الانتقال إلى المحتوى
mIMCD-3
الأنسجة
الكلى، القناة المجمعة النخاعية الداخلية
المرض
عادي
المرادفات
mIMCD3, IMCD-3, IMCD3, mouse Inner Medullary Collecting Duct-3

المستندات

mIMCD-3

Cell line · رقم المنتج 305382

The mIMCD-3 cell line is derived from the murine inner medullary collecting duct and is widely used as a model for studying renal epithelial cell biology,...

€550.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن
متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

سلسلة الخلايا mIMCD-3 مستمدة من القناة المجمعة النخاعية الداخلية للفأر، وتُستخدم على نطاق واسع كنموذج لدراسة بيولوجيا الخلايا الظهارية الكلوية، وتطور الكلى، وعلم الفيزيولوجيا المرضية. يُظهر هذا الخط الخلوي المُخلَّد الخصائص النموذجية للقناة المجمعة، بما في ذلك القدرة على تكوين هياكل أنبوبية في أنظمة الاستزراع ثلاثية الأبعاد، والتعبير عن بروتينات الوصلات الضيقة، والأكوابورينات، وعلامات الخلايا الظهارية. تُعد خلايا mIMCD-3 ذات قيمة خاصة في استكشاف آليات نقل الأيونات، وتنظيم الماء، والاستجابة الخلوية للإجهاد الميكانيكي، مما يجعلها أداة أساسية في أبحاث أمراض الكلى.

وقد استُخدمت خلايا mIMCD-3 في دراسات مرض الكلى المتكيس (PKD) لفهم الأساس الجزيئي لتكوين الكيسات. وعلى وجه الخصوص، تم تعديل هذا الخط الخلوي وراثيًا لدراسة دور بروتينات البوليكستين (PKD1 وPKD2)، التي تلعب دورًا رئيسيًّا في مرض الكلى المتكيسة السائد الصبغي الجسدي (ADPKD). على سبيل المثال، تُظهر خلايا mIMCD-3 التي تفتقر إلى PKD1 توسعًا غير طبيعي في الأنابيب تحت الضغط الميكانيكي، مما يحاكي تكوين الكيسات الذي يُلاحظ لدى مرضى PKD. بالإضافة إلى ذلك، أظهرت التجارب التي شملت خلايا mIMCD-3 دور الأهداب الأولية في التوسط في إشارات cAMP والتحويل الميكانيكي، وهما عمليتان حاسمتان في وظيفة الظهارة الكلوية وعلم أمراض الكلى.

كما تُستخدم هذه السلالة الخلوية في اكتشاف الأدوية واختبارها، لا سيما في سياق السمية الكلوية والعلاجات الخاصة بالكلى. توفر خلايا mIMCD-3 منصة لدراسة الاستجابات للعوامل الكيميائية العلاجية مثل السيسبلاتين، الذي يمكن أن يسبب الإجهاد التأكسدي وموت الخلايا المبرمج في الخلايا الكلوية. علاوة على ذلك، فإن خصائص نموها القوية وقابليتها للتكرار في ظروف الاستزراع تجعل من خلايا mIMCD-3 نموذجًا قابلاً للتكيف لدراسة جوانب متنوعة من بيولوجيا الكلى ولتطوير الأساليب العلاجية لأمراض الكلى.

الأنسجة
الكلى، القناة المجمعة النخاعية الداخلية
المرض
عادي
المرادفات
  • mIMCD3
  • IMCD-3
  • IMCD3
  • mouse Inner Medullary Collecting Duct-3

02التصنيف

كائن حي
الماوس
الجنس
غير محدد
خصائص النمو
الملتزم
حالة الكائنات المعدلة وراثيًا
GMO-S1
تفاصيل حالة الكائنات المعدلة وراثيًا
GMO-S1: This murine inner medullary collecting duct cell line (mIMCD-3) contains an SV40 T-Antigen transgene derived from a transgenic mouse model, supporting immortalization. The construct is stably present in primary kidney-derived cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
مستوى السلامة البيولوجية
2

03الخصائص

المورفولوجيا
شبيه بالظهارة

04المعرّفات

المرجع
mIMCD-3 (رقم الكتالوج لدى Cytion: 305382)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
10090
سيلوصور
CVCL_0429

05التعبير والقابلية للإصابة

الفيروسات
المتحول: فيروس سيميان 40 (SV40)

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
DMEM: DMEM:Ham's F12 (1:1)، ث: 3.1 جم/لتر جلوكوز، ث: 2.5 ملي مولار جلوتامين، ث: 15 ملي مولار هيبيس (15 ملي مولار هيبيس)، ث: 0.5 ملي مولار بيروفات الصوديوم، ث: 1.2 ملي مولار/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820400a)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
كثافة البذر
من 1 إلى 3 × 10⁴ خلية/سم²
تجديد السوائل
2 إلى 3 مرات في الأسبوع
التعافي بعد ذوبان الجليد
بعد الذوبان، ضع الخلايا في طبق بمعدل 2 إلى 5 × 104 خلية/سم2 واترك الخلايا تتعافى من عملية التجميد وتلتصق لمدة 24 ساعة على الأقل.
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

السلالة / النوع الفرعي
المعدلة وراثيًا Tg(SV40E)Bri/7
عمر المتبرع
للبالغين