
- Chusteczka
- Nerka, wewnętrzny kanalik zbiorczy rdzenia
- Choroba
- Normalny
- Synonimy
- mIMCD3, IMCD-3, IMCD3, mouse Inner Medullary Collecting Duct-3
Dokumenty
mIMCD-3
Cell line · Numer produktu 305382
The mIMCD-3 cell line is derived from the murine inner medullary collecting duct and is widely used as a model for studying renal epithelial cell biology,...
Dostosowanie / Zalecenia
- mIMCD-3Cell line€550.00
Polecane (najświeższa partia)
01Informacje ogólne
- Opis
Linia komórkowa mIMCD-3 pochodzi z myszego wewnętrznego kanalików zbiorczych rdzenia nerkowego i jest szeroko stosowana jako model do badań nad biologią komórek nabłonkowych nerek, rozwojem nerek oraz patofizjologią. Ta nieśmiertelna linia komórkowa wykazuje cechy charakterystyczne dla kanalików zbiorczych, w tym zdolność do tworzenia struktur kanalikowych w trójwymiarowych systemach hodowli oraz ekspresję białek połączeń ścisłych, akwaporyn i markerów nabłonkowych. Komórki mIMCD-3 są szczególnie cenne w badaniu mechanizmów transportu jonów, regulacji gospodarki wodnej oraz odpowiedzi komórkowej na stres mechaniczny, co czyni je niezbędnym narzędziem w badaniach nefrologicznych.
Komórki mIMCD-3 wykorzystywano w badaniach nad policystyczną chorobą nerek (PKD) w celu zrozumienia molekularnych podstaw powstawania torbieli. W szczególności ta linia komórkowa została genetycznie zmodyfikowana w celu zbadania roli białek polikystyn (PKD1 i PKD2), które odgrywają kluczową rolę w autosomalnej dominującej polikistycznej chorobie nerek (ADPKD). Na przykład komórki mIMCD-3 pozbawione białka PKD1 wykazują nieprawidłowe rozszerzenie kanalików pod wpływem obciążenia mechanicznego, co naśladuje proces powstawania torbieli obserwowany u pacjentów z PKD. Ponadto eksperymenty z wykorzystaniem komórek mIMCD-3 wykazały rolę rzęsek pierwotnych w pośredniczeniu w sygnalizacji cAMP i mechanotransdukcji – procesach o kluczowym znaczeniu dla funkcji nabłonka nerkowego i patogenezy chorób nerek.
Linia ta jest również wykorzystywana w odkrywaniu i testowaniu leków, szczególnie w kontekście nefrotoksyczności i terapii ukierunkowanych na nerki. Komórki mIMCD-3 stanowią platformę do badania reakcji na środki chemioterapeutyczne, takie jak cisplatyna, które mogą wywoływać stres oksydacyjny i apoptozę w komórkach nerkowych. Ponadto ich silne właściwości wzrostowe i powtarzalność w warunkach hodowli sprawiają, że komórki mIMCD-3 stanowią elastyczny model do badania różnorodnych aspektów biologii nerek oraz do rozwoju metod terapeutycznych w chorobach nerek.
- Chusteczka
- Nerka, wewnętrzny kanalik zbiorczy rdzenia
- Choroba
- Normalny
- Synonimy
- mIMCD3
- IMCD-3
- IMCD3
- mouse Inner Medullary Collecting Duct-3
02Klasyfikacja
- Organizm
- Mysz
- Seks
- Nieokreślone
- Właściwości związane ze wzrostem
- Zwolennik
- Status GMO
- GMO-S1
- Szczegółowe informacje dotyczące statusu GMO
- GMO-S1: This murine inner medullary collecting duct cell line (mIMCD-3) contains an SV40 T-Antigen transgene derived from a transgenic mouse model, supporting immortalization. The construct is stably present in primary kidney-derived cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Poziom bezpieczeństwa biologicznego
- 2
03Cechy charakterystyczne
- Morfologia
- Podobny do nabłonka
04Identyfikatory
- Źródło
- mIMCD-3 (numer katalogowy Cytion 305382)
- Numer identyfikacji podatkowej NCBI
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_0429
05Ekspresja i podatność
- Wirusy
- Transformant: Simian virus 40 (SV40)
06Postępowanie i hodowla
- Pożywka hodowlana
- DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukozy, w: 2,5 mM L-glutaminy, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pirogronianu sodu, w: 1,2 g/l NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820400a)
- Atmosfera inkubacyjna
37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.
- Suplementy
- Uzupełnić podłoże 10% FBS
- Odczynnik dysocjacyjny
- Accutase
- Hodowla komórek w subkulturze
- Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
- Gęstość wysiewu
- od 1 do 3 × 10⁴ komórek/cm²
- Odnawianie płynów
- 2 do 3 razy w tygodniu
- Powrót do stanu sprzed rozmrożenia
- Po rozmrożeniu należy umieścić komórki w płytkach w ilości od 2 do 5 x 104 komórek/cm2 i pozostawić je na co najmniej 24 godziny, aby mogły się zregenerować po procesie zamrażania i przylgnąć do podłoża.
- Rozmrażanie i hodowla
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kontrola jakości i kriokonserwacja
- Bezpłodność
Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.
Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.
- Pożywka do zamrażania
- Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
- Warunki przechowywania
W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.
- Warunki wysyłki
Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.
08Darczyńca
- Rasa / podgatunek
- Transgeniczny Tg(SV40E)Bri/7
- Wiek dawcy
- Dorosły
09Kwestie prawne i bezpieczeństwo
- Środki bezpieczeństwa
- Planując przechowywanie kriofiolek w ciekłym azocie w celu ich późniejszego rozmrożenia, należy bezwzględnie przestrzegać rygorystycznych środków bezpieczeństwa. Niezbędne są odpowiednie rękawice i odzież ochronna, a podczas przenoszenia zamrożonych próbek do lub ze zbiornika z ciekłym azotem wymagane jest stosowanie maski lub okularów ochronnych. Ma to na celu zmniejszenie ryzyka obrażeń spowodowanych potencjalnymi eksplozjami kriowialu podczas wyjmowania, które mogą skutkować wyrzuceniem ostrych fragmentów.
- Gwarancja
W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu
Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym
- Wymagana umowa o transferze materiałów
- Tak