epitelio
04Identificatori
- Riferimento bibliografico
- mIMCD-3 (codice catalogo Cytion 305382)
- Codice fiscale NCBI
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_0429
05Espressione e suscettibilità
- Virus
- Trasformante: Simian virus 40 (SV40)
06Manipolazione e coltura
- Terreno di coltura
- DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L di glucosio, w: 2,5 mM di L-Glutammina, w: 15 mM di HEPES, w: 0,5 mM di Sodio piruvato, w: 1,2 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820400a)
- Atmosfera di incubazione
37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.
- Integratori
- Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
- Reagente di dissociazione
- Accutase
- Subcoltura
- Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
- Densità di semina
- da 1 a 3 × 10⁴ cellule/cm²
- Rinnovo dei fluidi
- da 2 a 3 volte alla settimana
- Recupero post-scongelamento
- Dopo lo scongelamento, piastrare le cellule a una densità compresa tra 2 e 5 x 104 cellule/cm2 e lasciare che le cellule si riprendano dal processo di congelamento e aderiscano per almeno 24 ore.
- Scongelamento e coltura
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Controllo di qualità e crioconservazione
- Sterilità
La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.
Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.
- Terreno di coltura congelato
- Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
- Condizioni di conservazione
Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.
- Condizioni di spedizione
Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.
08Donatore
- Razza / sottospecie
- Tg(SV40E)Bri/7 transgenico
- Età dei donatori
- Adulti
09Aspetti legali e di sicurezza
- Misure di sicurezza
- Quando si prevede di conservare una crioviale in azoto liquido per un futuro scongelamento, è obbligatorio attenersi a rigorose misure di sicurezza. Guanti e indumenti protettivi appropriati sono essenziali e l'uso di una maschera facciale o di occhiali di sicurezza è richiesto durante il trasferimento dei campioni congelati da o verso il serbatoio di azoto liquido. Questo per ridurre il rischio di lesioni dovute a potenziali esplosioni di crioviali al momento della rimozione, che possono provocare la proiezione di frammenti taglienti.
- Garanzia
Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto
Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia
- È richiesto un accordo di trasferimento di materiale
- Sì