
- Tissue
- ไต, ท่อรวบรวมในส่วนเมดูลา
- Disease
- ปกติ
- Synonyms
- mIMCD3, IMCD-3, IMCD3, mouse Inner Medullary Collecting Duct-3
Documents
mIMCD-3
Cell line · Product number 305382
The mIMCD-3 cell line is derived from the murine inner medullary collecting duct and is widely used as a model for studying renal epithelial cell biology,...
Customization / Recommendations
- mIMCD-3Cell line€550.00
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
สายเซลล์ mIMCD-3 มีต้นกำเนิดจากท่อเก็บน้ำในส่วนเมดัลลาภายในของหนู และถูกใช้อย่างแพร่หลายเป็นแบบจำลองในการศึกษาชีววิทยาของเซลล์เยื่อบุไต การพัฒนาของไต และพยาธิสรีรวิทยา สายเซลล์ที่ไม่ตายนี้มีลักษณะเฉพาะของท่อเก็บน้ำในไต รวมถึงความสามารถในการสร้างโครงสร้างท่อในระบบการเพาะเลี้ยงแบบ 3 มิติ และการแสดงออกของโปรตีนที่สร้างจุดเชื่อมต่อแน่น (tight junction proteins), อะควาพอริน (aquaporins), และตัวบ่งชี้เซลล์เยื่อบุผิว เซลล์ mIMCD-3 มีคุณค่าอย่างยิ่งในการศึกษากลไกการขนส่งไอออน การควบคุมน้ำ และการตอบสนองของเซลล์ต่อแรงกล ทำให้เซลล์เหล่านี้เป็นเครื่องมือสำคัญในการวิจัยด้านโรคไต
เซลล์ mIMCD-3 ได้ถูกนำมาใช้ในงานวิจัยเกี่ยวกับโรคไตถุงน้ำ (PKD) เพื่อทำความเข้าใจพื้นฐานทางโมเลกุลของการก่อตัวของถุงน้ำ โดยเฉพาะอย่างยิ่ง สายเซลล์นี้ได้รับการดัดแปลงทางพันธุกรรมเพื่อศึกษาบทบาทของโปรตีนโพลีซิสติน (PKD1 และ PKD2) ซึ่งเป็นปัจจัยสำคัญในโรคไตหลายถุงน้ำแบบออโตโซมอลโดมินันท์ (ADPKD) ตัวอย่างเช่น เซลล์ mIMCD-3 ที่ขาด PKD1 จะแสดงการขยายตัวของท่อไตอย่างผิดปกติภายใต้ความเครียดทางกล ซึ่งเลียนแบบกระบวนการสร้างถุงน้ำที่พบในผู้ป่วย PKD นอกจากนี้ การทดลองที่เกี่ยวข้องกับเซลล์ mIMCD-3 ยังได้แสดงให้เห็นถึงบทบาทของซิเลียปฐมภูมิในการเป็นตัวกลางของสัญญาณ cAMP และการถ่ายทอดกลไก ซึ่งเป็นกระบวนการสำคัญในหน้าที่ของเยื่อบุไตและพยาธิสภาพของโรค
สายเซลล์นี้ยังถูกนำมาใช้ในการค้นพบและทดสอบยา โดยเฉพาะในบริบทของความเป็นพิษต่อไตและการรักษาที่เฉพาะเจาะจงต่อไต เซลล์ mIMCD-3 เป็นแพลตฟอร์มสำหรับการศึกษาการตอบสนองต่อสารเคมีบำบัด เช่น ซิสพลาติน ซึ่งสามารถก่อให้เกิดความเครียดออกซิเดทีฟและอะพอพโทซิสในเซลล์ไต นอกจากนี้ คุณสมบัติการเจริญเติบโตที่แข็งแรงและความสามารถในการทำซ้ำได้ภายใต้สภาพการเพาะเลี้ยง ทำให้เซลล์ mIMCD-3 เป็นแบบจำลองที่ปรับใช้ได้สำหรับการศึกษาด้านต่าง ๆ ของชีววิทยาไต และเพื่อพัฒนาวิธีการรักษาโรคไต
- Tissue
- ไต, ท่อรวบรวมในส่วนเมดูลา
- Disease
- ปกติ
- Synonyms
- mIMCD3
- IMCD-3
- IMCD3
- mouse Inner Medullary Collecting Duct-3
02Classification
- Organism
- Mouse
- Sex
- Unspecified
- Growth properties
- Adherent
- GMO status
- GMO-S1
- GMO status details
- GMO-S1: This murine inner medullary collecting duct cell line (mIMCD-3) contains an SV40 T-Antigen transgene derived from a transgenic mouse model, supporting immortalization. The construct is stably present in primary kidney-derived cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biosafety level
