Przejdź do treści
mIMCD-3
Chusteczka
Nerka, wewnętrzny kanalik zbiorczy rdzenia
Choroba
Normalny
Synonimy
mIMCD3, IMCD-3, IMCD3, mouse Inner Medullary Collecting Duct-3

Dokumenty

mIMCD-3

Cell line · Numer produktu 305382

The mIMCD-3 cell line is derived from the murine inner medullary collecting duct and is widely used as a model for studying renal epithelial cell biology,...

€550.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Linia komórkowa mIMCD-3 pochodzi z myszego wewnętrznego kanalików zbiorczych rdzenia nerkowego i jest szeroko stosowana jako model do badań nad biologią komórek nabłonkowych nerek, rozwojem nerek oraz patofizjologią. Ta nieśmiertelna linia komórkowa wykazuje cechy charakterystyczne dla kanalików zbiorczych, w tym zdolność do tworzenia struktur kanalikowych w trójwymiarowych systemach hodowli oraz ekspresję białek połączeń ścisłych, akwaporyn i markerów nabłonkowych. Komórki mIMCD-3 są szczególnie cenne w badaniu mechanizmów transportu jonów, regulacji gospodarki wodnej oraz odpowiedzi komórkowej na stres mechaniczny, co czyni je niezbędnym narzędziem w badaniach nefrologicznych.

Komórki mIMCD-3 wykorzystywano w badaniach nad policystyczną chorobą nerek (PKD) w celu zrozumienia molekularnych podstaw powstawania torbieli. W szczególności ta linia komórkowa została genetycznie zmodyfikowana w celu zbadania roli białek polikystyn (PKD1 i PKD2), które odgrywają kluczową rolę w autosomalnej dominującej polikistycznej chorobie nerek (ADPKD). Na przykład komórki mIMCD-3 pozbawione białka PKD1 wykazują nieprawidłowe rozszerzenie kanalików pod wpływem obciążenia mechanicznego, co naśladuje proces powstawania torbieli obserwowany u pacjentów z PKD. Ponadto eksperymenty z wykorzystaniem komórek mIMCD-3 wykazały rolę rzęsek pierwotnych w pośredniczeniu w sygnalizacji cAMP i mechanotransdukcji – procesach o kluczowym znaczeniu dla funkcji nabłonka nerkowego i patogenezy chorób nerek.

Linia ta jest również wykorzystywana w odkrywaniu i testowaniu leków, szczególnie w kontekście nefrotoksyczności i terapii ukierunkowanych na nerki. Komórki mIMCD-3 stanowią platformę do badania reakcji na środki chemioterapeutyczne, takie jak cisplatyna, które mogą wywoływać stres oksydacyjny i apoptozę w komórkach nerkowych. Ponadto ich silne właściwości wzrostowe i powtarzalność w warunkach hodowli sprawiają, że komórki mIMCD-3 stanowią elastyczny model do badania różnorodnych aspektów biologii nerek oraz do rozwoju metod terapeutycznych w chorobach nerek.

Chusteczka
Nerka, wewnętrzny kanalik zbiorczy rdzenia
Choroba
Normalny
Synonimy
  • mIMCD3
  • IMCD-3
  • IMCD3
  • mouse Inner Medullary Collecting Duct-3

02Klasyfikacja

Organizm
Mysz
Seks
Nieokreślone
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Status GMO
GMO-S1
Szczegółowe informacje dotyczące statusu GMO
GMO-S1: This murine inner medullary collecting duct cell line (mIMCD-3) contains an SV40 T-Antigen transgene derived from a transgenic mouse model, supporting immortalization. The construct is stably present in primary kidney-derived cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
2

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Podobny do nabłonka

04Identyfikatory

Źródło
mIMCD-3 (numer katalogowy Cytion 305382)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_0429

05Ekspresja i podatność

Wirusy
Transformant: Simian virus 40 (SV40)

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukozy, w: 2,5 mM L-glutaminy, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pirogronianu sodu, w: 1,2 g/l NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820400a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Gęstość wysiewu
od 1 do 3 × 10⁴ komórek/cm²
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Powrót do stanu sprzed rozmrożenia
Po rozmrożeniu należy umieścić komórki w płytkach w ilości od 2 do 5 x 104 komórek/cm2 i pozostawić je na co najmniej 24 godziny, aby mogły się zregenerować po procesie zamrażania i przylgnąć do podłoża.
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Rasa / podgatunek
Transgeniczny Tg(SV40E)Bri/7
Wiek dawcy
Dorosły