- 2
03Characteristics
- Morphology
- ลักษณะคล้ายเยื่อบุผิว
04Identifiers
- Citation
- mIMCD-3 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 305382)
- NCBI TaxID
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_0429
05Expression and susceptibility
- Viruses
- ทรานส์ฟอร์แมนท์: ไวรัสซิเมียน 40 (SV40)
06Handling and culture
- Culture medium
- DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 2.5 มิลลิโมลาร์ L-กลูตามีน, w: 15 มิลลิโมลาร์ HEPES, w: 0.5 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต, w: 1.2 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820400a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น
- Supplements
- เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
- Dissociation reagent
- แอคคูเทส
- Subculturing
- นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
- Seeding density
- 1 ถึง 3 x 104 เซลล์/ตารางเซนติเมตร
- Fluid renewal
- 2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
- Post-thaw recovery
- หลังจากละลายน้ำแข็งแล้ว ให้ใส่เซลล์ลงในจานเพาะเลี้ยงที่ความหนาแน่น 2 ถึง 5 x 104 เซลล์/ซม.2 และปล่อยให้เซลล์ฟื้นตัวจากกระบวนการแช่แข็งและยึดเกาะกับพื้นผิวเป็นเวลาอย่างน้อย 24 ชั่วโมง
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง
เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน
- Freeze medium
- ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
- Storage conditions
สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น
- Shipping conditions
เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า
08Donor
- Breed / subspecies
- Tg(SV40E)Bri/7 ทรานส์เจเนติก
- Donor age
- ผู้ใหญ่
09Legal and safety
- Safety precautions
- เมื่อวางแผนที่จะเก็บขวดแช่แข็งในไนโตรเจนเหลวเพื่อการละลายในอนาคต จำเป็นต้องปฏิบัติตามมาตรการความปลอดภัยอย่างเคร่งครัด การสวมถุงมือป้องกันและเสื้อผ้าที่เหมาะสมเป็นสิ่งจำเป็น และต้องใช้หน้ากากหรือแว่นตานิรภัยในระหว่างการถ่ายโอนตัวอย่างแช่แข็งไปยังหรือจากถังไนโตรเจนเหลว ทั้งนี้เพื่อลดความเสี่ยงจากการบาดเจ็บที่อาจเกิดจากการระเบิดของขวดแช่แข็งเมื่อนำออก ซึ่งอาจทำให้เศษแหลมคมกระเด็นออกมาได้
- Warranty
ที่Cytion เรามุ่งมั่นในคุณภาพและความมีชีวิตของผลิตภัณฑ์ของเรา เรารับประกันว่าเซลล์ของเราจะยังมีชีวิตอยู่เมื่อเริ่มการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 60 วันหลังจากจัดส่งจากโรงงานของเรา เรารับรองว่าวัสดุทั้งหมดเป็นไปตามข้อกำหนดที่ระบุไว้ใน ใบรับรองการวิเคราะห์ และ/หรือแผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์
สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม กรุณาดูที่ <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">นโยบายการรับประกัน.
- Material Transfer Agreement required
- Yes